广东省科技计划工业攻关项目(2007B050200011)
- 作品数：6 被引量：25H指数：4
- 相关作者：华平杨艳旗王萌江慧琦刘立宝更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院广州市第一人民医院中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广东省中山市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 混合静脉血氧饱和度评估心脏外科围术期的风险被引量：5
- 2012年
- 【目的】分析混合静脉血氧饱和度(SvO2)对心脏外科围术期风险评估的价值及其预警值。【方法】170例心脏手术后病人到达ICU时通过经胸壁肺动脉导管采取标本测量SvO2。分析SvO2与围术期危险因素以及预后的关系,运用统计学计算SvO2对术后并发症的预警值,并将预警值作为分组界值将病人分组进行比较,验证SvO2与心脏外科围术期并发症及预后的关系。【结果】SvO2的预警值为53.5%。A组(SvO2≤53.5%)22例;B组(SvO2>53.5%)148例。A组EuroSCORE(TheEuropean System for Cardiac Operative Risk Evaluation)评分(4.6±3.4)明显高于B组(2.8±2.3;P=0.015)。A组与B组相比,术后由于心包填塞或出血剖胸探查率18.18%vs 2.03%(P=0.006),术后脑梗死率13.6%vs 1.5%(P=0.016),术后第1天胶体液用量(1 587±732)mL vs(1 091±785)mL(P=0.002),住院死亡率18.18%vs 1.35%(P=0.003)等显著高于B组。4例(2.4%)发生频发室性早搏,拔除经胸壁肺动脉导管后心律失常消失。拔除经胸壁肺动脉导管后无一例发生导管相关出血。【结论】经胸壁肺动脉导管取血测量SvO2安全经济。SvO2对心脏外科围术期风险可做出可靠的评估。
- 江慧琦王萌华平王铭辉胡海宇杨艳旗
- 关键词：混合静脉血氧饱和度
- MRI活体示踪心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞的移植被引量：2
- 2013年
- 背景:干细胞移植的疗效和安全性评估均需要对体内干细胞的存活、分布、迁徙、增殖及分化进行连续监测。目的:观察MRI示踪超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞在缺血心肌组织的分布、迁徙情况。方法:直接贴壁法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,获得的细胞进行免疫鉴定。以新型超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞,体外MRI成像确定其体内示踪的可行性。标记后锥虫蓝拒染试验、MTT比色试验分别检测标记细胞的活力、增殖情况。60只SD大鼠随机分为3组,制备大鼠心肌梗死模型2周后再次开胸移植含标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液、含未标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液和等量PBS。于移植后第1天、第3周行MRI检查,动态观察移植细胞的分布、迁徙,并根据MRI图像定位选择性行CD90免疫组化检查。结果与结论:骨髓间充质干细胞标记后,普鲁士蓝染色见胞浆内蓝色铁颗粒,标记效率为99%,标记细胞与未标记细胞间锥虫蓝拒染率、MTT吸光度差异无显著性意义。体外MRI可检测到标记细胞,并在T2WI及T2W/FFE序列上呈低信号。细胞移植1d后,在T2WI及T2W/FFE序列上可见标记细胞在梗死心肌边缘呈类圆形低信号;移植3周后,移植区域信号边界模糊,范围扩大,对比度降低。CD90免疫组化检测证实移植细胞可由梗死边缘向梗死区域迁徙。结果可见新型超顺磁性氧化铁可成功对大鼠骨髓间充质干细胞进行标记,细胞标记后可被MRI检测。
- 华平王友于杨淞然刘家良刘立宝陶俊杨艳旗
- 关键词：干细胞骨髓干细胞心肌梗死骨髓间充质干细胞干细胞移植活体
- 沉默caspase-3基因影响骨髓间充质干细胞的增殖和凋亡被引量：4
- 2013年
- 背景:缺血缺氧的心肌微环境导致植入的细胞存活率低。目的:观察沉默caspase-3基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。方法:构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞为转基因组,以正常细胞组和空载体组做对照,采用MTS法检测各组细胞增殖情况。建立缺血缺氧模型,real-time PCR和免疫组织化学分别检测缺血缺氧环境各组细胞的caspase-3mRNA和蛋白表达水平,应用流式细胞术检测不同缺血缺氧时间点(0,6,12,24,48h)各组细胞的凋亡率。结果与结论:重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞,且细胞增殖活性升高(P<0.05)。缺血缺氧环境下,转基因组细胞caspase-3在mRNA和蛋白表达水平相比对照组下降(P<0.05)。沉默caspase-3能显著降低骨髓间充质干细胞的凋亡率(P<0.05),且随着缺血缺氧时间的延长凋亡率缓慢升高。结果提示,沉默caspase-3能加快骨髓间充质干细胞的生长速度和提高在体外缺血缺氧环境下的抗凋亡能力。
- 刘家良华平杨淞然陶俊江慧琦王萌杨艳旗
- 关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞CASPASE-3基因缺血缺氧
- 腺病毒介导的肝细胞生长因子/血管内皮生长因子双基因转染骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死被引量：3
- 2012年
- 背景:骨髓间充质干细胞可以分化为心肌细胞,促进血管再生,但在移植早期其自身分泌的细胞因子不足以维持良好的分化和再生。目的:验证腺病毒介导的肝细胞生长因子和血管内皮生长因子双基因转染新西兰兔骨髓间充质干细胞移植对新西兰兔梗死心肌组织的修复重建和血管再生的影响。方法:腺病毒介导肝细胞生长因子/血管内皮生长因子双基因转染BrdU标记的新西兰兔骨髓间充质干细胞。取新西兰兔50只建立急性心肌梗死模型,4周后随机分为5组,分别于梗死心肌内注射:①骨髓间充质干细胞/Ad.血管内皮生长因子+肝细胞生长因子。②骨髓间充质干细胞/Ad.肝细胞生长因子。③骨髓间充质干细胞/Ad.血管内皮生长因子。④骨髓间充质干细胞。⑤对照组注射等量无血清IMDM培养液。移植4周后观察移植细胞的分化和新生血管的形成,并通过超声多普勒检测心功能变化。结果与结论:除对照组外,其余4组兔心功能都较移植前有明显改善(P<0.05),其中移植双基因转染骨髓间充质干细胞/Ad.血管内皮生长因子+肝细胞生长因子组兔的心功能改善程度要明显高于其他3组。部分BrdU染色阳性的细胞可以分化成为内皮细胞,参与构成了梗死区域的新生毛细血管。与对照组比较,其余4组都有明显的血管新生(P<0.05),而以骨髓间充质干细胞/Ad.血管内皮生长因子+肝细胞生长因子组最显著。提示肝细胞生长因子/血管内皮生长因子双基因转染新西兰兔骨髓间充质干细胞移植于梗死心肌可以促进心肌再生和新生血管的形成,明显改善心功能。
- 陈国祥华平熊利华陈矩潘德强
- 关键词：基因转染骨髓间充质干细胞血管内皮生长因子肝细胞生长因子
- Caspase-3 siRNA减少骨髓间充质干细胞稳定株细胞凋亡的实验研究被引量：6
- 2014年
- 目的探讨在体外采用Caspase-3小干扰核糖核酸(siRNA)减少骨髓间充质干细胞(MSC)稳定株细胞凋亡的方法,以构建稳定表达的MSC细胞株。方法使用逆转录病毒包装系统,在293FT细胞中进行包装生产含Caspase-3 siRNA的病毒颗粒,然后转染给大鼠MSC,对转染后的细胞进行筛选并扩增培养得到稳定株细胞。根据逆转录病毒的特性,利用蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-QPCR)对细胞株进行稳定表达的鉴定,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定(TUNEL)法对稳定株细胞和正常MSC进行凋亡检测并进行定位比较。结果与正常细胞比较,MSC稳定株细胞中的Caspase-3蛋白表达量和mRNA含量明显降低;在同样体外环境下,MSC稳定株细胞的凋亡数量比正常细胞明显减少。结论利用逆转录病毒包装系统可得到稳定表达Caspase-3 siRNA的MSC稳定株细胞。MSC稳定株细胞比正常细胞凋亡明显减少。
- 刘立宝黄蕾张军航廖洪映胡爱玲许世磊华平
- 关键词：CASPASE-3核糖核酸干扰逆转录病毒细胞凋亡骨髓间充质干细胞
- RNA干扰抑制骨髓间充质干细胞中caspase-3基因的表达被引量：5
- 2012年
- 背景:研究发现,骨髓间充质干细胞移植入心肌梗死区域后易发生凋亡导致移植细胞存活率较低。目的:构建caspase-3基因的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs,siRNAs)表达质粒,探讨其在体外对骨髓间充质干细胞中caspase-3基因表达的抑制作用。方法:根据siRNA设计原则,针对caspase-3基因设计并合成siRNAs,构建caspase-3siRNA表达载体并利用脂质体介导方法瞬时转染骨髓间充质干细胞。实验分为正常对照组,阴性序列对照组(si-ncg)和3个干扰组(si-caspase-3-1、si-caspase-3-2和si-caspase-3-3)。结果与结论:成功构建了caspase-3siRNA表达载体并转染骨髓间充质干细胞。Westernblot和RT-PCR检测转染后的骨髓间充质干细胞中caspase-3蛋白和mRNA的表达下降,以转染si-caspase-3-3的骨髓间充质干细胞下降最明显。结果提示构建的caspase-3siRNA表达质粒在体外能抑制骨髓间充质干细胞中caspase-3基因的表达。
- 刘立宝华平杨淞然刘家良江慧琦王萌曾宽敖翔杨艳旗
- 关键词：骨髓间充质干细胞凋亡CASPASE-3RNA干扰
