辽宁省教育厅基金(2009A754)
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
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- 相关机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIF-1α对电离辐射诱导人非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡作用及其机制的探讨
- 2012年
- 目的:探讨HIF-1α对电离辐射诱导人非霍奇金淋巴瘤(NHL)细胞凋亡的作用及其调控机制。方法:以HIF-1α抑制剂Echinomycin(EC)预处理人NHL细胞后给予5Gy X线照射,采用AnnexinⅤ染色方法检测肿瘤细胞凋亡水平的变化,采用蛋白质印迹法检测各细胞系中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达水平。将HIF-1αsiR-NA反义转染至NHL细胞中,检测转染后细胞凋亡分数及Caspase-3蛋白表达水平。结果:流式细胞仪检测结果显示,Namalwa细胞空白对照组、单纯照射组(RI)、RI+EC 2nmol/L组的凋亡率分别为5.27±1.13、13.81±3.12和39.96±6.81,Ramos细胞分别为6.02±1.26、12.98±3.07和40.76±11.58,Raji细胞则为7.16±0.46、17.62±4.94和47.85±10.22,P<0.01。电离辐射后,转染vector和HIF-1αsiRNA的Namalwa细胞凋亡率分别为15.32±3.64和20.20±1.87,Ramos细胞分别为15.05±2.46和21.02±3.12,t值分别为3.99和3.19,P<0.05;而Raji细胞则为10.90±1.65和17.26±0.69,t=5.98,P<0.01。蛋白质印迹法结果显示,通过EC预处理抑制HIF-1α的表达能够明显上调射线诱导的各NHL细胞系中Caspase-3蛋白表达水平,同时凋亡相关蛋白Bcl-2表达减低而Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值明显降低,与单纯照射组相比差异均有统计学意义,P<0.05。结论:抑制HIF-1α能够增加射线诱导的NHL细胞凋亡,其机制可能与增加Bax蛋白表达而下调Bcl-2蛋白表达有关。
- 乔俏姜元军李光
- 关键词：淋巴瘤非霍奇金HIF-1Α细胞凋亡电离辐射印迹法
- NF-κB p65对人非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡调控的研究被引量：7
- 2013年
- 目的:研究NF-κB p65对人非霍奇金淋巴瘤(NHL)细胞凋亡的作用及其调控机制。方法:以NF-κB p65抑制剂quinazoline(QNZ)处理人NHL细胞,采用Annexin-Ⅴ染色方法检测肿瘤凋亡水平的变化,蛋白质印迹法检测各细胞系中Survivin蛋白及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Cleaved Caspase-3的表达水平;进一步应用实时定量PCR方法检测Survivin mRNA水平。结果:NF-κB p65抑制剂QNZ能够诱导NHL细胞的凋亡(P<0.05),具有时间-剂量依赖性。10nmol/L QNZ作用72h后Namalwa、Ramos和Raji细胞凋亡率分别为(13.5±2.7)%、(16.4±2.8)%和(15.8±2.5)%。抑制NF-κB p65的表达能够显著下调淋巴瘤细胞中Survivin蛋白的表达水平,10nmol/L QNZ作用72h后Namalwa、Ramos和Raji细胞中Survivin蛋白表达为0.58±0.06、0.54±0.03和0.51±0.09。同时,凋亡相关蛋白Bcl-2表达减低而Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2与Bax蛋白比值明显降低,与对照组相比差异均有统计学意义,P<0.05。预处理QNZ后3种NHL细胞Survivin mRNA均不同程度下降,随浓度增加其作用更为明显,P<0.05。结论:抑制NF-κB p65能够诱导NHL细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin蛋白表达水平及对凋亡相关蛋白Bcl-2家族的调节有关。
- 乔俏姜元军李光
- 关键词：淋巴瘤核转录因子-KB生存素凋亡
- NF-κBp65对人非霍奇金淋巴瘤细胞HIF-1α-VEGF途径调节及其机制的探讨被引量：4
- 2012年
- 目的:研究NF-κB对人非霍奇金淋巴瘤(NHL)HIF-1α-VEGF途径的调控及其机制。方法:应用Echinomycin(EC)处理人NHL细胞,将HIF-1α反义质粒转染至肿瘤细胞中,采用蛋白质印迹法检测经两种方法处理后各细胞系中VEGF表达水平。以NF-κB特异性抑制剂quinazoline(QNZ)及Bay11-7082预处理人NHL细胞,检测各细胞系中HIF-1α蛋白的表达水平,同时采用实时定量PCR方法检测HIF-1αmRNA变化。应用QNZ处理NHL细胞后检测HIF-1α下游调控靶点VEGF的蛋白表达水平。结果:通过应用HIF-1α特异性抑制剂和转染反义质粒两种方法均能够抑制HIF-1α,明显下调了VEGF蛋白表达水平,与对照组相比差异均有统计学意义,P<0.05。NF-κB抑制剂QNZ及Bay11-7082能够降低NHL细胞HIF-1α蛋白及基因水平的表达,同时下调其下游调控靶点VEGF蛋白的表达,P<0.05。结论:抑制NF-κB可阻断人NHL细胞HIF-1α-VEGF通路,其机制可能与NF-κB调控HIF-1α的基因与蛋白表达有关。
- 乔俏姜元军李光
- 关键词：淋巴瘤非霍奇金NF-ΚB印迹法
- 电离辐射诱导NF-κB-HIF-1α通路在人淋巴瘤细胞中的活化被引量：10
- 2011年
- 目的观察电离辐射对恶性淋巴瘤细胞中NF-κB-HIF-1α通路的活化状态的影响，探讨恶性淋巴瘤放射抗拒的可能机制。方法采用Westernblot免疫印迹分析方法，检N5GyX射线照射1、4、10和20h后，Namalwa、Ramos和Raji3种恶性淋巴瘤细胞系中NF-κB、HIF-1α及其相关蛋白IKK的表达水平，观察1、10和50nmol／L NF-κB抑制剂QNZ对HIF-1α等蛋白表达的影响。结果照射4h后，3种淋巴瘤细胞中IKK蛋白表达增加（t=8．01、5．14和5．42，P〈0．01）。10h后，3种淋巴瘤细胞核p-P65蛋白表达增加（t=11．25、17．43和22．09，P〈0．01），至20h时表达开始下降。10～20h时，3种淋巴瘤细胞HIF-1α蛋白表达增加，与0h相比，差异均有统计学意义（t=19．05、12．44和12．88，P〈0．01）。与单纯照射组相比，采用NF-κB抑制剂预处理3种肿瘤细胞24h后，HIF-1α蛋白表达下降，且随药物浓度的增加而下降（t=18．69、19．35和12．26，P〈0．01）。结论电离辐射能够活化恶性淋巴瘤细胞中的NF-κB-HIF-1α通路，可能是肿瘤放射抗拒的机制之一。
- 乔俏赵欣宇李光
- 关键词：淋巴瘤NF-ΚBHIF-1Α电离辐射
- NF-κB p65抑制与X射线诱导的人非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡的研究被引量：2
- 2012年
- 目的 探讨NF-κB p65对X射线诱导人非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma, NHL）细胞凋亡的作用及其调控机制。方法 以NF-κB p65抑制剂quinazoline（QNZ）处理人NHL细胞。将NHL细胞株Namalwa、Ramos和 Raji细胞分为空白对照组、单纯照射组（IR）和X射线＋QNZ实验组（IR＋QNZ）,采用Annexin-Ⅴ染色方法检测肿瘤细胞凋亡水平的变化,采用Western blot方法检测各细胞株中Survivin及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Cleaved Caspase-3的表达水平;应用实时定量PCR方法检测Survivin mRNA水平。结果 应用流式细胞仪检测凋亡细胞百分比,结果显示,QNZ处理后进行照射与单纯照射组相比凋亡细胞明显增加,且具有药物浓度依赖性（t=2.93~12.52, P〈0.05）,Western blot法检测结果显示,电离辐射可显著增加人NHL细胞中Survivin蛋白的表达。而应用1、10和50 nmol/L QNZ处理人NHL细胞24 h后进行照射,可显著下调电离辐射所诱导的NHL细胞中的Survivin蛋白表达。随药物浓度增加其作用更为明显（t=3.29~16.72,P〈0.05）。同时凋亡相关蛋白Bcl-2表达减低,而Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值明显降低,与单纯照射组相比,差异有统计学意义（t=6.20~9.91, P〈0.05）。预处理QNZ后射线诱导的3种NHL 细胞Survivin mRNA均不同程度下降。结论 抑制NF-κB能够增加X射线诱导的NHL细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin蛋白表达水平及对凋亡相关蛋白Bcl-2家族的调节有关。
- 乔俏姜元军李光
- 关键词：淋巴瘤NF-ΚBX射线SURVIVIN
