北京市科技新星计划(xxhz201210) 作品数:7 被引量:61 H指数:5 相关作者: 史新元 高鹏飞 张文意 李莹 邬吉野 更多>> 相关机构: 北京中医药大学 中国科学院 更多>> 发文基金: 北京市科技新星计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
中药废渣发酵生产微生物絮凝剂研究 被引量:10 2013年 本文采用常规的细菌分离纯化方法,从中药废渣中筛选出Psedudomonas trivialis和Neu-rospora tetrasperma,利用中药废渣生产微生物絮凝剂的发酵条件及絮凝性能对其进行研究。结果表明,筛选出的菌种适宜在药渣中生长,且生产的絮凝剂能够对高岭土混悬溶液起到絮凝作用。在此基础上,考察了各因素对絮凝剂絮凝效果的影响,探讨不同药渣、菌种组合的最佳发酵条件。 王德馨 史新元 邬吉野 李莹关键词:微生物絮凝剂 发酵条件 槐耳/板蓝根双向发酵体系物质基础变化 被引量:8 2016年 目的:分析槐耳/板蓝根双向发酵体系的物质基础变化规律。方法:分别采用三氯甲烷和水提取不同发酵时间菌质中的脂溶性和水溶性成分,并通过UPLC-MS对提取物进行成分分析,指认发酵过程中变化明显的色谱峰,确定其分子结构。结果:槐耳/板蓝根菌质的脂溶性部分分离出11个色谱峰,经质谱确认出其中的8个化合物,分别为3-甲醛吲哚、次黄嘌呤,2,4-喹唑啉二酮,丁香酸,(E)-3-(3’,5’-二)甲氧基-4’-(羟基苯亚甲基)-2-吲哚酮,2,5-二羟基吲哚,鸟嘌呤,靛红;水溶性部分分离出8个色谱峰,经质谱确认出其中5个化合物,分别为精氨酸、甘草素、腺嘌呤、表告依春、色胺酮。结论:分离鉴定出的13种化合物具有多方面药效学作用,为后续的药效学研究提供了理论基础。 张文意 张婧 高鹏飞 史新元关键词:液质联用 槐耳 板蓝根 赛氏曲霉深层发酵神曲的工艺优选 被引量:8 2013年 目的:优选神曲的深层发酵工艺。方法:以淀粉酶、蛋白酶活性为指标,采用单因素试验考察面粉和麦麸比例、不同无机盐对发酵工艺的影响;以蛋白酶活力为指标,采用正交试验考察面粉-麦麸用量比、发酵温度、摇床转速、无机盐用量对神曲深层发酵工艺的影响。结果:选定赛氏曲霉进行纯种发酵工艺,K2HPO4为神曲液态发酵所需的无机盐,最佳发酵工艺为向150 mL水中加入面粉麦麸量12 g和K2HPO40.15 g,温度28℃,摇床转速180 r·min-1。结论:优选的发酵工艺稳定可行,为中药发酵炮制技术的开发提供参考。 程亦雄 张婧 戚岑聪 周黎 史新元关键词:神曲 酶活力 淀粉酶 单因素试验 槐耳大黄双向发酵体系研究 被引量:3 2014年 目的:建立槐耳大黄双向发酵体系。方法:采用硫酸—苯酚比色法、醋酸镁—甲醇比色法、高效液相色谱法分别测定多糖含量、总蒽醌含量、4种游离型蒽醌含量,并结合折干率、消耗率等指标对药材用量、温度、加水量等工艺条件进行优化。结果:采用500 m L锥形瓶进行槐耳大黄双向发酵时,最佳工艺为:药材用量10 g,温度34℃,加水量120%。结论:双向发酵使大黄游离型蒽醌含量增加,其中具有抗氧化作用的大黄酚含量有所增加,结合型蒽醌减少,可缓和大黄峻烈的泻下作用。 周黎 戚岑聪 高鹏飞 周蓉蓉 张文意 史新元关键词:槐耳 体外高通量评价过敏反应模型的建立及其对潜在过敏原异莲心碱的评价研究 被引量:1 2016年 目的建立体外高通量评价过敏反应模型,并对中药单体化合物进行筛选,从而确定其中的潜在过敏原。方法建立稳定表达MrgX2的高通量药物筛选细胞模型。首先将重组质粒pm Cherry-C1-MrgX2转染人胚肾HEK293细胞,通过G418筛选建立稳定表达人MrgX2的细胞株;再通过MrgX2特异性激动剂C48/80和拮抗剂2-APB检测细胞株的功能和稳定性,以Z因子确认高通量体系的稳定性和可靠性。采用上述模型对180个单体化合物进行筛选,以EC_(50)、IC_(50)、特异性及毒性确定该激动剂的功能性。结果 MrgX2细胞模型对特异性激动剂C48/80和特异性拮抗剂2-APB的EC_(50)和IC_(50)分别为2.7μg/m L和46.29μmol/L,MrgX2细胞模型第1代和第20代对激动剂的反应基本一致,该模型Z因子为0.78。筛选得到异莲心碱为阳性激动剂,其功能验证结果为:EC_(50)为4.5μmol/L、IC_(50)为39.47μmol/L,只能特异性激动MrgX2受体,且无细胞毒性。结论采用钙流方法可成功构建基于过表达细胞系HEK293/MrgX2的体外高通量评价过敏反应模型,并且初步确定异莲心碱为潜在引发过敏反应的过敏原。 王莉 刘青 王石峰 俞洋洋 孙圣楠 蒋俊 史新元 栗世铀关键词:高通量 异莲心碱 六神曲的发酵菌种分离及纯种发酵考察 被引量:29 2013年 目的:筛选优势菌种,探索纯种发酵对六神曲发酵炮制品质量的影响。方法:采用微生物菌种分离方法,从实验室自制和同仁堂购买的六神曲中筛选菌种,采用部分霉菌进行六神曲纯种发酵后淀粉酶及蛋白酶活力测定。淀粉酶活力测定依据碘-淀粉比色法,蛋白酶活力测定采用Folin试剂法。结果:筛选出12株霉菌,黄曲霉能显著提高六神曲淀粉酶和蛋白酶的活力,自制六神曲中分离的杂色曲霉产蛋白酶活力最高,其次为同仁堂分离的肉色曲霉和伞枝犁头霉,其余各组产蛋白酶活力明显低于传统自然发酵组。结论:六神曲原材料中不含淀粉酶、蛋白酶,纯种发酵能稳定提高六神曲发酵炮制品的质量。 邬吉野 李莹 王德馨 史新元关键词:六神曲 纯种发酵 酶活力 槐耳板蓝根双向发酵提取物抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移/侵袭及相关因子的研究 被引量:7 2016年 目的观察槐耳板蓝根双向发酵产物对乳腺癌MCF-7细胞迁移、侵袭和相关因子的影响,探讨其相关机制。方法以人乳腺癌MCF-7细胞为模型,实验分为对照组、板蓝根组、槐耳组和槐耳板蓝根组。MTT法检测细胞增殖;细胞划痕实验检测MCF-7细胞迁移能力;Transwell细胞侵袭实验检测MCF-7细胞侵袭能力;细胞黏附实验检测MCF-7细胞黏附能力;半定量RT-PCR检测MCF-7细胞基质金属蛋白酶(MMP-9)和波形蛋白(Vimentin)基因表达。结果与板蓝根组和槐耳组比较,槐耳板蓝根组明显抑制MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和黏附(P<0.05),抑制MMP-9和Vimentin的基因表达(P<0.05)。结论槐耳板蓝根双向发酵提取物可能通过下调MMP-9和Vimentin的基因表达抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移、侵袭。 周蓉蓉 高鹏飞 张文意 张艳聪 马维维 刘秋雨 史新元 连增林关键词:槐耳 板蓝根 乳腺癌 迁移 基质金属蛋白酶 波形蛋白