江苏省卫生厅面上基金(H200652)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 相关作者：宗明珠冯婉婷何敬东周建伟叶丽霖更多>>
- 相关机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅面上基金江苏省卫生厅医学科技发展基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结直肠癌奥沙利铂耐药相关蛋白的筛选与鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的:采用蛋白质组学技术筛选结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中对化疗药物奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药的相关蛋白,以期为CRC的个体化治疗提供生物标志物。方法:建立L-OHP耐药细胞株HT-29/L-OHP,提取细胞总蛋白,采用二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)和基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem masss pectrometry,MALDI-TOF-MS)筛选并鉴定与亲本HT-29细胞差异表达的蛋白,并应用蛋白质印迹法对鉴定获得的部分蛋白进行验证。结果:建立CRC亲本细胞株HT-29和L-OHP耐药细胞株HT-29/L-OHP蛋白的2-DE图谱,共获得表达差异2倍以上的蛋白质点38个,经MALDI-TOF-MS分析,有37个得到鉴定,与亲本细胞相比,表达上调的有17个,表达下调的20个;蛋白质印迹法检测结果显示,多聚胞嘧啶结合蛋白1[poly(C)-binding protein-1,PCBP1]和TUBB2A(tubulin beta-2A)蛋白在HT-29/L-OHP细胞中表达上调,膜联蛋白A3(annexin A3,ANXA3)和磷酸化应激诱导蛋白(stress-induced-phosphoprotein 1,STIP1)表达下调,与MALDI-TOF-MS的实验结果相一致。结论:筛选获得37个与CRC对L-OHP耐药的相关蛋白,为进一步研究CRC对L-OHP耐药机制提供了有力的实验依据。
- 宗明珠冯婉婷杜楠叶丽霖陶善东付宪华何敬东周建伟
- 关键词：结直肠肿瘤肿瘤电泳质谱分析法奥沙利铂HT-29细胞
- 奥沙利铂体外干预结直肠癌细胞株HT-29的耐药基因及相关蛋白的表达被引量：2
- 2013年
- 目的:检测结直肠癌(colorectal cancer,CRC)奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药细胞株HT-29/L-OHP中多药耐药基因(multidrug resistance gene 1,MDR-1)、多药耐药相关蛋白的基因及他们编码的蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance associated protein,MRP)的表达,探讨其在L-OHP耐药中的作用。方法:利用MTT法检测L-OHP对原代细胞HT-29和耐药细胞HT-29/L-OHP的半数抑制率(IC50);利用RT-PCR及蛋白质印迹法检测HT-29/L-OHP中耐药基因及蛋白的表达情况。结果:L-OHP对HT-29和HT-29/L-OHP细胞的IC50分别为(4.15±0.17)μg.ml-1和(32.01±1.87)μg.ml-1,耐药指数为7.71;与原代细胞相比,HT29/L-OHP中耐药基因及蛋白表达均有所增加。结论:结直肠癌耐药细胞株中MDR-1、MRP基因及其编码的蛋白P-gp、MRP的表达高于原代细胞,这为预测CRC的多药耐药提供了新的依据。
- 宗明珠冯婉婷李进喻晓娟刘小宁何敬东
- 关键词：奥沙利铂耐药
