湖北省卫生厅科研基金(JX2C32)
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
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- 氧化亚氮和异氟醚对大鼠耳蜗RNA产量的影响
- 2007年
- 目的通过评价氧化亚氮和异氟醚对大鼠耳蜗RNA产量的影响,探讨其对耳作用的可能机制。方法30只健康Wistar大鼠随机分为3组（n=10）,对照组（C组）持续吸入50%O2 3 h;氧化亚氮组（N组）持续吸入50%氧化亚氮.50%O23h;异氟醚组（Ⅰ组）持续吸入2.5%异氟醚-50%O2 3 h。采用TRIzol和RNeasy法分别提取耳蜗的RNA,用分光光度计测定RNA的产量,用电泳检测其质量,测定RNA的产量。结果与C组比较,N组单侧耳蜗RNA产量降低（P〈0.05）,Ⅰ组单侧耳蜗RNA产量差异无统计学意义（P〉0.05）。RNA纯度高,总RNA无降解。结论吸入50%氧化亚氮3h可降低大鼠耳蜗RNA产量,吸入2.5%异氟醚3 h对其无影响。
- 李元涛姚尚龙罗向红柯昌斌杨京利熊良志
- 关键词：氧化亚氮异氟醚耳蜗RNA
- 依托咪酯对氯化钾和咖啡因诱发豚鼠耳蜗外毛细胞内钙离子移动的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察不同浓度依托咪酯对氯化钾和咖啡因诱发的豚鼠耳蜗外毛细胞内钙离子移动的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)作用的可能机制。方法①30个活性良好的外毛细胞随机分为3组(n=10):对照组(C组)、低浓度依托咪酯组(E1组)、高浓度依托咪酯组(E2组),用Fluo-3AM荧光指示剂染色,分别给予Hanks液、50、100μmol/L依托咪酯预处理20 min。在激光共聚焦显微镜下动态观察各组预处理前、后以及40 mmol/L氯化钾诱发的细胞内钙荧光染色强度峰值的变化。②分组同①,观察各组预处理前、后以及20 mmol/L咖啡因诱发的细胞内钙荧光染色强度峰值的变化。结果①C组加入40 mmol/L氯化钾后细胞内钙荧光强度峰值从基础值105上升至221(P<0.01),E1组从基础值101上升至187(P<0.01),E2组从基础值103上升至150(P<0.01),E1组、E2组峰值分别较C组下降了近15.4%(P<0.05)和32.1%(P<0.01)。②C组加入20 mmol/L咖啡因后细胞内钙荧光强度峰值从基础值112上升至154(P<0.05),E1组从基础值103上升至148(P<0.05),E2组从基础值104上升至143(P<0.05)。但E1组和E2组细胞内钙荧光强度峰值较C组差异无显著性意义(P>0.05)。结论依托咪酯可浓度依赖性地抑制耳蜗外毛细胞电压依赖性Ca2+通道开放,减少胞外钙内流,降低耳蜗外毛细胞内钙离子浓度,而对内质网Ryanodine型钙库无明显影响。
- 李元涛黄穗萍黄晓雷吴铭广李亚文王芳周龙
- 关键词：依托咪酯细胞内钙离子外毛细胞耳蜗
- 异丙酚对氯化钾和咖啡因诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子移动的影响
- 2008年
- 目的:评价异丙酚对氯化钾和咖啡因诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子移动的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)的作用。方法:急性分离豚鼠耳蜗外毛细胞,选择30个活力较高的外毛细胞,随机分为3组(n=10):对照组(C组)、30μmol/L异丙酚组(P1组)和100μmol/L异丙酚组(P2组)。用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后,P1组和P2组分别给予30、100μmol/L异丙酚或咖啡因处理5min,然后加入氯化钾,采用激光共聚焦显微镜测定细胞内荧光强度的峰值,反映细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化。结果:异丙酚可抑制氯化钾诱发的[Ca2+]i增加并与浓度呈正相关,而对咖啡因诱发的[Ca2+]i增加无明显影响。结论:异丙酚可抑制豚鼠耳蜗外毛细胞Ca2+跨膜内流,降低[Ca2+]i,而对内质网功能无明显影响。
- 周龙王立林李元涛秦成名刘菊英
- 关键词：毛细胞耳蜗
- 异丙酚对豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子移动的影响被引量：1
- 2006年
- 目的观察不同浓度异丙酚对氯化钾诱发的豚鼠耳蜗外毛细胞内钙离子移动的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)作用的可能机制。方法用Fluo-3AM荧光指示剂染色急性分离的豚鼠耳蜗外毛细胞,在激光共聚焦显微镜下动态观察使用异丙酚前及异丙酚(50、250μmol／L)预处理后,氯化钾诱发的细胞内钙离子浓度的变化。结果异丙酚可使氯化钾诱发的外毛细胞内钙荧光染色强度的峰值下降,较对照组有明显差异,并与浓度呈正相关。结论异丙酚浓度依赖性地降低耳蜗外毛细胞内钙离子浓度,部分与抑止细胞外钙内流有关。
- 李元涛姚尚龙陈立波曾凡龙王君龚坚
- 关键词：异丙酚钙离子毛细胞
- 七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca^2＋跨膜内流和内质网钙释放功能的影响被引量：3
- 2008年
- 目的观察七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca^2＋跨膜内流和内质网钙释放功能的影响，探讨其对听觉外周感受器（耳蜗）作用的可能机制。方法第一部分成年豚鼠，雌雄不拘，迅速断头，取耳蜗，酶孵育后，机械分离法分离外毛细胞，30个活力良好的外毛细胞随机分为3组（n=10）：对照组（C组）、低浓度七氟醚组（S1组）和高浓度七氟醚组（S1组），用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后，分别给予纯氧、1．7％七氟醚、3．4％七氟醚处理20min，然后加入40mmol／L氯化钾，测定细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）。第二部分以20mmol／L咖啡因代替氯化钾，其余处理及分组同第一部分。结果第一部分与基础值比较，各组给予七氟醚后[Ca^2＋]．差异无统计学意义（P〉0．05），加入氯化钾后[Ca^2＋]．升高（P〈0．01）；S1组和S2组加入氯化钾后[Ca^2＋]．低于C组，且S2组低于S1组（P〈0．05）。第二部分与基础值比较，各组给予七氟醚后[Ca^2＋]．差异无统计学意义（P〉0．05），加入咖啡因后[Ca^2＋]．升高（P〈0．0）；加入咖啡因后各组[Ca^2＋]．差异无统计学意义（P〉0．05）。结论七氟醚可浓度依赖性地抑制豚鼠耳蜗外毛细胞电压依赖型Ca^2＋通道开放，而对内质网Ryanodine敏感性钙释放功能无影响。
- 李元涛杨京利周龙王燕罗向红刘菊英
- 关键词：内质网耳蜗七氟醚
- 吸入氧化亚氮对大鼠耳蜗总RNA产量的影响
- 2007年
- 目的通过检测氧化亚氮对大鼠耳蜗总RNA产量的影响,探讨氧化亚氮(N_2O)对大鼠内耳损伤的机制。方法将30只健康Wistar大鼠随机等分为3组:A组(对照组,n=10)持续吸入50%O_2 3 h;B组(实验组,n=10)持续吸入50%N_2O+50%O_2 3 h;C组(实验组,n=10)持续吸入50%N_2O+50%O_2 6 h。联用TRIzol和RNeasy法分别抽取3组大鼠耳蜗的总RNA,用分光光度法测总RNA的产量及电泳检测其质量。结果A组大鼠耳蜗得到总RNA 7.69μg;B组大鼠耳蜗得到总RNA 6.51μg,与A组比较减少15%;C组大鼠耳蜗得到总RNA 5.32μg,与A组比较减少31%。A_(260)/A_(280)值分别为2.07、2.04和2.05,提示RNA纯度高,电泳结果提示总RNA无降解。结论长时间吸入N_2O的大鼠耳蜗总RNA较正常大鼠耳蜗总RNA产量降低,提示N_2O干扰耳蜗RNA产量可能是造成耳损害的原因之一。
- 李元涛王芳陈立波王燕姚尚龙
- 关键词：氧化亚氮耳蜗
- 安氟醚对大鼠耳蜗一氧化氮合酶表达的影响
- 2010年
- 目的:观察安氟醚对大鼠耳蜗一氧化氮合酶(NOS)表达的影响,探讨其对耳蜗影响的可能机制。方法:30只Wistar大鼠随机分为3组(n=10),对照组(C组)持续吸入纯氧;低浓度安氟醚组(E1组)持续吸入1.5%安氟醚+纯氧;高浓度安氟醚(E2组)持续吸入3.0%安氟醚+纯氧,30min后处死大鼠,免疫组织化学方法检测耳蜗螺旋器、血管纹和螺旋神经节诱生型NOS(iNOS)、内皮型NOS(eNOS)和神经元型NOS(nNOS)的表达水平。结果:与C组比较,E1组耳蜗螺旋器、螺旋神经节iNOS、eNOS和nNOS以及血管纹eNOS表达均下调,E2组耳蜗螺旋器、血管纹和螺旋神经节iNOS、eNOS和nNOS表达下调(P<0.05或0.01);E2组耳蜗螺旋神经节eNOS和nNOS表达组较E下调明显(P<0.05)。结论:安氟醚可浓度依赖性地下调大鼠耳蜗NOS表达,从而影响耳蜗功能。
- 何京芬李元涛曹君谷寅黄晓雷吴铭广
- 关键词：安氟醚一氧化氮合酶耳蜗
- 异氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞内钙离子浓度变化的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察不同浓度异氟醚对氯化钾和咖啡因诱发的豚鼠耳蜗外毛细胞内钙离子移动的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)作用的可能机制。方法用Fluo-3AM荧光指示剂染色急性分离的豚鼠耳蜗外毛细胞,在激光共聚焦显微镜下动态观察使用1.0 MAC2、.0 MAC浓度的异氟醚预处理前、后氯化钾和咖啡因分别诱发的细胞内钙离子浓度的变化。结果异氟醚可使氯化钾诱发的外毛细胞内钙荧光染色强度的峰值下降,较对照组有明显差异,并与浓度呈正相关。但该两种浓度的异氟醚对咖啡因诱发的外毛细胞内钙荧光染色强度无明显影响。结论异氟醚浓度依赖性地降低耳蜗外毛细胞内钙离子浓度,部分与抑制细胞外钙内流有关,而对肌浆网功能无明显影响。
- 李元涛王燕王宇胡云刘菊英
- 关键词：异氟醚钙离子外毛细胞
- 氯胺酮对氯化钾诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子内流的影响
- 2008年
- 目的评价氯胺酮对氯化钾诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子内流的影响，探讨其对听觉外周感受器（耳蜗）的作用。方法成年豚鼠12只，雌雄不拘，迅速断头处死，暴露耳蜗，取出双侧昕泡，采用酶孵育后，机械分离法分离外毛细胞。选择30个活力较高的外毛细胞，随机分为3组（n=10）：对照组（C组）、100μmol／L氯胺酮组（K1组）和200μmol／L氯胺酮组（K2组）。用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后，K1组和K2组分别给予100、200μmol／L氯胺酮处理5min，然后加入40mmol／L氯化钾，采用激光共聚焦显微镜测定细胞内荧光强度，反映细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）。结果与基础值比较，各组加入氯胺酮后[Ca^2＋]i差异无统计学意义（P〉0．05），加入氯化钾后[Ca^2＋]i升高（P〈0．01）；K1组和K2组加入氯化钾后[Ca^2＋]i低于C组，且K1组低于K2组（P〈0．05或0．01）。结论氯胺酮可抑制豚鼠耳蜗外毛细胞Ca^2＋跨膜内流，从而降低[Ca^2＋]i。
- 李元涛吴波曾凡龙王君龚坚姚尚龙
- 关键词：氯胺酮耳蜗氯化钾
