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赭曲霉毒素A模拟抗原表位及噬菌体展示酶联免疫吸附分析法的建立被引量：6: 2015年; 以驴抗鼠二抗包被微孔板,以捕获方式包被抗赭曲霉毒素A（OTA）单克隆抗体,利用噬菌体随机七肽库筛选OTA模拟抗原表位,并以其替代检测抗原,建立了基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析（Phage ELISA）检测OTA的方法。结果表明,筛选获得的模拟OTA抗原表位七肽氨基酸序列为GMSWMMA。基于模拟表位噬菌体建立的Phage ELISA方法半数抑制浓度（IC50值）为（0.15±0.02）ng/m L,检测OTA的线性范围为0.03~0.50 ng/m L,OTA的检出限为0.03 ng/m L,且Phage ELISA与其它4种常见真菌毒素（黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮）无交叉反应。大米样品OTA加标实验表明,批內加标回收率为97.0%~115.2%,批间加标回收率为107.2%~123.1%,与ELISA试剂盒检测结果比较,无显著性差异。; 王吕熊斯诚邹旭强陈超超邵辉锋陈雪岚; 关键词：赭曲霉毒素A 噬菌体展示肽库模拟表位酶联免疫吸附法

量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测恶性疟原虫被引量：29: 2015年; 以羧基化Cd Te/Zn Se量子点荧光微球为荧光标记物,采用1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺（EDC）法偶联抗恶性疟原虫富组氨酸蛋白（Pf）单克隆抗体制备荧光探针;以羊抗恶性疟原虫组氨酸多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,形成试纸条检测线和质控线,建立了免疫层析试纸条定量检测血清中恶性疟原虫的方法。所使用的羧基化量子点荧光微球的荧光强度为单个量子点的2800倍。实验结果表明,该荧光试纸条定量检测血清中恶性疟原虫线性范围为5.8-8010 Parasite/μL,最低灵敏度达到5.8 Parasite/μL,单个样品检测时间只需15 min。加标回收实验显示,试纸条批内回收率为93.0%-111.8%,批间回收率为98.3%-115.1%,且批内、批间的相对标准偏差均小于5%。; 段宏陈雪岚江湖沈骏董胜明熊勇华Andrew Wang; 关键词：恶性疟原虫

水体中苯并芘检测试剂盒研制及效果评价被引量：6: 2016年; 目的研制间接竞争酶联免疫吸附法（ELISA）检测苯并芘试剂盒。方法采用棋盘滴定法确定抗原抗体的最佳用量;采用间接ELISA分析法确定苯并芘检测的最适条件,包括p H值、盐离子浓度及甲醇浓度。结果抗原最佳包被浓度为10μg/m L,单克隆抗体稀释倍数为1：5 000;在最优p H值为7.4、盐离子浓度为0.01 mol/L及甲醇浓度为10%的条件下,检测方法在5~50 ng/m L范围内线性相关,线性方程为y=-28.105 Ln（x）＋123.66,R2=0.9937,IC50为13.74 ng/m L,苯并芘的最低检出限为3.3 ng/m L;在水样中的加标回收率为94.8%~112.3%;变异系数为4.38%~9.72%。结论该方法适用于水体中苯并芘的检测,可用于大批量样品的快速筛查。; 陈超超邵辉峰王吕陈雪岚; 关键词：抗原抗体

钝齿棒杆菌argR基因缺失株构建及其缺失对精氨酸生物合成途径相关基因转录水平的影响被引量：5: 2013年; 【目的】钝齿棒杆菌AS 1.542中argR基因编码的蛋白ArgR在精氨酸生物合成途径中扮演负调控的角色,但其对相关基因在转录水平的影响还未见报道。因此,本课题组构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并在转录水平上比较野生株与缺失株精氨酸生物合成途径相关基因的变化。【方法】采用无痕敲除的方法构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并采用荧光定量PCR方法分析缺失株和野生株精氨酸生物合成途径相关基因在转录水平的变化。【结果】利用pK18mobsacB质粒中蔗糖致死基因sacB反向筛选标记及PCR方法成功筛选到钝齿棒杆菌argR基因缺失株;荧光定量PCR结果表明,argR基因缺失株精氨酸生物合成途径中相关基因在转录水平获得大量提高,平均约上调162.13倍。【结论】钝齿棒杆菌精氨酸生物合成途径的相关基因受负调控蛋白ArgR的显著调控,但其基因的敲除并没有引起精氨酸产量发生明显的变化。; 陈雪岚汤立焦海涛徐峰熊勇华; 关键词：钝齿棒杆菌精氨酸荧光定量PCR

Lateral Flow Immunoassay for Quantitative Detection of Ractopamine in Swine Urine被引量：3: 2014年; A strip reader based lateral flow immunoassay(LFIA)was established for the rapid and quantitative detection of ractopamine(RAC)in swine urine.The ratio of the optical densities(ODs)of the test line(AT)to that of the control line(AC)was used to effectively minimize interference among strips and sample variations.The linear range for the quantitative detection of RAC was0.2 ng/mL to 3.5 ng/mL with a median inhibitory concentration(IC50)of 0.59±0.06 ng/mL.The limit of detection(LOD)of the LFIA was 0.13 ng/mL.The intra-assay recovery rates were 92.97%,97.25%,and 107.41%,whereas the inter-assay rates were80.07%,108.17%,and 93.7%,respectively.; REN Mei LingCHEN Xue LanLI Chao HuiXU BoLIU Wen JuanXU Heng YiXIONG Yong Hua; 关键词：莱克多巴胺猪尿半数抑制浓度

噬菌体展示技术在真菌毒素检测中的应用研究: 2015年; 噬菌体展示技术是一项筛选技术,能将外源多肽或蛋白质与噬菌体的衣壳蛋白融合表达,并展示在噬菌体颗粒的表面。因此,可通过该技术获得真菌毒素的模拟表位和抗真菌毒素的重组抗体,这为利用免疫学原理建立无毒检测体系检测真菌毒素带来了新的模式。本文综述了近几年噬菌体展示技术在真菌毒素检测中的应用研究。; 陈超超陈雪岚; 关键词：真菌毒素噬菌体展示技术模拟表位

胶体金免疫层析法定量检测猪肉中克伦特罗被引量：19: 2013年; 建立了基于T/C比值的胶体金免疫层析法快速定量检测猪肉中克伦特罗残留的新方法。胶体金免疫层析试纸条的定量检测线性范围为0.1～1.5 ng/g,检测猪肉中克伦特罗残留的最低检测灵敏度为0.19 ng/g。比较了5种猪肉组织样本中克伦特罗的简便提取方法,其中采用0.02 mol/L,含2.8%NaCl的HCl溶液抽提猪肉样品2次的提取方案,克伦特罗的平均回收率达到76.7%,变异系数为7.4%。实际样本加标回收实验显示,加标量为0.5、1.0、2.0及3.0 ng/g时,胶体金试纸条检测回收率分别为(60.4±12.8)%,(70.24±4.2)%,(75.9±4.9)%,(71.1±5.0)%。与传统ELISA方法比对,结果显示2种方法具有较好的相关性(R2=0.9136)。以上实验结果证实,基于T/C比值法的胶体金免疫层析试纸条可用于猪肉组织样品中克伦特罗的快速及定量检测。; 李超辉陈雪岚郭亮许恒毅刘文娟赖卫华熊勇华; 关键词：克伦特罗胶体金试纸条猪肉

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国家自然科学基金(31160323)