国家自然科学基金(s30530420)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：清华大学更多>>
- 发文基金：国家教育部“985工程”国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人Sef基因重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：2
- 2008年
- 构建人Sef-L和Sef-S基因的复制缺陷型重组腺病毒表达载体,为研究Sef的功能和作用机制以及Sef的基因治疗奠定基础。通过PCR方法以hSef的表达质粒为模板扩增得到hSef的编码序列,亚克隆到穿梭载体pAdTrack-CMV中,经测序验证之后,将穿梭载体使用Pine I酶切线性化,然后与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,得到重组的Ad-hSef-L和Ad-hSef-S质粒,最后将Ad-hSef-L和Ad-hSef-S质粒使用Pac I线性化,转染到HEK293细胞中,包装收获病毒颗粒,免疫印迹实验鉴定表达,荧光素酶报告实验验证其功能。成功构建了人Sef基因的复制缺陷型重组腺病毒表达载体,获得了有功能的Ad-hSef-L和Ad-hSef-S病毒重组子。
- 李智勇任永明荣知立李颖华程龙王银银常智杰
- 关键词：SEF腺病毒FGFMAPKPI3K
