吉林省科技厅科研基金(200905151)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：吉林大学第二医院吉林大学第一医院吉林省人民医院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 体外模拟脑缺血再灌注OGD/R模型的差异凝胶电泳分析被引量：1
- 2012年
- 目的:通过体外模拟缺血-再灌注损伤(I/R)诱导细胞凋亡的氧糖剥离再灌注(OGD/R)模型的建立,应用蛋白质组学技术观察凋亡细胞蛋白质组的差异表达,进一步揭示神经元凋亡的发生机制。方法:选用人神经母细胞瘤系SH-SY5Y细胞分为对照组和实验组,实验组给予OGD10h/R24h处理建立OGD/R诱导SH-SY5Y细胞凋亡模型,提取对照组和实验组细胞总蛋白,利用荧光染色双向差异凝胶电泳技术(2D-DIGE)检测细胞蛋白质组的差异表达变化。结果:DeCyder软件分析2D-DIGE凝胶图像显示平均分离了(1 800±156)个蛋白质点;与对照组比较,实验组共有30个蛋白点的表达水平有显著变化(蛋白表达量上调或下调30%以上),其中22个升高,8个降低,与同时间对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:应用双向差异凝胶电泳的蛋白质组学技术在OGD/R模型中发现有差异蛋白的表达。
- 刘守跃张影胡林森宋彬罗毅男关文明
- 关键词：再灌注蛋白质组学
- 珠子参汤剂对脑胶质瘤U87细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究被引量：3
- 2019年
- 目的探究珠子参汤剂对脑胶质瘤U87细胞增殖和凋亡的影响,并对其分子机制进行初步探究。方法将脑胶质瘤U87细胞随机分为空白组(A组)、珠子参汤剂低剂量组(B组)、珠子参汤剂中剂量组(C组)、珠子参汤剂高剂量组(D组)。用MTT检测细胞增殖情况,流式细胞仪和TUNEL染色检测细胞凋亡情况,Real-time PCR检测细胞内Bcl-2 mRNA、Bax mRNA和Caspase-3 mRNA水平,Western blotting检测细胞内p-PI3K蛋白、p-AKT蛋白的水平。结果与A组比较,C、D组细胞存活率显著降低(P<0.05);B、C、D组Bcl-2 mRNA表达水平显著降低,B、C组Bax mRNA与Caspase-3 mRNA水平显著升高(P<0.05);B、C、D组p-PI3K蛋白与p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与B组比较,C、D组细胞存活率显著降低(P<0.05);D组Bcl-2 mRNA表达水平显著降低,Bax mRNA与Caspase-3 mRNA水平显著升高(P<0.05);p-PI3K蛋白与p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与C组比较,D组细胞凋亡率、Bax mRNA水平显著升高,而Bcl-2 mRNA表达水平、p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论珠子参汤剂可以抑制脑胶质瘤U87细胞增殖、细胞凋亡,其机制可能与珠子参汤剂调控PI3K/AKT信号通路有关。
- 杨庆晓姚姝妍宋彬王一楠
- 关键词：PI3K/AKT
- 脑缺血性疾病的蛋白质组学研究进展被引量：2
- 2009年
- 脑血管病是导致人类死亡的三大病因之一,而其中缺血性脑血管病约占75%~80%,其发病机制涉及多方面复杂因素;蛋白质组学作为新兴学科从整体角度,系统地研究动态变化的蛋白质组成分构成及其活动规律,为探索该病机制开辟了新途径。本文旨在综述蛋白质组学概念和主要研究技术,以及脑缺血个体体液、脑缺血个体脑组织、体外模拟缺血的细胞模型三方面的脑缺血性疾病蛋白质组学研究现状,为进一步开展该病蛋白质水平研究奠定基础。
- 刘守跃姚春山关文明孟繁凯胡林森罗毅男
- 关键词：脑缺血蛋白质组学双向电泳
- 体外诱导SH-SY5Y细胞凋亡的氧糖剥离再灌注模型的建立及评价被引量：4
- 2012年
- 目的:通过体外模拟缺血-再灌注损伤(I/R)诱导细胞凋亡的氧糖剥离再灌注(OGD/R)模型的建立与评价,探讨成功诱导神经元凋亡发生的可靠时间窗,为进一步阐明神经元凋亡机制奠定基础。方法:选用人神经母细胞瘤系SH-SY5Y细胞分为对照组和实验组,实验组给予不同的OGD/R时间,通过MTT法计算细胞存活率,选定再灌注24h存活率接近50%的OGD10h/R组和对照组细胞,通过光镜、荧光显微镜及电镜观察细胞形态学改变,采用试剂盒检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平、胞浆内丙二醛(MDA)含量及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果:MTT法结果显示,细胞存活率随OGD时间延长显著降低,OGD10h/R24h组为对照组的(44.91±1.21)%,不同OGD/R时间组间细胞存活率比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。倒置显微镜及HE染色显示,OGD10h/R组细胞密度减低,形态多样性,核固缩;AO/EB荧光染色可见凋亡小体形成,电镜显示核内异染色质凝集、趋边等凋亡的改变。实验组培养液内LDH水平及胞浆内MDA含量随再灌注时间延长而增加,LDH水平于再灌注24h达峰值,MDA含量于再灌注24h接近平台期,胞浆内SOD活性随再灌注时间延长呈现先降低后回升的趋势,与相同时间对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。流式细胞术检测细胞周期显示,随再灌注时间延长,OGD10h/R组G0/G1期细胞比例逐渐增加,24h达峰值(74.09±2.62)%,其后有所降低,G2/M期细胞比例再灌注0h时最高达(26.85±1.35)%,此后逐渐降低,24h前均显著高于同时间对照组细胞,S期细胞比例逐渐降低,24h最低达(19.2±1.58)%,此后逐渐升高,与同时间对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:体外模拟I/R模型的OGD10h/R组能够成功诱导SH-SY5Y细胞凋亡的发生,可进一步应用于凋亡机制的研究。
- 刘守跃张影胡林森罗毅男关文明
- 关键词：SH-SY5Y细胞细胞凋亡
