国家自然科学基金(30100156)
- 作品数：8 被引量：20H指数：2
- 相关作者：苏川张兆松季旻珺吴观陵朱翔更多>>
- 相关机构：南京医科大学东南大学广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省重点学科建设基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 趋化因子在日本血吸虫感染模型中的表达特征被引量：1
- 2003年
- 目的 研究日本血吸虫感染模型中趋化因子(chemokine)在CD_4^+T细胞中的表达概貌,并探讨其与Th细胞极化和免疫病理的相关性。方法 采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)技术,从基因水平获得日本血吸虫不同感染时期CD_4^+T细胞表达的趋化因子概貌,并用反转录PCR(RT-PCR)凝胶成像半定量技术验证嗜酸性粒细胞趋化因子(ECF-L)的表达水平。同时观察趋化因子表达与病理的的关联。结果 日本血吸虫虫卵沉积前,MIG、RANTES明显增强;感染6周IP-10、MIP-2、MIP-1α、MIP-1β、ECF-L升高,持续到感染13周;GRO、Lymphotactin、MCP-1、RANTES在感染13周显著增强。RT-PCR半定量验证ECF-L表达模式与基因芯片结论一致。结论 日本血吸虫人工感染小鼠的CD_4^+T细胞表达大量趋化因子,它们共同参与Th1/Th2免疫应答,影响免疫病理状态;改变趋化因子格局可能影响疾病的自然转归。
- 蔡晓萍季旻珺李光富苏川朱翔王新军张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫CD4^+T细胞趋化因子基因芯片RT-PCR
- 人IFNα-2b对HPV11-E7 DNA疫苗的免疫佐剂效应
- 2009年
- 目的探讨人IFNα-2b对HPV11-E7DNA疫苗的免疫佐剂效应。方法将28只BALB／c小鼠随机分为4组，每组7只。融合基因组pcDNA3．1（＋）-IFNα-2b—HPV11-E7组，分别肌内注射。初次免疫后2周以同样方法和相同剂量加强免疫，2次免疫后再以同样方法和相同剂量加强免疫。于6周后剖杀BALB／c小鼠，取脾并分离脾淋巴细胞，进行细胞培养并刺激单个核细胞产生细胞因子，用流式细胞仪检测Th1、Th2细胞因子比例。结果融合基因组pcDNA3．1（＋）-IFNα-2b—HPV11-E7组的IFN-γ水平明显高于pcDNA3．1（＋）-HPV11-E7组，差异具有统计学意义（P〈0．001）；融合基因组与pcDNA3．1（＋）-HPV11-E7组的IFN-γ水平明显高于对照组PBS组及空载质粒pcDNA3．1（＋）组，差异有统计学意义（P〈0．001）；两对照组之间的IFN-γ水平差异无统计学意义（P〉0．05）。各组之间的IL-4及IL-10水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论人IFNα-2b能明显加强HPV11-E7的免疫原性，提高免疫小鼠的T淋巴细胞免疫能力，IFNα-2b以增强Th1型应答为主，对Th2型应答无明显影响。
- 相文忠王飞康健王群张蕙张永臣王勇苏川张兆松毕志刚
- 关键词：人乳头瘤病毒干扰素Α-2B
- 日本血吸虫感染过程中抑制性因子的表达特征
- 2005年
- 目的立足于基因组水平考察日本血吸虫慢性感染小鼠CD_4^+ T应答中抑制性因素的参与及可能的调控作用。方法采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)对日本血吸虫感染0、3、6、13周小鼠脾脏中的CD_4^+ T细胞进行全基因组分析,获得相关抑制性因子的基因表达谱。结果基因芯片结果显示日本血吸虫感染从急性期至慢性期过程中抑制性因子的表达基因表达逐步上调,呈现基本一致的变化,包括抑制性细胞因子、阻断抗体、细胞凋亡、负调控分子的高表达等。结论从胞内信号转导通路至细胞凋亡的整体水平,多层次因素参与了日本血吸虫感染宿主免疫应答的负调控机制。
- 季旻珺苏川王勇吴海玮朱翔蔡晓萍张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫CD4^+T细胞
- 干扰素-γ对感染日本血吸虫小鼠GTP酶表达的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨干扰素 γ(IFN γ)对小鼠抗日本血吸虫感染保护力的机制。 方法 采用高密度寡核苷酸芯片 (Affymetrix芯片 )结合半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )方法 ,对BALB/c小鼠感染日本血吸虫过程中脾脏CD4+ T细胞进行基因转录水平分析 ,获得IFN γ诱导鸟苷三磷酸 (GTP)酶家族成员的变化图谱 ;并对其中IFN γ诱导GTP酶 (IGTP)进行分子克隆和序列测定。 结果 小鼠自然感染日本血吸虫过程中 ,IFN γ诱导GTP酶家族成员的基因表达呈现特征性变化 ,感染后 3wk ,基因表达上调或变化不显著 ;感染后 6wk至 13wk ,基因表达持续受到抑制。这种变化特征经RT PCR方法所证实。从小鼠脾脏可扩增出IGTP全长基因 ,但退火温度降低时出现IGTP基因转录缺失。 结论 小鼠急性感染日本血吸虫后 ,体内IFN γ通路逐步受到抑制 ,针对血吸虫感染的依赖IFN
- 季旻珺蔡晓萍苏川吴海玮李光富王勇朱翔王新军张兆松吴观陵
- 关键词：干扰素-Γ日本血吸虫病小鼠GTP酶
- 人乳头瘤病毒E7与人干扰素α-2b融合基因在中国仓鼠卵巢细胞中的表达被引量：1
- 2006年
- 目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)11-E7及人干扰素(IFN)α-2b的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达。方法:同时用KpnⅠ、EcoRⅠ酶切pET-32a-IFNα-2b-linker-HPV11-E7及pcDNA3.1,将酶切产物纯化回收,两者的回收产物进行连接反应。连接产物转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定;用脂质体法转染CHO细胞,用免疫荧光法检测融合基因的表达。结果:DNA测序结果显示,成功地将IFN-α-2b-linker-HPV11-E7装入pcDNA3.1的KpnⅠ、EcoRⅠ酶切位点之间,且其序列与设计完全一致;激光扫描共聚焦显微镜观察可见目的蛋白的表达。结论:成功地构建了HPV11-E7及IFNα-2b的真核表达载体,并在CHO细胞中表达,为提高DNA疫苗免疫效果的研究奠定了基础。
- 相文忠王飞王群刘丰张兆松苏川毕志刚
- 关键词：人乳头瘤病毒E7基因干扰素Α-2B融合基因
- 日本血吸虫慢性感染致CD_4^+ T细胞凋亡的分子基础被引量：7
- 2004年
- 目的 立足于全基因水平考察日本血吸虫慢性感染小鼠CD+4T细胞的凋亡相关基因的变化。方法 采用三色流式细胞术结合高密度寡核苷酸芯片 (Affemetrix芯片 ) ,对日本血吸虫感染 13周的小鼠脾脏中的CD+4T细胞进行凋亡观察及基因转录分析 ,获得凋亡相关基因的表达图谱。结果 日本血吸虫慢性感染小鼠CD+4T细胞的凋亡率均明显高于正常小鼠 (P <0 0 1) ;感染小鼠的CD+4T细胞中有 2 5个凋亡相关基因与正常小鼠相比有显著性差异 ,包括凋亡促进基因—生长抑制和DNA损伤 -GADD家族和肿瘤坏死因子α诱导蛋白 3,凋亡抑制基因—IAP等。结论 日本血吸虫慢性感染小鼠CD+4T细胞的凋亡可能是导致宿主免疫下调的原因之一。凋亡通路中存在复杂的凋亡促进基因和抑制基因的相互作用 ,其中肿瘤坏死因子α诱导蛋白 3可能是日本血吸虫感染诱导CD+4T细胞凋亡的特征性因子。
- 季旻珺苏川朱翔李春玲张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫流式细胞术凋亡
- 基因表达谱芯片分析日本血吸虫感染慢性期CD4^+细胞的应答特征被引量：1
- 2003年
- 目的 立足于全基因水平考察日本血吸虫慢性感染小鼠CD4+细胞的相关细胞因子的变化 ,探讨其与疾病的相关性。方法 采用高密度寡核苷酸芯片 (Affemetrix芯片 )结合三色流式细胞术 ,对日本血吸虫感染 13周的小鼠脾脏中的CD4+细胞进行基因转录及蛋白表达水平的分析 ,获得相关细胞因子的变化图谱。结果 日本血吸虫慢性感染小鼠CD4+细胞中IL 4的转录及蛋白表达水平均明显高于正常小鼠 (P <0 .0 5) ,尤其以可溶性虫卵抗原刺激后最为显著 (P <0 .0 1) ;感染小鼠IFN γ的转录及蛋白表达水平也有所增高 ,但不及IL 4的升高程度 ;IL 10、IL 1β、小诱导细胞因子(smallinduciblecytokine)等因日本血吸虫的感染而升高 ,但TGF β1呈下降趋势。结论 日本血吸虫慢性感染小鼠细胞因子分泌谱表现为Th1和Th2型细胞因子并存的格局 ,但以Th2应答为主。
- 季旻珺苏川朱翔李春玲张兆松吴观陵
- 关键词：基因表达谱芯片日本血吸虫感染CD4^+细胞免疫应答
