国家重点基础研究发展计划(2011CB100802)
- 作品数：41 被引量：201H指数：8
- 相关作者：王林枫张源淑沈向真庄苏倪迎冬更多>>
- 相关机构：南京农业大学河南农业大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- TLR4信号分子在脂多糖诱导小鼠肝损伤过程中的变化被引量：5
- 2014年
- 为了阐明LPS诱导小鼠肝损伤过程中TLR4信号分子的变化,本试验以昆明小鼠为研究对象,经腹腔注射LPS,从形态学和肝功能指标变化判定肝损伤模型的建立,利用RT-PCR法检测各组肝脏组织中TLR4、IL-10、TNFα的转录水平。结果表明,随着LPS作用时间的延长,肝脏组织病理变化明显,肝窦不同程度充血,炎性细胞浸润,肝细胞呈现点状、小片状或多灶性坏死;血液和肝脏中GPT和GOT的活性升高,升高幅度依赖LPS作用时间,提示成功建立了肝损伤模型;RT-PCR结果显示,LPS诱导肝组织TLR4、IL-10、TNFα表达增加,且具有时间依赖性,TLR4、IL-10在3h表达开始升高,12h达高峰,TNFα变化幅度不如TLR4、IL-10变化显著,提示TLR4、IL-10、TNFα的表达水平依赖于肝损伤程度。
- 李和平李曼曼汪新建王林枫杨国宇王月影
- 关键词：小鼠肝脏脂多糖
- 高精料饲喂产生LPS对干奶山羊能量代谢和相关激素的影响被引量：1
- 2017年
- 为了探讨高精料饲喂产生的脂多糖(LPS)对干奶期山羊血浆能量代谢产物和激素水平的影响,选择处于干奶期的奶山羊12只,随机分为2组,分别饲喂精粗比为4:6和6:4的日粮。结果表明,精粗比6:4的日粮饲喂2周后成功诱导山羊处于亚急性瘤胃酸中毒(SARA)状态,此时外周血液中的LPS浓度极显著升高(P<0.01)。血浆NEFA含量显著升高(P<0.05),血糖含量有上升的趋势但差异不显著(P>0.05)。血浆胰岛素样生长因子1(IGF-Ⅰ)含量显著下降(P<0.05);胰高血糖素、瘦素、催乳素含量升高,胰岛素含量降低,但差异均不显著(P>0.05)。本研究结果显示,当干奶期山羊饲粮中精饲料水平提高时,易造成SARA,血浆高浓度LPS引起机体免疫能量代谢及激素水平均发生变化,这些变化与机体的免疫反应有关。
- 王凯赵兴凯刘颖申正杰张源淑
- 关键词：LPS能量代谢激素
- 不同精粗比日粮对奶山羊瘤胃液pH值、VFA及血液VFA含量的影响被引量：38
- 2013年
- 本试验旨在探讨不同精粗比日粮对奶山羊瘤胃液pH值、VFA以及血液中VFA含量的影响。选择8只安装永久性瘤胃瘘管的奶山羊作为试验动物,采用完全随机分组试验设计随机分为2组,分别饲喂精粗比为6∶4和4∶6的日粮,预饲期15 d,采样期3 d。结果表明,高精料组(HC组)瘤胃液pH值显著低于低精料组(HR组)(P<0.05);在采食后3 h,HC组与HR组瘤胃液pH值均下降至最低值,分别为5.71和6.08。除了乙酸含量外,HC组瘤胃液丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸以及总挥发性脂肪酸(TVFA)含量分别比HR组提高4.99%、5.58%、21.81%、17.95%、18.27%、1.66%。HC组血浆中各种VFA的含量均高于HR组,其中丙酸、丁酸含量两组间差异达到显著水平(P<0.05)。HC组瘤胃液以及血浆中乙酸与丙酸比值均低于HR组,但两组间差异均不显著(P>0.05)。HC组瘤胃液乙酸、丙酸、TVFA浓度在采食后2 h达到最大值,HR组在采食后3 h达到最大值,两组日粮血浆中VFA浓度均在采食后2 h达到最大值,然后逐渐恢复到采食前水平。结论:高精料日粮导致瘤胃液pH值显著降低,瘤胃液和血浆中VFA含量增加;瘤胃液VFA生成速率HC组高于HR组。
- 张腾庄苏董文超常广军颜瑞王恬
- 关键词：精粗比奶山羊PH值
- 奶牛SREBP1蛋白在乳腺上皮细胞的表达定位及对SCD1基因启动子的转录调控被引量：3
- 2016年
- 【目的】固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)作为核转录因子,对于细胞脂肪合成酶基因的表达发挥着重要的调控作用。论文旨在奶牛乳腺上皮细胞中研究SREBP1对于SCD1基因启动子的转录调控作用,为进一步明确SREBP1对于靶基因的转录调控机制提供理论基础。【方法】以荷斯坦奶牛乳腺组织的c DNA为模板,采用分段克隆的方法获得SREBP1基因的编码序列,通过重组酶与pc DNA3.1载体进行重组环化构建pc DNA3.1-SREBP1表达载体,将构建的载体测序验证后提取质粒,转染奶牛乳腺上皮细胞。以EIF3K基因为内参基因,采用荧光定量PCR检测SREBP1基因m RNA的表达差异;采用免疫荧光的方法对SREBP1进行标记,以DAPI复染细胞核,激光共聚焦观察SREBP1蛋白的亚细胞定位;转染含有不同调控元件的SCD基因启动子,同时转染1.0μg pc DNA3.1-SREBP1作为处理,荧光素酶报告基因系统分析启动子活性;分别转染0.25、0.5和1μg的pc DNA3.1-SREBP1载体,分析p GL3-SCD 2和p GL3-SCD3启动子活性与SREBP1之间的量效关系。【结果】分段克隆得到的PCR产物分别为1 170、1 116、363和900 bp的片段,经过与pc DNA3.1载体重组后获得pc DNA3.1-SREBP1表达载体,经酶切和测序验证,发现除1个无义突变外,与标准序列完全相同,整个序列长度达到3 510bp;将pc DNA3.1-SREBP1载体转染乳腺上皮细胞后,Real-time PCR检测发现与转染空载体的对照组相比,SREBP1基因的m RNA表达倍数增强130.4倍(P<0.001);激光共聚焦观察发现,DAPI染色的细胞核呈蓝色,免疫荧光标记的SREBP1呈绿色,二者融合后呈现青色,共定位在乳腺上皮细胞核中;启动子活性检测发现,与p GL3-SCD1、p GL3SCD 2相比,SREBP1处理能够极显著增加p GL3-SCD3、p GL3-CD4启动子的活性(P<0.001),分别比对照组提高了1.0倍和0.7倍,进一步分析发现,在用0.25—1μg的pc DNA3.1-SREBP1处理后,与p GL3-SCD2的启动子活性持续下降相比,p GL3-SCD3的启动子活�
- 韩立强王月影王林枫朱河水钟凯褚贝贝杨国宇
- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞转录调控
- 饲喂高精料日粮对泌乳期山羊泌乳性能及抗氧化能力的影响被引量：5
- 2017年
- 为了研究长期饲喂高精料日粮对泌乳期山羊泌乳性能和乳腺组织抗氧化能力的影响,实验选用12只健康经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为两组,分别饲喂精粗比为35∶65(低精料组,LC,n=6)和65∶35(高精料组,HC,n=6)的日粮。实验期共10周,实验期间采集羊奶与血液;实验结束后采用静脉注射的方法对山羊进行安乐死,随后采集乳腺组织并迅速置于液氮中速冻后保存于-70℃待测。结果显示,HC组山羊乳产量显著高于LC组(P<0.01),同时乳中乳糖,乳蛋白的比例随着泌乳时间的增加而显著升高。与LC组山羊比较,HC组山羊乳腺组织中SREBP1和GLUT1 mRNA表达显著下降(P<0.05);磷酸化AKT1蛋白表达呈下降趋势(P=0.08);除此之外,HC组山羊乳腺组织的总抗氧化能力T-AOC(P=0.06)和GSH酶活均呈下降趋势(P=0.08)。这些结果表明,长期饲喂高精料日粮可降低乳腺组织的抗氧化能力,同时可降低乳中乳脂率以及乳腺组织中SREBP-1和P-AKT的表达。
- 田平孙利利董海波田靖端木永前陶诗煜倪迎冬
- 关键词：泌乳性能抗氧化乳腺山羊
- SARA状态下瘤胃产生的LPS对奶牛乳腺组织细胞凋亡的影响
- 2016年
- 本试验采用12头泌乳中期的荷斯坦奶牛,随机分为两组,每组6只。其中一组饲喂低精料日粮,即日粮中含有40%的精料和60%的粗料,精粗比为4∶6,作为对照(LC)组;另外一组饲喂高精料日粮,精粗比为6∶4,作为试验(HC)组。试验周期为18周,试验开始前为所有奶牛安装瘤胃瘘管,试验后期采集瘤胃液,乳动脉、静脉血和乳腺组织样品,测定瘤胃液p H值和LPS含量、血浆中LPS含量、乳腺组织细胞中凋亡相关基因如caspase-3、caspase-8、caspase-9、bax和bcl-2等的表达、凋亡相关蛋白酶的活性和NF-κB通路中的蛋白表达。结果显示:长期高精料饲喂使奶牛瘤胃p H值均值降低,一天中p H值低于5.6的时间超过3 h;高精料组血浆和瘤胃液中LPS含量均极显著高于低精料组(P<0.01);高精料组caspase-3的基因表达显著高于低精料组(P<0.05),而bcl-2的基因表达显著低于低精料组(P<0.05);高精料组caspase-3和caspase-8的酶活性相比于低精料组都显著升高(P<0.01);高精料组NF-κB p65和磷酸化的NF-κB p65的蛋白表达量均显著高于低精料组(P<0.05)。
- 严金玉刘欣欣代宏宇常广军张凯徐天乐金笛郭峻菲沈向真
- 关键词：奶牛凋亡
- 奶牛亚急性瘤胃酸中毒对肝脏内组胺代谢及NF-κB炎性信号通路的影响
- 2014年
- 为研究奶牛亚急性瘤胃酸中毒(SARA)时血液内组胺浓度的变化及对奶牛炎性信号通路的影响,通过对健康奶牛饲喂高精料日粮,诱发亚急性瘤胃酸中毒,手术安装血管瘘管,采集门静脉和肝静脉血液样品,组胺ELISA试剂盒检测血液中组胺含量,并通过RT-PCR对在体肝脏中的NF-κB、环氧合酶-2(COX-2)、IL-6、TNF-α表达水平进行相对定量和绝对定量检测。结果表明,高精料组奶牛门静脉内组胺浓度较对照组均有所增加,高精料组组胺平均浓度(19.99±0.21)μg/L,较低精料组(18.12±0.35)μg/L差异显著(P<0.05);高精料奶牛的组胺平均清除率(57.23%)显著高于低精料组(50.28%),说明高精料组奶牛组胺在肝脏内代谢率高于低精料组;高精料组NF-κB、COX-2、IL-6和TNF-α的表达较低精料组均有升高,且NF-κB、COX-2、IL-6和TNF-α四个基因的表达有显著升高(P<0.05)。本试验证明了奶牛SARA中血液内组胺浓度的升高可诱导肝脏对其转化和降解的效率增加,且组胺含量的增高可诱导奶牛肝脏中NF-ΚB信号通路的打开,进而导致COX-2等炎性基因表达。
- 路丹张凯徐天乐徐磊沈向真
- 关键词：奶牛肝脏组胺NF-ΚBCOX-2
- 反刍动物蛋白质营养研究进展被引量：8
- 2013年
- 氨基酸是反刍动物所必需的营养素。日粮蛋白质一部分经瘤胃微生物降解后再合成MCP并与饲料中瘤胃未降解蛋白以及内源蛋白一起进入后段消化道消化成氨基酸与小肽并被肠道吸收,最后主要以氨基酸的形式吸收进入肠系膜静脉,汇入门静脉,经过肝脏的转化代谢后进入心脏,最终运送至全身外周组织并被利用。本文就反刍动物对饲料蛋白质的消化利用、氨基酸的吸收、肝脏和乳腺的氨基酸代谢以及乳蛋白调控的进行综述,为反刍动物蛋白质研究提供借鉴。
- 董文超庄苏张腾常广军颜瑞王恬
- 关键词：反刍动物氨基酸肝脏乳腺代谢
- 复合缓冲剂对高精料饲喂泌乳山羊乳脂肪/乳糖合成和其前体物代谢转化的影响及其机制
- 研究证实，长期高精料饲喂会导致泌乳山羊机体健康受损及乳品质下降，而高精料日粮中添加复合缓冲剂可以对机体的健康状态和乳品质均有一定的改善作用。本研究皆在探索复合缓冲剂对高精料饲喂模式下泌乳山羊机体健康的影响及乳脂肪、乳糖前...
- 李林
- 关键词：乳脂肪
- 文献传递
- 亚急性瘤胃酸中毒时山羊下丘脑食欲调节因子mRNA的表达变化被引量：1
- 2013年
- 研究干乳期山羊亚急性瘤胃酸中毒(SARA)时下丘脑相关食欲调节因子mRNA的表达变化。选择7只安装永久性瘤胃瘘管的健康干乳期山羊,随机分为对照组(3只)和试验组(4只),分别饲喂精粗饲料比为4∶6和6∶4的饲料,自由饮水,通过饲喂精粗饲料比6∶4饲料建立干乳期山羊亚急性瘤胃酸中毒模型。在采食前和采食后1～12 h收集瘤胃液测定其pH值和乳酸含量,于试验结束时宰杀动物采集下丘脑组织,液氮速冻后于-70℃保存待测。结果显示:(1)精粗饲料比6∶4日粮饲喂2周后成功诱导SARA状态(SARA组),采食后瘤胃液pH值低于5.8且持续时间约3 h,而精粗饲料比为4∶6组山羊瘤胃液pH均高于6.0(对照组),与对照组相比,SARA组山羊食欲显著降低。乳酸在采食后2～4 h下降,采食后6～8 h逐渐增加,但两组间无显著差异。(2)与对照组相比,SARA组刺鼠相关蛋白(AgRP)基因表达显著下调(P<0.05),神经肽Y(NPY)基因表达有下调的趋势,但SARA组山羊下丘脑中前阿片黑素细胞皮质激素(POMC)和促黑激素受体4(MCR4)的基因表达均无显著性变化(P>0.05)。从而提示:SARA时山羊厌食主要是由于下丘脑促食欲调节因子mRNA表达下调所致。
- 董海波王绍庆贾媛媛倪迎冬张源淑沈向真赵茹茜
- 关键词：亚急性瘤胃酸中毒下丘脑基因表达山羊
