国家自然科学基金(30670462)
- 作品数：35 被引量：41H指数：4
- 相关作者：吴士良徐岚姜智仇灏吴艳更多>>
- 相关机构：苏州大学苏州卫生职业技术学院苏州大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国防基础科研计划江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
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- c-jun siRNA的构建及其对胃癌细胞株SGC7901中β3GnT8基因表达的影响
- 2012年
- 目的 构建c-jun干扰载体,有效沉默胃癌SGC7901细胞株中的c-jun基因表达,研究其对胃癌SGC7901细胞株中β3GnT8基因表达的影响.方法 ①利用互联网资源针对c-jun基因的靶序列设计合成四条siRNA,将四条siRNA插入到RNA干扰载体pGPU6/GFP/Neo中构建成四条干扰载体.②将构建好的c-jun siRNA载体质粒pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1949、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1050、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1111、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1276通过阳离子脂质体将表达质粒分别转染SGC7901细胞,48h后荧光显微镜下观察不同浓度质粒的转染效率,通过RT-PCR法检测c-jun和β3GnT8基因mRNA的表达.结果 ①成功构建了四条正确的c-jun siRNA表达质粒;②成功筛选出一条对c-jun有明显抑制作用的siRNA干扰质粒,阻断c-jun表达后,糖基转移酶β3GnT8的表达受到明显抑制.结论 构建的c-jun siRNA表达质粒可以有效抑制胃癌SGC7901细胞株的c-jun基因表达,同时抑制糖基转移酶β3GnT8的表达,为研究胃癌的分子机制提供了一定的理论基础.
- 邹士涛姜智周未吴士良
- 关键词：C-JUNSIRNA胃癌细胞SGC7901
- 偏钒酸钠对HL-60细胞增殖及凋亡的影响
- 2011年
- 目的 探讨偏钒酸钠对HL-60细胞增殖及凋亡的影响.方法 MTT法观察生长抑制情况;琼脂糖电泳检测DNA条带;Hoecst33258染色后荧光显微镜观察细胞核的变化;流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡率.结果 不同浓度的偏钒酸钠处理HL-60细胞,24h采用MTT检测结果显示低剂量的偏钒酸钠促进细胞增殖,高剂量的偏钒酸钠抑制细胞的生长;24h时高浓度偏钒酸钠处理HL-60细胞可见到DNA出现梯形条带,且细胞核呈现细胞核浓缩现象;流式细胞仪测定不同浓度偏钒酸钠5×10-7mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L、1×10-11mol/L处理HL-60细胞,24h细胞凋亡率分别是（69.1±2.3）%、（56.3±4.9）%、（39.6±6.5）%、（31.4±1.6）%、（12.2±3.4）%,而培养24h的HL-60细胞自然凋亡率仅为（1.2±0.5）%（P＜0.05）.结论 偏钒酸钠可诱导HL-60细胞凋亡.
- 郭毅顾文超姜智孙妍君徐岚吴士良
- 关键词：HL-60细胞凋亡
- N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)对胃癌细胞SGC7901黏附迁移的影响
- 目的:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(ppGalNAcTs,EC2.4.1.4.1)是催化 O-糖链起始反应的第一步酶,将 UDP-GalNAc 上的 GalNAc 基团转移至蛋白质多肽链上特定序列中的 Thr 或 Ser...
- 岳爱环姜智周迎会吴士良
- 文献传递
- β3GalT7基因转染HL-60细胞及对其生物学行为的影响
- 2008年
- 目的:初步探讨人类β1,3半乳糖基转移酶7(β3GalT7)基因对HL60细胞的细胞周期、侵袭能力等方面的影响。方法:通过脂质体介导将本实验室构建好的β3GalT7真核正义表达载体pEGFP-C1-T7-Sense和反义表达载体pEGFP-C1-T7-AntiSense转染入HL60细胞;流式细胞仪分析各细胞株的细胞周期改变;Transwell侵袭实验检测β3GalT7对HL60细胞侵袭转移能力的影响。结果:随着β3GalT7表达的增高,G2+S期细胞增多,且细胞侵袭能力增强;而转染反义表达载体pEGFP-C1-T7-AntiSense的结果是相反的。结论:过度表达β3GalT7的HL-60细胞株体外增殖和侵袭能力增强。
- 行书丽岳爱环唐春花贾伟吴士良
- 关键词：反义表达载体细胞周期
- N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)对胃癌细胞SGC7901黏附迁移的影响
- 目的:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(ppGalNAcTs,EC2.4.1.4.1)是催化O-糖链起始反应的第一步酶,将UDP-GalNAc上的GalNAc基团转移至蛋白质多肽链上特定序列中的Thr或Ser的羟基上从而合成...
- 岳爱环姜智吴士良
- 三氧化二砷（As2O3）诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的实验研究
- 2011年
- 目的 观察不同浓度的三氧化二砷（As2O3）作用不同时间段后对乳腺癌细胞MCF-7的诱导凋亡作用和对β3GnT2 及β3GnT8表达的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 不同浓度As2O3作用于乳腺癌细胞后,观察其对乳腺癌细胞生长状态的影响;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察其对MCF-7细胞凋亡的影响;同时采用RT-PCR 和Western Blot 检测相关基因mRNA及蛋白的表达水平变化.结果 不同浓度的As2O3 均可抑制乳腺癌细胞株MCF-7生长,其抑制作用随剂量增大而加强,呈时间剂量依赖性.RT-PCR 结果显示：β3GnT2、β3GnT8在各个浓度As2O3剂量组作用下,与空白组比较,均有不同程度的变化.1μg/mL和2μg/mL浓度组、4μg/mL和40μg/mL浓度组在相同时间段下分别比较,均有统计学差异（P ＜0.05）.Western Blot 检测相关蛋白结果与mRNA表达水平基本一致.β3GnT2蛋白表达中,4μg/mL（4h）组、40μg/mL（4h） 组分别与4μg/mL（48h）浓度组比较,均有明显差异（P＜0.05）;而在β3GnT8蛋白表达中,40μg/mL（4h）、4μg/mL（48h） 浓度组分别与空白组比较,有显著性差异（P＜0.05）.结论 As2O3对MCF-7细胞有显著的体外生长抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖性;As2O3在体外能诱导MCF-7细胞凋亡,凋亡效应与剂量呈正相关;As2O3还能下调β3GnT2和β3GnT8基因的表达.
- 张焕萍姜智范育利徐岚吴士良
- 关键词：乳腺癌细胞株三氧化二砷凋亡糖基转移酶
- BSP siRNA 的构建及其对成骨样细胞株MC3T3-E1相关基因表达的影响
- 2011年
- 目的 构建BSP干扰表达载体,有效沉默小鼠成骨样细胞MC3T3-E1 Subclone 14细胞的BSP基因表达,研究其对MC3T3-E1 Subclone 14增殖分化过程中OCN等成骨相关基因表达的影响.方法 ①利用互联网资源针对BSP基因mRNA序列设计四条可能的小干扰RNA（siRNA）,将这四条小干扰RNA插入到RNA干扰载体pGPU6/GFP/Neo中构建成四条干扰载体.②将构建好的BSP siRNA 表达载体pGPU6/GFP/Neo-siBSP-1、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-2、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-3、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-4通过阳离子脂质体将表达质粒分别转染MC3T3-E1 Subclone 14细胞,48h后荧光显微镜下观察不同浓度质粒的转染效率,以RT-PCR 检测BSP和OCN等成骨相关基因mRNA的表达.结果 ①成功构建四条正确的BSP siRNA 表达载体;②成功筛选出一条对BSP有明显抑制作用的siRNA干扰载体,阻断BSP表达后,成骨相关基因cbfa1和OCN的表达均受到明显抑制.结论 构建的BSP siRNA 表达载体可以有效抑制MC3T3-E1 Subclone 14细胞的BSP基因表达,同时抑制相关基因cbfa1和OCN的表达,从而影响该成骨细胞形态与功能,为骨转移等相关疾病的治疗提供了一定的实验基础.
- 王建浩徐岚丁庆伟郑磊姜智吴士良
- 关键词：BSPSIRNA转染
- 糖基转移酶基因β3GalT7/GnT8和β3GnT2在白血病细胞株及人骨髓有核细胞中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:从mRNA水平观察不同白血病细胞和人骨髓标本中糖基转移酶β3GalT7/GnT8和β3GnT2的表达情况。方法:采用RT-PCR技术,在8种白血病细胞株及24例白血病患者骨髓有核细胞中检测β3GalT7/GnT8,β3GnT2 mRNA水平的表达,以10例正常成人骨髓有核细胞作相对正常对照。结果:β3GalT7/GnT8在SHI-1,THP-1,HL-60,K562,NB4,U937细胞和18例初诊白血病患者骨髓标本中有不同程度的表达,在KG1,Raji细胞和相对正常对照中没有表达;β3GnT2在SHI-1,THP-1,HL-60,K562,NB4,U937,Raji细胞,4例相对正常对照和16例初诊白血病患者骨髓标本中有不同程度的表达,在KG1细胞中和6例相对正常对照中没有表达。结论:β3GalT7/GnT8和β3GnT2与白血病的发生发展存在一定的关系,其mRNA的表达水平可以作为白血病早期诊断的一个标志。
- 孙斌仇灏胡从莉沈宏杰岑建农吴士良
- 关键词：糖基转移酶白血病
- β3GnT2、β3GnT8真核表达载体的构建及胃癌AGS、胶质瘤U251细胞株中β3GnT8 cDNA SNP的分布
- 2011年
- 目的β3GriT2和β3GriT8的克隆及真核表达载体的构建。方法RT-PCR法检测β3GnT2、β3GnT8在胃癌、胶质瘤、乳腺癌三类癌细胞株中的表达；PCR扩增带酶切位点β3GnT2、β3GnT8全长编码片段并构建真核表达载体βEGFP-C1-B3GnT2，βEGFP-C1-β3GnT8。结果β3GnT2、β3GnT8在上述癌细胞株中均有表达；带酶切位点β3GnT2、β3GnT8全长编码片段成功扩增并连接至pEGFP-C1载体上；胃癌AGS、胶质瘤U25l细胞株中β3GnT8 cDNA经测序鉴定存在4个一致的SNP位点。结论母βGnT2、β3GnT8共同表达于多种癌细胞株中；成功克隆β3GnT2、β3GnY8全长编码片段并构建真核表达载体βEGFP-C1-β3GnT2、βEGFP-C1-β3GnT8；发现胃癌AGS、胶质瘤U251细胞株中β3GnT8 cDNA SNP位点4个，为进一步的功能研究奠定了基础。
- 赵善成胡水君邹士涛赵俊宇韩洪伟吴士良
- 关键词：癌症转移真核表达载体
- 胃癌中β3GnT8的表达及临床意义被引量：5
- 2019年
- 目的探讨β3GnT8在胃癌中的表达及临床意义。方法制作胃癌组织芯片,采用免疫组化En Vision法检测β3GnT8、MMP-2、PCNA在胃癌及癌旁正常组织中的表达,并分析各蛋白之间表达的相关性及其与临床病理特征的关系。结果β3GnT8、MMP-2、PCNA在胃癌组织中的表达均高于癌旁正常组织(P=0. 001)。β3GnT8表达与胃癌临床分期(P=0. 001)、浸润深度(P=0. 011)、淋巴结转移(P=0. 003)呈显著正相关。β3GnT8表达与MMP-2(r=0. 703,P=0. 001)、PCNA的表达(r=0. 231,P=0. 024)呈显著正相关,β3GnT8阳性组的总体生存时间较阴性组显著缩短(χ2=3. 957,P=0. 047)。结论β3GnT8在胃癌中的表达增高,具有促进胃癌侵袭、转移的作用,与胃癌患者的不良预后有关。
- 刘振华吴士良黄山干文娟张永胜
- 关键词：胃肿瘤MMP-2PCNA免疫组织化学
