山东省自然科学基金(2004ZX05)
- 作品数：8 被引量：6H指数：1
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- 胃腺癌中脆性组氨酸三联体基因蛋白表达
- 2006年
- [目的]探讨胃腺癌组织中脆性组氨酸三联体(fragilehistidinetriad,FHIT)基因蛋白表达及其与临床病理的关系。[方法]采用SP免疫组化方法检测109例胃腺癌组织中FHIT蛋白表达,并分析其与临床病理指标的关系。[结果]109例胃腺癌组织中FHIT蛋白的阴性表达率为55.96%(61/109),而18例正常胃黏膜组织全部阳性表达。FHIT蛋白低表达率与胃腺癌组织学类型及组织学分级明显相关,而与TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、器官转移以及患者年龄、性别均无相关性。[结论]FHIT蛋白缺失是胃腺癌中的频发事件,FHIT与胃腺癌的发生发展关系密切,可以成为监测胃腺癌的一个新的分子生物学指标。
- 孙宝泉许洪伟秦成勇薛淑芳王永康刘莹
- 关键词：脆性组氨酸三联体基因胃肿瘤免疫组织化学
- 外源性脆性组氨酸三联体基因对胃癌细胞株治疗敏感性的影响被引量：1
- 2007年
- 脆性组氨酸三联体（FHIT）基因是近年发现的抑癌基因之一，有研究表明胃癌中存在较高频率的FHIT基因转录异常和（或）FHIT基因表达降低或缺失，提示FHIT基因异常表达可能与人类胃癌的发生、发展有关。本研究通过脂质体转染技术，将FHIT基因转染到有FHIT基因表达缺失的MGC-803胃癌细胞株，观察FHIT表达对肿瘤细胞生长和化学治疗敏感性。
- 许洪伟付信娟秦成勇张春清杨崇美徐麟
- 关键词：脆性组氨酸三联体基因胃癌细胞株化学治疗FHIT基因外源性MGC-803
- 外源性FHIT基因对多柔比星诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:将脆性组氨酸三联体(fragilehistidinetriad,FHIT)基因导入该基因表达缺失的人胃癌细胞株MGC-803,探讨FHIT基因表达对多柔比星诱导胃癌细胞凋亡的影响。方法:将载有人外源性FHIT基因的真核表达质粒pRcCMV-FHIT用脂质体介导转入FHIT表达缺失的胃癌细胞MGC-803,筛选阳性克隆,同时以空载体pRcCMV转染的胃癌细胞及胃癌细胞株作为对照;以多柔比星作用于3组细胞,用MTT法测定细胞增殖的抑制率,倒置显微镜下观察细胞形态变化,用丫啶橙荧光染色与流式细胞术检测多柔比星处理前后各组胃癌细胞的凋亡率,流式细胞术检测细胞周期的变化。结果:通过流式细胞术检测,经多柔比星处理后,转染FHIT基因的MGC-803细胞凋亡水平(40.66%)与空质粒转染细胞(13.94%)及胃癌细胞(15.81%)相比明显增高,存在显著性差异(P<0.01),FHIT基因与多柔比星有轻度的协同促凋亡作用(P<0.05);同时FHIT基因转染后的胃癌细胞生长周期出现了明显的G0/G1期阻滞(74.43%vs56.30%、52.30%);丫啶橙染色亦见转染FHIT基因的胃癌细胞凋亡数明显增多,且细胞的增殖抑制率存在浓度和时间依赖性。结论:外源性FHIT基因表达与多柔比星协同促进胃癌MGC-803细胞凋亡,FHIT基因可提高胃癌细胞对多柔比星的敏感性。
- 薛淑芳许洪伟张春清郝菁华秦成勇王潍博
- 关键词：胃癌脆性组氨酸三联体基因多柔比星细胞凋亡
- 外源性FHIT基因对人胃癌细胞株MGC-803增殖与凋亡的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:研究三联脆性组氨酸基因(fragile histidine triad,FHIT)对胃癌细胞株MGC-803增殖与凋亡作用的影响,并探讨FHIT基因的抑癌机制。方法:通过脂质体介导把质粒pRC/CMV-FHIT及pRC/CMV转染到有FHIT基因表达缺失的胃癌细胞株MGC-803,用G418对转染后细胞进行筛选,用Western blot对获得G418抗性的细胞进行FHIT基因表达的鉴定。用MTT法、克隆形成试验及流式细胞术观察转染前后细胞生长特性的变化。结果:转染FHIT基因的MGC-803细胞有外源性FHIT基因的表达,其增殖活性减弱、克隆形成能力降低、凋亡率增加、生长周期出现明显的G0/G1期阻滞,且与对照组差异均有统计学意义。结论:向胃癌细胞中导入外源性FHIT基因可以抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡并引起细胞生长周期阻滞。
- 付信娟许洪伟
- 关键词：胃肿瘤基因转染
- shRNA-FHIT对胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2010年
- 目的构建靶向抑制脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的短发夹双链RNA(shRNA)真核表达质粒,观察FHIT抑制后对胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的影响。方法构建FHIT基因特异性的小RNA干扰质粒PGPU6/GFP/Neo-shRNA1、PGPU6/GFP/Neo-shRNA2,利用脂质体LipofactamineTM2000转染胃癌细胞BGC-823,实验分为未转染组、阴性对照组(转染PGPU6/GFP/Neo-shNC组)及PGPU6/GFP/Neo-shRNA1转染组和PGPU6/GFP/Neo-shRNA2转染组,G418筛选得到稳定表达株,Real-time PCR检测在mRNA水平干扰质粒对FHIT的抑制效应,MTT法、流式细胞术观察转染前后细胞生长特性的变化。结果与阴性对照组相比,转染shRNA-FHIT重组质粒的BGC-823细胞FHITmRNA表达明显下降(P<0.05)。与未转染组和阴性对照组相比,转染干扰质粒组细胞增殖活性增强,凋亡率减低、生长周期出现S期和G2/M期的比例上调(均P<0.05)。结论成功将重组shR-NA-FHIT表达载体转染BGC-823细胞,并筛选出稳定低表达FHIT的细胞。shRNA-FHIT可以促进胃癌细胞增殖、降低凋亡率,并削弱G0/G1期阻滞,为进一步研究FHIT基因在肿瘤中的作用机制奠定了实验基础。
- 罗琼许洪伟郝菁华刘慧朱强
- 关键词：胃肿瘤RNA干扰
- 人胃癌细胞株MGC-803 FHIT基因转染对阿霉素敏感性的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:将FHIT基因导入该基因表达缺失的人胃癌细胞株MGC-803,探讨胃癌中FHIT基因表达对阿霉素(ADM)敏感性的影响。方法:将载有人外源性FHIT基因的真核表达质粒pRcCMV-FHIT用脂质体介导转入FHIT蛋白表达缺失的胃癌细胞株MGC-803,筛选阳性克隆,同时以空载体pRcCMV转染的胃癌细胞及未转染的胃癌细胞株作为对照,以ADM作用于三组细胞,用MTT法测定细胞的生长抑制率,用流式细胞仪检测ADM处理前后各组胃癌细胞的凋亡率及细胞周期的变化。结果:经ADM处理后,转染FHIT基因的MGC-803细胞的凋亡水平(40.66%)与空质粒转染组(13.94%)及胃癌细胞株组(15.81%)相比明显增高(P<0.01),并且FHIT基因与ADM有轻度的协同促进凋亡作用(P<0.05);同时ADM处理前后实验组胃癌细胞的生长周期较对照组均出现了明显的G0/G1期阻滞(74.43%vs 56.30%,99.27%vs 95.10%),且细胞的生长抑制率存在浓度和时间依赖性。结论:外源性FHIT基因表达与ADM协同促进MGC-803细胞凋亡及细胞周期阻滞,FHIT基因可增加胃癌细胞对ADM的敏感性。
- 薛淑芳许洪伟张春清郝菁华秦成勇王潍博
- 关键词：阿霉素基因转染
- FHIT基因表达对多西紫杉醇诱导胃癌细胞凋亡的实验研究
- 2009年
- 目的探讨外源性FHIT基因的表达对多西紫杉醇(DOC)诱导人胃癌细胞株(MGC-803)凋亡的影响及其分子机制。方法用脂质体将包含有外源性FHIT基因的重组真核表达质粒转染胃癌细胞MGC-803,获得稳定表达重组质粒pRcCMV-FHIT的细胞株(已由山东大学附属省立医院中心实验室成功构建),Western blot法检测外源性FHIT蛋白的表达;采用MTT法检测不同浓度(1.0、5.0、10.0、20.0、40.0 mg/L)及不同时间(24、48、72 h)下多西紫杉醇对MGC-803细胞的抑制率并选择最佳浓度和作用时间;采用流式细胞术检测FHIT转染和DOC单独及联合作用后的细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测干预前后cleaved-Caspase3的蛋白表达。结果获得稳定表达FHIT基因的胃癌细胞株;DOC对MGC-803细胞具有抑制作用,且浓度为20 mg/L、时间为48 h时最明显;DOC+pRcCMV-FHIT组细胞的凋亡水平(65.54%)较阴性对照组(3.27%)、pRcCMV组(3.55%)、pRcCMV-FHIT组(13.94%)、DOC组(44.13%)、DOC+pRcCMV(45.29%)组明显增高,且差异具有统计学意义(P<0.05);DOC+pRcCMV-FHIT组细胞的cleaved-Caspase3蛋白表达较其它各组明显增强。结论FHIT基因表达与DOC能够协同促进胃癌细胞的凋亡,这可能与二者能够协同上调Caspase-3蛋白表达相关。
- 李建华许洪伟张春清孔凡国罗琼
- 关键词：胃肿瘤脆性组氨酸三联体基因表达多西紫杉醇细胞凋亡
- FHIT基因与胃癌的关系
- 2006年
- FHIT基因是定位于染色体3p14．2区域的一个候选抑癌基因,因含脆性位点FRA3B, 该基因具有不稳定性,其异常一般发生在与外界接触的器官上皮肿瘤中。胃癌是与环境致癌物密切相关的肿瘤,因而研究胃癌中FHIT基因的异常,对阐明胃癌的发生发展具有重要的理论基础和临床意义。现综述FHIT基因与胃癌关系的研究进展。
- 许洪伟孙宝泉秦成勇
- 关键词：胃肿瘤FHIT
