广东省中医药管理局基金(1060032)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 突变体富集法检测表皮生长因子受体基因19外显子的缺失突变被引量：3
- 2010年
- 目的:建立突变体富集法检测非小细胞肺癌中表皮生长因子受体(EGFR)基因19外显子的缺失突变,并比较突变体富集法与直接法的检出率。方法:构建EGFR野生型和突变型的载体,按不同的比例配成混合液,分别用突变体富集法和直接测序法检测混合液中EGFR19外显子的缺失突变,确定两种方法的灵敏度。收集198例非小细胞肺癌住院患者的手术切除组织,分别采用两种方法对EGFR基因19外显子进行基因分析。结果:直接测序法可检测出1∶10突变质粒和野生型质粒混合液中的突变型,突变体富集法可达1∶100。198例标本中,直接测序法检出杂合性缺失23例,突变率为11.6%,突变体富集法检测出杂合性缺失41例,突变率为20.7%。EGFR19缺失突变多见于女性,病理类型多为肺腺癌和腺鳞癌。结论:突变体富集法检测EGFR19外显子缺失突变敏感性高,可提高样本EGFR19缺失突变的检出率。
- 苏健郭爱林黄迎陈世良张绪超陈志红钟文昭唐红艳
- 关键词：表皮生长因子受体
- 应用基因扫描方法快速检测EGFR基因19外显子缺失突变被引量：1
- 2010年
- 目的:应用基因扫描法检测人表皮生长因子受体(EGFR)基因19外显子缺失突变。方法:(1)将EGFR基因19外显子缺失(del E746-A750)型及野生型基因分别克隆到T载体,并将含突变型基因及含野生型基因的载体按1:1、1:5、1:10、1:50、1:100、1:300的比例进行混合,用基因扫描法检测19外显子的缺失,以确定其灵敏度。(2)基因扫描法检测225例非小细胞肺癌患者的手术组织或穿刺标本;荧光标记EGFR基因19外显子的上游引物,PCR扩增目的片段,3100A测序仪进行基因扫描,Gene Scan Genotyper 3.5软件分析结果。同时用直接测序法检测EGFR19外显子的缺失突变。结果:(1)基因扫描法可测出1:100混合液中的突变型,灵敏度较高。(2)225例肺癌标本,可检测出27例(12.0%)缺失;直接测序法则检出25例(11.5%)缺失突变。结论:基因扫描法检测EGFR基因19外显子的缺失,方法简便,成本低廉,敏感度高,可查出1%的突变。
- 黄迎苏健陈世良林嘉颖陈志红张绪超唐红艳陈剑光谢至郭爱林
- 关键词：EGFR基因扫描基因突变
