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国家自然科学基金(30800080)

作品数:8 被引量:48H指数:5
相关作者:刘选明赵小英贺热情唐冬英黄星群更多>>
相关机构:湖南大学中国热带农业科学院海南大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 6篇生物学
  • 3篇农业科学

主题

  • 6篇油菜
  • 4篇甘蓝
  • 4篇甘蓝型
  • 4篇甘蓝型油菜
  • 2篇克隆
  • 2篇基因
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇油菜种
  • 1篇油菜种子
  • 1篇油脂
  • 1篇诱变
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达和纯...
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇石蜡
  • 1篇石蜡切片
  • 1篇突变体
  • 1篇徒手切片

机构

  • 7篇湖南大学
  • 1篇海南大学
  • 1篇中国热带农业...
  • 1篇湖南亚华种业...

作者

  • 7篇刘选明
  • 6篇赵小英
  • 5篇贺热情
  • 4篇唐冬英
  • 4篇黄星群
  • 2篇宋丽丽
  • 2篇谢敏敏
  • 2篇周波
  • 2篇彭丹
  • 1篇郭明
  • 1篇彭武生
  • 1篇李旭
  • 1篇卓宇红
  • 1篇常丽
  • 1篇林建中
  • 1篇朱登峰
  • 1篇李明芳
  • 1篇廖晓英
  • 1篇钟鸣
  • 1篇吴磊

传媒

  • 2篇生命科学研究
  • 1篇激光生物学报
  • 1篇湖南农业科学
  • 1篇湖南大学学报...
  • 1篇西北植物学报
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2016
  • 2篇2012
  • 2篇2011
  • 2篇2010
  • 1篇2009
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
观察植物木质部的3种切片方法比较被引量:17
2010年
为探讨出一种能更清楚有效地观察植物木质部结构的细胞学切片方法,以甘蓝型油菜N529及拟南芥野生型col-4为材料,利用快速冷冻切片法、石蜡切片法及徒手切片法制备植物茎组织切片。切片经组织化学染色:1%间苯三酚和25%盐酸处理,并通过Nikon倒置显微镜观察和比较3种不同切片的植物细胞形态结构。结果表明快速冷冻切片法处理的植物细胞结构保存较完好,木质素染色清晰,且操作方法简便、快速、有效。
朱登峰唐冬英李明芳刘选明
关键词:冷冻切片
甘蓝型油菜BnCOP1基因编码区全长cDNA的克隆与功能研究被引量:6
2011年
通过分析拟南芥、豌豆、番茄和水稻的COP1(constitutively photomorphogenic 1)的cDNA序列,运用RT-PCR和改进的基因组步行(genome walking)技术相结合的方法,首次从甘蓝型油菜中克隆到油菜BnCOP1编码区cDNA的全长序列,其全长2 034 bp,编码677个氨基酸.同源性分析表明,其编码的氨基酸序列与拟南芥的同源性高达94%.对BnCOP1编码序列(cDNA)演绎出的氨基酸序列分析表明,其编码的蛋白包含有N端的环形锌指结合域(ring finger zinc bindingdomain,RING)、中间的卷曲螺旋形结构域(coiled-coil domain,coiled-coil),7个C端的WD-40重复序列(WD-40 repeats,WD-40)的功能域.半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR分析该基因在油菜中的表达模式,结果显示,BnCOP1在甘蓝型油菜的各个组织器官中均有表达,其中在花中的表达明显高于在根、叶、茎、果荚及子叶和胚轴中,暗示该蛋白可能与开花途径相关.过表达BnCOP1的转基因拟南芥植株在高度、主茎的直径和叶片大小上都呈现出比野生型弱小的表型,表明BnCOP1抑制了拟南芥光形态建成从而影响了植物的生长发育.
彭丹周波赵小英黄星群贺热情宋丽丽唐冬英刘选明
关键词:甘蓝型油菜RT-PCR转基因
甘蓝型油菜BnCYP78A8的克隆及序列分析
2012年
采用Genome walking方法,首次克隆到甘蓝型油菜BnCYP78A8的基因组序列,根据基因特异性引物克隆到其编码序列。基因组序列长1 679bp,有1个内含子和2个外显子。编码序列长1 605bp,编码534个氨基酸。序列比对分析表明,其氨基酸序列与拟南芥细胞色素P450单加氧酶基因(AtCYP78A8)的相似度高达88%。生物信息学分析显示,该蛋白含有1个细胞色素P450特有的亚铁血红素配合基结合位点和1个跨膜结构域。实时荧光定量PCR分析结果表明,BnCYP78A8在甘蓝型油菜的各个器官组织均有表达,根中表达量最高,表明该基因可能参与根的生长发育。
宋丽丽贺热情黄星群谢敏敏赵小英刘选明
关键词:甘蓝型油菜GENOMEWALKING
Over-expression of the AtGA2ox8 gene decreases the biomass accumulation and lignification in rapeseed (Brassica napus L.)被引量:6
2010年
Gibberellin 2-oxidase (GA 2-oxidase) plays very important roles in plant growth and development. In this study, the AtGA2ox8 gene, derived from Arabidopsis (Arabidopsis thaliana), was transformed and over-expressed in rapeseed (Brassica napus L.) to assess the role of AtGA2ox8 in biomass accumulation and lignification in plants. The transgenic plants, identified by resistant selection, polymerase chain reaction (PCR) and reverse-transcription PCR (RT-PCR) analyses, and green fluorescence examination, showed growth retardation, flowering delay, and dwarf stature. The fresh weight and dry weight in transgenic lines were about 21% and 29% lower than those in wild type (WT), respectively, and the fresh to dry weight ratios were higher than that of WT. Quantitative measurements demonstrated that the lignin content in transgenic lines decreased by 10%-20%, and histochemical staining results also showed reduced lignification in transgenic lines. Quantitative real-time PCR analysis indicated that the transcript levels of lignin biosynthetic genes in transgenic lines were markedly decreased and were consistent with the reduced lignification. These results suggest that the reduced biomass accumulation and lignification in the AtGA2ox8 over-expression rapeseed might be due to altered lignin biosynthetic gene expression.
Xiao-ying ZHAODeng-feng ZHUBo ZHOUWu-sheng PENGJian-zhong LINXing-qun HUANGRe-qing HEYu-hong ZHUODan PENGDong-ying TANGMing-fang LIXuan-ming LIU
关键词:RAPESEEDBIOMASSLIGNIFICATIONGIBBERELLINS
油菜种子的油脂和蛋白积累及相关基因表达的研究被引量:4
2012年
检测了油菜籽成熟过程的总蛋白和粗脂肪含量变化,以及与之相关23个基因在各器官及果荚各发育时期的表达情况。结果显示:蛋白在开花后25天(25 DAF)后大量累积,而油脂则在25 DAF后增速放缓,30DAF后才急剧上升。多数油脂合成相关酶基因在果荚中表达最高,叶片中次之,花蕾和花朵中有少量表达,茎中的表达很低,少数在根中表达,部分基因的表达随油菜果荚发育而持续增加,另一部分则呈先升高,再下降至25 DAF低点,再回升的趋势;转录因子LEC1、LEC2及WRI与贮藏蛋白基因Napin、Cruciferin主要在果荚中表达,前者的表达主要在果荚发育前期大量,其中WRI的出现起伏波动,后者主要在25、30 DAF大量表达。这表明种子成熟时总蛋白和粗脂肪含量变化可能与相关基因表达变化相关。
黄星群赵小英贺热情彭武生卓宇红刘选明
关键词:油菜基因表达PCR
甘蓝型油菜EMS诱变及多分枝和长角突变体分析被引量:9
2016年
油菜是世界上最重要的油料作物之一,同时也是我国食用油和饲用蛋白质的主要来源。采用0.8%甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate,EMS)溶液处理甘蓝型油菜玻里马胞质雄性不育系(pol cms)的保持系2B种子,从田间M_2诱变群体中筛选获得1 495个变异株,包括叶色、叶型、早花、株高和株型、雄性不育、裂蕾、花瓣形状和颜色、多分枝和长角等变异性状,占M_2诱变群体的7.4%。对多分枝和长角突变材料的农艺性状进行观察和统计分析,结果表明多分枝突变材料平均一次有效分枝比野生型多1.03倍,单株产量增加41.48%;长角突变材料角果长度为野生型的1.69倍,但果粒数无差异,单株产量提高49.66%。研究结果为今后进一步发掘这些突变性状相关基因,并应用于油菜品种改良奠定了基础。
廖晓英阎晋东钟鸣卓宇红吴丹贺热情赵小英刘选明
关键词:甘蓝型油菜
甘蓝型油菜BnCOP1基因的原核表达和纯化被引量:1
2011年
COP1蛋白是植物光信号调节网络中介导光信号转导的一个关键因子,对植物生长发育起重要调控作用.通过RT-PCR方法从甘蓝型油菜中克隆BnCOP1基因编码区全长序列,并将其连接到冷诱导原核表达载体pCold TF上,构建原核重组表达载体pCold TF/BnCOP1,转化大肠杆菌BL(21)star.通过IPTG法低温诱导表达融合蛋白.结果表明,重组质粒在大肠杆菌中获得高效表达,融合蛋白分子质量约为128 kD,融合蛋白在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经亲和层析纯化和Western blotting检测证实获得了高纯度的重组蛋白,这些结果为进一步研究油菜BnCOP1的结构和功能奠定了基础.
彭丹周波谢敏敏唐冬英赵小英刘选明
关键词:原核表达融合蛋白蛋白纯化
油菜突变体库构建与激素反应基因克隆分析被引量:5
2009年
以优质高产的油菜品种1244W6为材料,采用浸花蕾方法,将含有激活标记和Basta筛选标记质粒pSKI015的农杆菌进行转化,成功构建了油菜激活标记突变体库.通过Basta筛选,结果共获得约30 000个转基因株系(T1代).将部分转基因株系种子(T2代)培养在不含任何激素、或含有不同浓度植物激素的营养液中,结果筛选出激素反应突变体63个,长下胚轴和短下胚轴突变体分别为15和13个.采用TAIL-PCR技术,克隆了W1016激素反应突变体T-DNA插入位点基因组旁邻序列.
赵小英唐冬英黄星群贺热情林建中常丽郭明李旭雷少华钱煜吴磊刘选明
关键词:克隆油菜
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