国家自然科学基金(21272139) 作品数:10 被引量:22 H指数:2 相关作者: 刘新利 唐秀丽 祝文兴 孙瑞成 赵林 更多>> 相关机构: 齐鲁工业大学 军事医学科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省科技发展计划项目 山东省高等学校科技计划项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 化学工程 生物学 医药卫生 更多>>
产埃博霉素B纤维堆囊菌发酵条件的优化 被引量:1 2017年 埃博霉素是纤维堆囊菌产生的一种和紫杉醇具有相同抗癌作用的大环内酯类次级代谢产物。以So ce2161为出发菌株,通过一系列单因素实验确定了对产量影响最大的四个因素,即温度、初始pH、转速、接种量。对四个因素设计正交实验进行发酵条件优化,最终得到最佳实验条件为使用250 m L挡板三角瓶,在温度32℃、初始pH=7.2、转速180 r/min、接种量6%、装液量60 m L/250 m L、发酵时间6 d、种龄60 h条件下,埃博霉素B的产量为46.83 mg/L。 孙宝婷 祝文兴 刘新利关键词:发酵条件优化 正交实验 金属硫蛋白对环磷酰胺所致肝脏脂质氧化损伤的保护作用 2015年 本实验旨在探究金属硫蛋白(Metallothionein,简称MT)对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)所诱导的小鼠肝脏脂质氧化损伤的影响,选取18~22 g C57BL/OLA129野生型(MT^+/+)小鼠和MTⅠ/Ⅱ基因敲除(MT^-/-)小鼠,共分为6组,分别为MT^+/+组(对照组、60 mg/kg和120 mg/kg),MT^-/-和给药组(对照组、60 mg/kg和120 mg/kg)。给药组每天给予一次腹腔注射,连续给药2d;对照组同时给予生理盐水,末次给药24 h后处死,取肝脏用于实验。给药后,MDA升高,两组小鼠均发生氧化损伤,总SOD和GSH-Px活力变化具有剂量依赖性,但是MT^-/-小鼠变化更为敏感。由此,我们可以推测MT对CP引起的肝脏氧化损伤存在一定的保护作用。 唐秀丽 孙瑞成 秦春晶 刘新利关键词:金属硫蛋白 环磷酰胺 纤维堆囊菌So ce2161限制修饰系统研究 2017年 采用双向电泳技术从So ce2161中未获得内源性质粒,通过对So ce2161培养液、细胞壁及菌体内部DNA核酸酶进行提取纯化,并与外源基因孵育,发现了有较强活性的DNA核酸酶,对DH5α基因组DNA、质粒pET-32a均有降解作用。 孙宝婷 祝文兴 刘新利关键词:纤维堆囊菌 核酸酶 S-腺苷甲硫氨酸合成酶对埃博霉素生物合成的影响 被引量:1 2014年 【目的】研究S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMs)对埃博霉素生物合成的影响。【方法】通过向发酵培养基中添加抑制剂和促进剂,比较分析纤维堆囊菌中SAMs的活性变化以及埃博霉素的产量变化。【结果】在埃博霉素的合成期,SAMs的活性较高。加入抑制剂吲哚乙酸(IAA)之后,SAMs的活性和埃博霉素的产量都不同程度的降低,而加入促进剂对甲苯磺酸钠(p-TSA-Na)之后,SAMs的活性和埃博霉素的产量在不同程度上都有提高。在纤维堆囊菌的次级代谢中,SAMs活性与埃博霉素的生物合成量呈正相关。【结论】S-腺苷甲硫氨酸合成酶在纤维堆囊菌的埃博霉素生物合成过程中发挥了重要的作用。 李世旭 赵林 秦春晶 王晓娜 刘新利关键词:S-腺苷甲硫氨酸合成酶 埃博霉素 生物合成 对甲苯磺酸钠对埃博霉素产量的影响 2016年 为研究对甲苯磺酸钠(P—TSA—Na)对于埃博霉素产量的影响,探讨产量最佳时对苯磺酸钠的最优添加浓度和产量稳定性,分别向培养基内添加7个不同浓度的对甲苯磺酸钠溶液,进行发酵培养,以埃博霉素生物合成的产量为依据,确定最佳添加浓度、培养基体积、添加对甲苯磺酸钠浓度的范围。结果表明:对甲苯磺酸钠浓度在1~32mmol/L范围内与埃博霉素生物合成产量均呈正相关关系,4~16mmol/L范围内最明显,培养基内初始浓度达24mmol/L时,对埃博霉素生物合成产量的促进作用最大,S-腺苷甲硫氨酸合成酶比活力增大22%~75%,说明对甲苯磺酸钠对埃博霉素生物合成产量的增大有促进作用。 关泽健 赵林 张琳浩 张萌 刘新利关键词:埃博霉素 S-腺苷甲硫氨酸合成酶 金属硫蛋白对环磷酰胺所致免疫毒性作用研究 被引量:1 2015年 在本实验中,我们研究了金属硫蛋白(Metallothionein,MT)对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)诱导的C57小鼠免疫抑制作用的影响。以C57BL/OLA129野生型(MT^(+/+))小鼠和MTⅠ/Ⅱ基因敲除(MT^(-/-))小鼠为研究对象,观察染毒不同剂量的环磷酰胺后,C57小鼠各脏器组织的变化。结果发现,给药后,两组小鼠体重均明显下降,脾脏和胸腺的绝对重量和脏器系数减少,MT^(-/-)组脏器系数下降与给药剂量相关;并且MT^(-/-)组微核率和PCE/NCE比值下降均较MT^(+/+)变化明显。由此我们推测MT对CP引起的免疫毒性具有一定的缓解作用,提示MT在改善CP导致的免疫毒性中具有一定的应用价值。 唐秀丽 武瑞琴 刘新利关键词:金属硫蛋白 骨髓 免疫毒性 低聚半乳糖的研究进展 被引量:12 2017年 低聚半乳糖(GOS)是一种具有天然属性的功能性低聚糖,因其具有的理化性质及生理功能独特,在食品、调味品、保健品、医药等领域应用广泛,市场前景非常广阔。文章综述了低聚半乳糖的生产工艺、分离纯化方法以及应用,最后对高纯度的GOS的制备工艺进行了展望。 孙纯 祝文兴 刘新利关键词:功能性低聚糖 生产工艺 分离纯化 粘细菌的分离纯化与鉴定 被引量:1 2017年 粘细菌的次级代谢产物药用潜力巨大,粘细菌的分离纯化及鉴定对粘细菌的研究而言意义重大。常用的分离方法有食草动物粪便诱导法、滤纸诱导法和细菌划线法;纯化方法有直接纯化法和间接纯化法;鉴定方法除传统的镜检法外目前比较通用的是16S r DNA测序比对法。 孙宝婷 祝文兴 刘新利关键词:粘细菌 分离纯化 金属硫蛋白抗氧化作用研究进展 被引量:5 2015年 金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一种生物功能多样化的小分子蛋白,在重金属解毒、微量元素存储以及清除自由基等方面作用显著。本文结合相关文献,对金属硫蛋白的生理功能进行介绍,并重点总结了金属硫蛋白在应对金属、化学品以及辐射等造成的损伤中所发挥的抗氧化作用,包括金属硫蛋白抗氧化的机理及应用。最后,提出金属硫蛋白的研究现状和存在的缺陷,并对今后的研究做出展望。 唐秀丽 秦春晶 孙瑞成 刘新利关键词:金属硫蛋白 自由基 埃博霉素-菌蜕系统抑制肿瘤细胞增殖作用 被引量:1 2015年 利用大肠杆菌菌蜕搭载埃博霉素B(BG-Epo B),研究其对Hela细胞增殖的抑制作用,并且对搭载条件进行优化。MTT实验结果显示,BG-Epo B对Hela细胞的毒性作用显著大于游离埃博霉素B(Epo B,p<0.05),IC50值为8.2 mg/L,透射电镜观察发现,BG-Epo B对Hela细胞的杀伤力增强。 秦春晶 祝文兴 刘新利关键词:HELA细胞