国家自然科学基金(81273046) 作品数:11 被引量:24 H指数:3 相关作者: 杨红 李文超 张迎建 李明月 吴秋云 更多>> 相关机构: 东南大学 苏州工业园区疾病防治中心 徐州医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省预防医学科研基金 全球变化研究国家重大科学研究计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
纳米二氧化硅与微米二氧化硅致大鼠肺纤维化miRNAs差异表达比较研究 被引量:3 2019年 目的比较纳米二氧化硅(SiO2)与微米二氧化硅(SiO2)致大鼠肺纤维化过程中miRNAs差异表达的变化,分析miRNAs表达水平与肺纤维化的相关性。方法将36只体重为180~220 g的SPF级健康雄性SD大鼠随机分为对照组、纳米SiO2染尘组和微米SiO2染尘组,每组12只,用一次性气管灌注染毒方法分别经气管灌注1ml生理盐水、25mg/ml纳米SiO2溶液和25mg/ml微米SiO2溶液。分别于染尘60、90 d各处死6只大鼠,用光学显微镜和透射电镜观察大鼠肺组织病理学及超微结构改变;用IlluminaHiSeq 2000高通量测序技术分析大鼠肺组织miRNA表达谱;用Targetscan对miRNAs进行靶基因预测,通过基因本体论Gene Ontology(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分别对靶基因进行功能分类和pathway分析,筛选与肺纤维化相关的靶基因。结果光学显微镜下可见,染尘60、90 d时,纳米SiO2染尘组大鼠肺组织支气管和血管周围、肺泡壁和小叶间隔增宽,纤维结缔组织轻度增生。染尘60 d时,微米SiO2染尘组大鼠肺内弥漫性分布细胞性结节,多数结节融合,纤维母细胞增生明显,结节周围肺泡代偿性肺气肿;染尘90 d时,微米SiO2染尘组大鼠肺内弥漫性分布的细胞纤维性结节内纤维成分增加,融合的大结节周围肺泡代偿性肺气肿。透射电镜下可见,染尘60、90 d时,纳米SiO2组大鼠肺组织Ⅱ型肺泡上皮细胞嗜锇板层小体增多、肿胀,空泡样变,间质中胶原纤维及弹力纤维增生;微米SiO2染尘组大鼠肺组织Ⅱ型肺泡上皮细胞胞质内嗜锇板层小体增多,间质中胶原纤维及弹力纤维增生,嗜锇板层小体空泡样变。与对照组比较,染尘60、90d时,纳米SiO2染尘组大鼠肺组织中差异上调表达miRNA分别为50、72个,下调表达miRNA为22、24个;微米SiO2染尘组差异上调表达miRNA分别为91、70个,下调表达miRNA为34、78个。两者共同差异上调表达的miRNA为miRNA-18a、miRNA-702-3p,下调表达的miRNA为miR 杨红 李明月 李文超 张迎建 劳灿山关键词:纳米二氧化硅 肺纤维化 MICRORNA表达谱 纳米二氧化硅对职业暴露人群健康危害的调查 被引量:2 2015年 目的:调查纳米二氧化硅( SiO2)对职业接触工人健康的影响。方法:采用职业卫生调查方法调查苏州某热塑材料混合公司和某橡胶有限公司的职业卫生现况;滤膜增重法测定总粉尘浓度(短时间接触浓度C-STEL,以其他粉尘计)。两个企业中接触纳米SiO2的工人与不接触纳米SiO2的技术管理人员分别设为接触组与对照组,各13例。测定血常规、生化指标,进行B超、心电图、肺功能、高千伏X线胸片,ELISA法测定血清中铜蓝蛋白( CP)、层粘连蛋白( LN)含量。结果:两个企业纳米 SiO2投料口总粉尘浓度为0.26~255.5 mg&#183; m-3;接触组工人中,除了分别有1名工人丙氨酸转氨酶( ALT)、尿素氮( BUN)、总胆红素( STB)分别超出正常水平外,其余各项指标均在正常参考值范围内,高千伏X线胸片、肺功能、心电图、B超检测均未发现异常;两组人员的血常规、血生化及CP、LN含量差异无统计学意义( P>0.05)。结论:需加大样本量及随访研究纳米SiO2对接触人群健康的影响,加强纳米SiO2作业场所的职业卫生监督管理。 杨红 徐健英 刘仁平 李文超 谢彦昕 劳灿山关键词:纳米二氧化硅 职业卫生调查 铜蓝蛋白 层粘连蛋白 Pulmonary Toxicity in Rats Caused by Exposure to Intratracheal Instillation of SiO2 Nanoparticles 被引量:5 2017年 Objective The effect of the silica nanoparticles(SNs) on lungs injury in rats was investigated to evaluate the toxicity and possible mechanisms for SNs.Methods Male Wistar rats were instilled intratracheally with 1 mL of saline containing 6.25,12.5,and 25.0 mg of SNs or 25.0 mg of microscale SiO_2 particles suspensions for 30 d,were then sacrificed.Histopathological and ultrastructural change in lungs,and chemical components in the urine excretions were investigated by light microscope,TEM and EDS.MDA,NO and hydroxyproline(Hyp) in lung homogenates were quantified by spectrophotometry.Contents of TNF-α,TGF-β1,IL-1β,and MMP-2 in lung tissue were determined by immunohistochemistry staining.Results There is massive excretion of Si substance in urine.The SNs lead pulmonary lesions of rise in lung/body coefficients,lung inflammation,damaged alveoli,granuloma nodules formation,and collagen metabolized perturbation,and lung tissue damage is milder than those of microscale SiO_2 particles.The SNs also cause increase lipid peroxidation and high expression of cytokines.Conclusion The SNs result into pulmonary fibrosis by means of increase lipid peroxidation and high expression of cytokines.Milder effect of the SNs on pulmonary fibrosis comparing to microscale SiO_2 particles is contributed to its elimination from urine due to their ultrafine particle size. YANG Hong WU Qiu Yun LI Ming Yue LAO Can Shah ZHANG Ying Jian纳米二氧化硅致大鼠肺损伤中miR-144的作用 被引量:1 2015年 目的探索miR-144在纳米二氧化硅(SiO2)致大鼠肺损伤中的生物学作用。方法150只健康雄性SD大鼠随机分生理盐水对照组和6.25、12.5、25.0mg/ml纳米SiO2组及25.0mg/ml微米SiO2组,每组30只,分别于染尘7、15、30、60、90d后各处死6只,观察各时间点大鼠肺组织的病理改变。用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测大鼠经气管一次性灌注25mg/ml纳米SiO290d后肺组织中miR.144的表达水平;用Targetscan、microRNA.org及miRDB3个数据库对miR.144进行靶基因预测;用theGeneOntology、KEGG分别对预测靶基因进行功能显著性富集分析和信号通路分析,筛选与肺纤维化相关的靶基因。结果25.0mg/ml纳米SiO2染尘90d组大鼠肺组织中miR-144表达上调,与Hiseq2000高通量测序的结果一致;筛选miR-144的预测靶基因为SMAD4、SMAD5、ADAMTS3、ADAMTS15、ADAMTS19等,这些基因可能与纤维化相关或参与纤维化通路。结论miR-144可能参与肺纤维化的调控,在纳米SiO2所致肺损伤中发挥一定作用。关键词:肺损伤 肺纤维化 两种纳米SiO_2刺激巨噬细胞上清液对成纤维细胞的作用 2016年 目的探讨20-nm、60-nm Si O_2诱导巨噬细胞生成细胞因子在中国仓鼠肺成纤维细胞(Chinese hamster lung fibroblast,CHL细胞)增殖、胶原合成和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达中的作用。方法采用酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定2种纳米Si O_2染毒RAW264.7细胞生成转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的量。CHL细胞与两种纳米Si O_2染毒RAW264.7细胞培养上清液共同孵育后,分别用MTT、消化和免疫组化法测定CHL细胞增殖率、羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)生成量及MMP-2表达。结果与阴性对照组比较,RAW264.7细胞生成TGF-β1,IL-1β增加;CHL细胞增殖率、Hyp生成量和MMP-2表达率增加。结论两种粒径纳米Si O_2与微米Si O_2一样,可通过刺激巨噬细胞释放细胞因子促进成纤维细胞增殖,胶原合成和MMP-2增加,启动肺纤维化的发生。 杨红 吴秋云 劳灿山 李文超 李明月关键词:纳米SIO2颗粒 RAW264.7细胞 CHL细胞 纤维化 microRNA在预防医学中的研究进展 被引量:5 2013年 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。作者对miRNA在职业毒理学、环境毒理学、食品毒理学、放射毒理学和卫生学方面的国内外研究进展作一综述。 张迎建 李文超 杨红关键词:MICRORNA 表达谱 基于microRNA表达谱技术的肺纤维化研究进展 肺纤维化是一组由多种病因引起的肺破坏性疾病,其病理过程为当肺内纤维母细胞受到物理、化学或生物因素作用时,分泌胶原蛋白修补肺间质组织,进而造成肺纤维化。由于microRNA(miRNA)参与细胞增殖、分化、凋亡等多种生物进... 李文超 张迎建 杨红关键词:MICRORNA 肺纤维化 表达谱 基于microRNA表达谱技术的肺纤维化研究进展 被引量:5 2014年 肺纤维化是一组由多种病因所引起的肺破坏性疾病,引发肺纤维化的原因有很多,如遗传因素、环境因素等,但是肺纤维化的发病机制仍不明确。由于microRNA(miRNA)参与细胞增殖、分化、凋亡等多种生物进程,其表达异常会导致组织器官的癌变及纤维化等疾病,因此miRNA对肺纤维化的基因表达调控日益成为研究的热点。在本文中作者对几类microRNA在肺纤维化发生中的作用机制以及临床应用的研究进展进行综述。 李文超 张迎建 杨红关键词:肺纤维化 纳米二氧化硅致大鼠肺组织损伤的病理动态变化 被引量:3 2014年 目的 观察纳米SiO2对大鼠的肺损伤作用.方法 150只雄性SD大鼠分为生理盐水对照组、6.25、12.5、25 mg/ml纳米SiO2和25 mg/ml微米SiO2组,每组30只,分别观察7、15、30、60、90 d后,各处死6只大鼠,计算肺脏脏器系数、观察肺组织病理形态及超微结构改变.结果 在各染尘时间点,25 mg/ml微米SiO2组与纳米SiO2组大鼠肺脏器系数明显高于生理盐水组,25 mg/ml微米SiO2组大鼠肺脏器系数明显高于同剂量纳米SiO2组,差异均有统计学意义(P<0.05).微米SiO2组肺脏器系数增加,各剂量纳米SiO2组大鼠肺脏器系数降低,呈现时间-效应关系.光学显微镜下可见微米SiO2组随着染尘时间的延长,肺内逐渐形成细胞性结节并融合成细胞纤维性结节;25 mg/ml纳米SiO2组染尘早期呈局灶性肺泡巨噬细胞聚集和纤维母细胞增生,后期则出现纤维结缔组织增生.透射电镜下可见25mg/ml微米SiO2组及纳米SiO2组Ⅱ型肺泡上皮细胞嗜锇板层小体异常,间质中胶原及弹力纤维增生.结论 纳米SiO2颗粒暴露可致大鼠肺组织损伤,早期以炎症为主,后期则主要表现为肺间质纤维化,不同于微米SiO2所致结节性肺纤维化,其致纤维化能力较同浓度微米SiO2弱. 张迎建 李文超 郑祎 王雪菲 李甘云 杨红关键词:纳米二氧化硅 肺纤维化 病理学 纳米氧化硅对RAW264.7细胞的DNA损伤作用 2016年 目的:研究纳米氧化硅(SiO_2)对小鼠RAW264.7细胞的DNA损伤作用,探讨其可能的毒作用机制。方法:分别采用浓度为31.25、125、500μg/m L的两种纳米SiO_2(平均粒径分别为20、60 nm)和500μg/m L的微米SiO_2粒子悬液对RAW264.7细胞染毒24 h,彗星试验检测细胞DNA单链断裂情况,CASP软件分析彗星图像,观察指标为彗星率(r_(彗星))、尾长(TL)、尾部DNA百分率(r_(尾部DNA))和OT尾矩(OTM);分别用硝酸还原酶法、TBA法、Fenton法、黄嘌呤氧化酸法、钼酸法、考马斯亮兰法测定各组染毒细胞匀浆上清液中细胞氧化应激指标丙二醛(MDA)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O_2)、过氧化氢(H2 O2)、一氧化氮(NO)和蛋白含量。结果:与阴性对照组比较,500μg/m L微米SiO_2染毒组和125、500μg/m L的两种纳米SiO_2染毒RAW264.7细胞时,r_(彗星)、TL、r_(尾部DNA)、OTM均升高(P<0.01);且500μg/m L微米SiO_2组的r_(彗星)、r_(尾部DNA)、OTM高于同浓度两个纳米SiO_2组(P<0.01)。两种纳米SiO_2和微米SiO_2染毒细胞内脂质过氧化产物MDA、OH、O_2、NO及H_2O_2的水平均高于阴性对照组(P<0.01)。结论:两种纳米SiO_2与微米SiO_2均可引起RAW264.7细胞DNA断裂和氧化损伤,氧化应激自由基的大量产生在DNA损伤过程中可能起到一定的作用。 杨红 吴秋云 劳灿山 李明月 李文超关键词:纳米SIO2 RAW264.7细胞 遗传毒性 单细胞凝胶电泳