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新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究: 2012年; 目的:建立新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。方法:分析新疆出血热病毒核酸S片段序列的保守性,设计新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR引物和探针。以体外转录后的RNA作为阳性对照模板,摸索出实时荧光RT-PCR检测的最佳引物浓度、探针浓度和反应体系条件,并进行灵敏度和特异性分析。结果:建立的新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CCHFV-FP终浓度250 nM,反向引物CCHFV-RP终浓度500 nM,探针CCHFV-Probe终浓度500 nM;扩增程序为:50℃10 min,95℃10 min;95℃5 s,57℃20 s 45次循环。该方法最低检测限约为2 copies病毒/反应,与森林脑炎病毒和汉坦病毒无交叉反应。结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于新疆出血热病毒的快速检测。; 苏锦坤师永霞郑夔李小波黄吉城相大鹏幸芦琴郭波旋; 关键词：新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR

黄热病现状分析及研究进展被引量：9: 2011年; 黄热病是黄病毒科、黄病毒属的黄热病病毒引起的急性传染病,经蚊媒传播,主要发生在非洲和美洲地区,严重威胁人类健康。目前该病尚无特效药治疗,接种疫苗是最好的预防途径。虽然亚洲地区尚未发现黄热病,但随着全球经济的发展,国际间的人群交往更为便利,全球贸易一体化和都市化生活等因素使得病毒和传播媒介更易在各个国家之间传播。我国应长期保持警惕,及时预防、控制该病通过国境口岸传入。本文就黄热病流行病学、预防控制,以及疫苗研究等情况进行了综述。; 苏锦坤师永霞洪烨郑夔李小波黄吉城相大鹏幸芦琴郭波旋; 关键词：黄热病流行病学疫苗

国境口岸猴痘病毒实时荧光PCR检测方法的建立被引量：4: 2009年; 〔目的〕建立快速、特异的猴痘病毒实时荧光PCR检测方法。〔方法〕制备猴痘病毒阳性样本,设计并合成相应的扩增引物及荧光标记探针,摸索最佳反应条件。〔结果〕本方法对模拟猴痘病毒样本的检测灵敏度达到102拷贝/反应。本方法快速、灵敏,并具有较高的特异性和重复性,可在3h内准确检测出猴痘病毒核酸。〔结论〕本方法适合国境口岸猴痘病毒快速检测,对防止猴痘病毒传入我国,保障我国的国境口岸卫生安全具有重要意义。; 李小波幸芦琴郑夔相大鹏; 关键词：猴痘病毒实时荧光PCR

马尔堡病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究被引量：2: 2011年; 目的建立马尔堡病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。方法人工合成马尔堡病毒特异性核酸序列作为阳性对照模板,设计实时荧光RT-PCR引物、探针并构建反应体系,对反应条件进行优化,验证该方法的特异性、灵敏度。结果建立的马尔堡病毒实时荧光RT-PCR检测方法对马尔堡病毒核酸检测有高度特异性,与1型～4型登革病毒、日本脑炎病毒和基孔肯雅病毒均无交叉反应,检测灵敏度为102拷贝/反应。结论该方法灵敏度高、特异性强,适用于对马尔堡病毒的快速检验。; 洪烨郑夔相大鹏黄吉城戴俊师永霞李小波幸芦琴郭波旋邓燕凤; 关键词：马尔堡病毒实时荧光RT-PCR

2例马来西亚籍输入性基孔肯雅热病例的实验室诊断被引量：5: 2009年; 〔目的〕通过系统的实验室检测发现并确认2例输入性基孔肯雅病例。〔方法〕采用实时荧光逆转录(Real time RT-PCR)、逆转录PCR(RT-PCR)检测方法对病人血清进行检测,并对RT-PCR扩增产物进行核苷酸序列测定。〔结果〕通过实时荧光RT-PCR、RT-PCR2种实验方法在该病例标本中检出基孔肯雅病毒核酸;对RT-PCR扩增产物进行测序,测出的521个碱基与基孔肯雅病毒核酸序列比对,结果同源性高达99%。〔结论〕2病例为输入性基孔肯雅实验室确诊病例。; 洪烨李小波黄吉城郑夔师永霞相大鹏幸芦琴郭波旋李华戴俊钟玉清; 关键词：输入性基孔肯雅热实验室

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国家质检总局科技计划项目(2008IK256)