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山东省自然科学基金(SK201001)

作品数：1 被引量：4H指数：1
相关作者：李海东刘峰郑明刚郑立王玲更多>>
相关机构：国家海洋局第一海洋研究所青岛大学更多>>
发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇等鞭金藻
  • 1篇电场
  • 1篇电场强度
  • 1篇电转化
  • 1篇致死
  • 1篇金藻
  • 1篇活率
  • 1篇基因
  • 1篇GUS报告基...
  • 1篇场强
  • 1篇存活
  • 1篇存活率

机构

  • 1篇国家海洋局第...
  • 1篇青岛大学

作者

  • 1篇仝颜丽
  • 1篇王玲
  • 1篇郑立
  • 1篇郑明刚
  • 1篇刘峰
  • 1篇李海东

传媒

  • 1篇海洋环境科学

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
等鞭金藻的电转化体系被引量：4
2012年
以等鞭金藻(Isochrysis sp.CCMM5001)为材料,探索了影响其电转化的主要因素,建立了等鞭金藻电转化体系。结果表明,真空抽滤法收集藻体获得的细胞存活率明显高于离心收集法;藻体收集的最适缓冲液为1.0 mmol/L HEPES(pH7.5)(含0.5 mol/L蔗糖);相同电场强度下,对数早期的藻细胞存活率最高,早、中、晚期的半致死电场强度分别为0.82～1.63 kV/cm、0.79～1.34 kV/cm、0.54～1.18 kV/cm;最佳脉冲时间为5 ms;冰浴时间为10 min。通过电击转化法向球等鞭金藻中导入质粒pCAMBIA2301,并对转基因球等鞭金藻进行GUS组织化学染色和GUS荧光定量分析,检测pCaMV 35S启动下的GUS报告基因的表达。得到转基因球等鞭金藻的GUS活性为0.52 nmolMU/(min.mg)。通过PCR方法检测固体平板上的单藻落,结果显示转化藻株能够检测到nptII基因。本研究建立了等鞭金藻的电转化体系,为外源基因的导入及其功能的研究奠定了基础。
李海东仝颜丽郑立王玲刘峰郑明刚
关键词：等鞭金藻电转化存活率GUS报告基因
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