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广州市部分高校广州管圆线虫的中间宿主东风螺感染情况调查被引量：3: 2013年; 目的调查广州市内有代表性的一部分高等院校广州管圆线虫中间宿主东风螺的情况，了解其分布及广州管圆线虫的感染情况，为制订广州管圆线虫病的防治措施提供依据。方法对广州市中心地带的各区进行调查，每个区选取1～2所高校作为调查点，在野外鼠类活动较多的地方采集东风螺作为调查样本，利用消化法观察并统计其广州管圆线虫的感染率与感染度。结果5个区共8个调查点均发现有东风螺分布，除中山大学北校区与华南农业大学未发现东风螺感染广州管圆线虫外，其余调查点均收集到感染的东风螺。所有调查点共检查东风螺292只，广州管圆线虫的感染率为16．1％（47／292），各地区感染率差异有统计学意义（X^2=186．4，P〈0．01），平均感染度为410．6条／螺。结论广州管圆线虫的中间宿主东风螺在广州各高校分布依旧广泛，且大部分东风螺均不同程度地感染广州管圆线虫．但总体感染率和感染度相对有所下降。; 吴挺丰聂蔓牛星跃冯嘉荣梁登陈婧何蔼詹希美; 关键词：广州管圆线虫中间宿主感染率

广州管圆线虫Asp-1基因的克隆表达及各虫期转录水平研究被引量：1: 2011年; 目的构建广州管圆线虫天冬氨酰蛋白酶(Asp-1)基因的原核表达系统,研究该基因在各虫期的转录水平。方法构建重组质粒pET-30a(+)-Asp-1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达载体,经IPTG诱导表达后,Ni-IDA亲和层析纯化表达产物。通过以β-肌动蛋白为内参、以各期虫cDNA为模板的实时荧光定量PCR,研究该基因在各虫期的表达水平。结果获得纯化的重组蛋白,相对分子质量约为43000,与生物信息学分析预测结果一致。qRT-PCR显示该基因在三期幼虫中表达丰度最高,四/五期幼虫、成虫雄虫、雌虫依次降低。结论 Asp-1基因的表达丰度在三期幼虫中最高的实验数据与三期幼虫感染性最强的事实相符,提示天冬氨酰蛋白酶有可能是幼虫入侵宿主的关键酶,为后续广州管圆线虫虫体侵入宿主的机制以及宿主保护机制研究打下基础。; 王琳杨潇曲振宇刘静刘茜何蔼陈婧李卓雅詹希美; 关键词：广州管圆线虫原核表达实时荧光定量PCR

广州管圆线虫V期幼虫cDNA表达文库中优势诊断抗原的筛选、鉴定和克隆: 2013年; 目的筛选与广州管圆线虫感染小鼠血清具有较强免疫反应性的优势诊断抗原。方法用感染广州管圆线虫21d的小鼠感染血清做免疫探针筛选广州管圆线虫V期幼虫cDNA表达文库,对筛选得到的阳性克隆进行插入片段的测序和生物信息学分析,再根据测序结果设计引物扩增该基因并将其克隆入PET-30a(+)载体中。结果共获得6个阳性克隆,经DNA测序及同源性分析表明,发现其中2个与广州管圆线虫髓鞘转录因子1(MYT1)高度同源,1个与广州管圆线虫胶原蛋白家族基因(alpha-collagen)高度同源,且均为全长cDNA。克隆出广州管圆线虫MYT1全长cDNA序列,构建的新基因重组质粒经双酶切后证明含有与目的片段长度相符合的目的片段。结论用感染小鼠血清作为探针初步筛选到2个广州管圆线虫基因,并成功构建MYT1的原核表达重组质粒PET30a(+)-MYT1。; 陈婧杨潇刘茜詹希美何蔼; 关键词：广州管圆线虫 CDNA文库

广州管圆线虫感染小鼠血清细胞因子及IgG亚类的动态观察被引量：1: 2011年; 目的观察小鼠感染广州管圆线虫后机体免疫的动态变化。方法分别采集感染前、感染后第1、3、7、18d的小鼠血清,用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-2I、L-4以及特异性免疫球蛋白G(IgG)亚类水平。结果广州管圆线虫感染的小鼠血清中IL-2的水平较感染前呈逐渐下降趋势,IL-4的水平与感染前小鼠相比先下降后呈升高趋势。抗体IgG1的水平与感染前小鼠相比明显升高,IgG2a的水平与感染前小鼠相比未见明显变化。结论小鼠Th1型免疫应答较弱,Th2型免疫应答增强。表明小鼠感染广州管圆线虫后机体细胞免疫较弱,体液免疫较强。; 刘静詹希美杨潇曲振宇王琳刘茜李卓雅吴忠道何蔼; 关键词：广州管圆线虫细胞因子免疫球蛋白G亚类

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国家自然科学基金(2005U0632003)