国家重点基础研究发展计划(2002CB512905) 作品数:99 被引量:490 H指数:13 相关作者: 邬堂春 金泰廙 刘秉慈 白云 杨晓波 更多>> 相关机构: 华中科技大学 复旦大学 中国疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 山西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 环境科学与工程 农业科学 更多>>
Different Patterns of Cyclin D1/CDK4-E2F-1/4 Pathways in Human Embryo Lung Fibroblasts Treated by Benzo[a]pyrene at Different Doses 被引量:1 2008年 Objective To investigate the roles of the cyclin D1/CDK4 and E2F-1/4 pathways and compare their work patterns in cell cycle changes induced by different doses of B[a]E Methods Human embryo lung fibroblasts (HELFs) were treated with 2 μmol/L or 100 μmol/L B[a]P which were provided with some characteristics of transformed cells (T-HELFs). Cyclin D l, CDK4 and E2F-1/4 expressions were determined by Western blotting. Flow cytometry was used to detect the distribution of cell cycle. Results After B[a]P treatment, the proportion of the first gap (G 1) phase cells decreased. CDK4 and E2F-4 expression did not change significantly. In 2 μmol/L treated cells, a marked overexpression of cyclin D1 and E2F-1 was observed. However, in T-HELFs overexpression was limited to cyclin D1 only, and no overexpression of E2F-1 was observed. The decreases of G1 phase in response to B[a]P treatment were blocked in antisense cyclin D1 and antisense CDK4 transfected HELFs (A-D1 and A-K4) and T-HELFs (T-A-D1 and T-A-K4). After 2 μmol/L B[a]P treatment, overexpression of E2F-1 was attenuated in A-D1, and E2F-4 expression was decreased significantly in A-K4. In T-A-D1 and T-A-K4, E2F-4 expression was increased significantly, compared with T-HELFs. The E2F-1 expression remained unchanged in T-A-D1 and T-A-K4. Condusions Cyclin DI/CDK4-E2F-1/4 pathways work in different patterns in response to low dose and high dose B[a]P treatment. In HELFs treated with 2 μmol/L B[a]P, cyclin D1 positively regulates the E2F-1 expression while CDK4 negatively regulates the E2F-4 expression; however, in HELFs treated with 100 μmol/L B[a]P, both cyclin D1 and CDK4 negatively regulate the E2F-4 expression. MENG YE BING-CI LIU XIANG-LIN SHI BAO-RONG YOU HONG-JU DU XIAO-WEI JIA FU-HAI SHEN关键词:BENZO[A]PYRENE CDK4 E2F 焦炉工职业性多环芳烃暴露特征的研究 被引量:23 2004年 目的 探讨焦炉工职业性多环芳烃暴露特征。方法 个体采样、高效液相色谱法测定作业环境中多环芳烃含量,以分析焦炉工职业暴露特征,并引入毒性当量因子概念,评价焦炉工职业性多环芳烃暴露的致癌潜能。结果 焦化厂炉顶工多环芳烃职业暴露水平明显高于炉侧工和炉底工,差异有统计学意义(P<0.05);焦炉工多环芳烃职业暴露中非致癌性物质所占比例>70%,致癌性物质中苯并(a)芘(B[a]Py)占总B[a]Py等当量浓度的65.5%-72.4%;多环芳烃职业暴露总量和B[a]Py及芘含量呈正相关(r2分别为0.84和0.94,P<0.05)。结论 焦炉工职业性多环芳烃暴露水平较高且具有一定的致癌潜能,致癌性物质以B[a]Py为主。 陈波 郑力行 胡云平 陈亮 荣顺兴 贾琳 王宁 董琛 周袁芬 金泰廙关键词:焦炉工 致癌性 苯并(A)芘 多环芳烃 毒性当量因子 焦化厂 苯并〔a〕芘对内皮细胞HSF1与HSE结合特性分析 被引量:1 2005年 目的研究苯并〔a〕芘(BaP)作用下热休克转录因子1(HSF1)与热休克元件(HSE)结合特性,分析BaP对热应激蛋白70(HSP70)的表达的影响。方法取对数生长期的猪主动脉内皮细胞传代培养,分别以不同浓度的BaP染毒(0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L)24h,提取细胞核蛋白,用凝胶阻滞电泳实验(EMSA)检测结合率。结果低(0.1μM)、中剂量(0.5,1μM)BaP可使HSF1-HSE结合率上升,高剂量(5,10μM)BaP使HSF1-HSE结合率明显降低。结论BaP可改变细胞HSF1-HSE结合能力,低、中剂量的BaP使HSF1-HSE结合率升高,提示可促进HSP70表达,高浓度BaP可抑制HSP70的表达。 徐增光 文冠华 杨晓波 杨进波 邬堂春关键词:苯并[A]芘 内皮细胞 过氧化氢处理K562细胞中JWA基因的表达及其与DNA损伤和凋亡的关系 被引量:9 2005年 目的研究过氧化氢(H2O2)诱导K562细胞氧化应激过程中,JWA蛋白、热休克蛋白(hsp70和hsp27)和p53蛋白的表达特点,探讨JWA参与细胞应答氧化应激的作用和可能机制。方法用0.01、0.1、1mmol/L的H2O2处理K562细胞10、30、60、180min建立氧化损伤模型;用0.1mmol/LH2O2处理不同时间(6~48h)和不同浓度(0.5~1000μmol/L)的H2O2处理48h分别诱导K562细胞凋亡,然后用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA损伤和凋亡,用免疫印迹方法检测热休克蛋白(hsp70和hsp27)、p53以及JWA的蛋白表达水平。结果在DNA损伤模型中,H2O2活跃地调节JWA的表达,JWA对氧化应激的应答比热休克蛋白更快速,JWA和hsp70的表达规律相似;在低剂量H2O2(0.01mmol/L)处理时,JWA和热休克蛋白的表达均显著增高;在细胞凋亡模型中,JWA、hsp70、hsp27和p53的表达均显著增高,其中,JWA、hsp70和p53三者的表达规律相似。结论JWA是一个有效的环境应答基因并活跃地参与细胞应答氧化应激所致的DNA损伤和细胞凋亡的信号通路,其介导的信号通路可能与hsp70和p53有关。 朱婷 李爱萍 刘起展 王心如 周建伟关键词:过氧化氢 K562细胞 JWA基因 DNA损伤 苯并(a)芘作用下人胚肺细胞JWA基因的表达及其与DNA损伤修复的关系 被引量:8 2005年 目的研究苯并(a)芘诱导人胚肺(ccc HPF1)细胞DNA损伤修复中基因JWA和热休克蛋白(hsp70)的表达规律,探讨JWA基因参与细胞DNA损伤修复的作用和可能机制。方法建立ccc HPF1细胞DNA损伤模型,在S9活化状态下分别以10~100μmol/L苯并(a)芘处理细胞3h收获细胞或再恢复24h,用碱性单细胞凝胶电泳鉴定DNA损伤和修复情况,免疫印迹方法检测JWA和hsp70的表达水平。结果在DNA损伤模型中,苯并(a)芘活跃地调节JWA的表达,50μmol/L和100μmol/L处理组JWA和hsp70明显上调,在恢复期内10~100μmol/L处理组两者都处于较高的表达水平并且JWA和hsp70的表达规律几乎完全一致。结论JWA是一个有效的环境应答基因,活跃地参与细胞应答与DNA切除修复有关的信号通路。 顾灯安 李爱萍 朱婷 叶健 周建伟关键词:苯并(A)芘 人胚肺细胞 JWA基因 DNA修复 焦炉工苯并(a)芘暴露水平及DNA遗传损伤特征分析 被引量:7 2006年 目的探讨焦炉作业工人苯并(a)芘暴露与外周血淋巴细胞DNA损伤的关系及其特征。方法选取343名焦炉工人和40名对照,应用彗星试验检测外周血淋巴细胞DNA损伤。分别采用定点采样和个体采样方法,使用高效液相色谱法测定环境苯并(a)芘浓度。利用调查表收集研究对象年龄、工龄、从事现工种时间、吸烟、饮酒、职业史等信息。结果定点采样,苯并(a)芘浓度呈现炉顶>炉侧>炉底>对照的趋势,分别为(1.26±0.65),(0.11±0.38),(0.02±0.003),0.01μg/m3。个体采样苯并(a)芘浓度呈现炉侧拦焦侧>炉顶>炉侧推焦侧>炉底>辅助工区>对照的趋势,分别为(1.43±0.06),(0.35±0.02),0.10,(0.05±0.007),(0.04±0.01),0.02μg/m3。焦炉工人外周血淋巴细胞慧星尾长(几何均数)分别为(16.94±2.59),(17.52±2.39),(10.78±2.48),(6.89±1.90),olive尾矩(几何均数)分别为(4.60±1.29),(4.57±1.17),(2.79±1.11),(1.61±0.56),炉顶工、炉侧工、炉底及辅助工均显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05),炉顶工与炉侧工之间差异不显著(P>0.05),但均显著高于炉底及辅助工,差异有显著差异(P<0.05)。炉顶工、炉侧工、炉底及辅助工与对照相比,外周血淋巴细胞慧星尾长和olive尾矩阳性的危险度OR值分别为29.66,28.90,9.97和27.24,26.04,9.32,有随个体外暴露苯并(a)芘浓度增高而增高的趋势。结论焦炉工外周血淋巴细胞DNA遗传损伤与个体苯并(a)芘暴露趋势一致。环境个体采样及彗星试验可作为焦炉工人PAHS暴露和细胞遗传损伤的监测指标。 郑金平 孙建娅 郭亮 梁华山 田凤 邬堂春关键词:多环碳氢化合物 芳香族 苯并(A)芘 DNA损伤 彗星试验 XPC基因启动区单核苷酸多态与肺癌易感性的相关性 被引量:3 2007年 [目的]研究DNA修复基因XPC启动区-371和-27位点单核苷酸多态与肺癌易感性的关系。[方法]以401例肺癌患者为病例组,同时以383名年龄性别频数相匹配的非肿瘤患者作为对照组,采用Taqman MGB探针荧光标记的聚合酶链反应方法检测XPC基因启动区G-371A和G-27C的基因型;运用Phase2.0软件构建这两个多态位点的单体型;以比值比(OR)及其95%可信区间(CI)比较不同基因型的肺癌相对危险度。[结果]病例组与对照组间,XPC G-371A等位基因型和G-27C等位基因型分布差异具有显著性(Х^2=4.33,P〈0.05;Х^2=9.84,P〈0.01)。与携带XPC-371GG基因型的个体相比较,携带XPC-371GA+AA基因型的个体患肺癌的风险明显降低(OR校正=0.69;95%CI:0.51—0.94);而携带XPC-27GG基因型的个体相比较,XPC-27CG+CC基因型患肺癌的风险明显增加(OR校正=2.18;95%CI:1.23—3.85)。进一步单体型分析显示,与人群中分布最广泛的GG单体型比较,AG单体型可以降低风险(OR=0.76;95%CI:0.60。0.96;P〈0.05);GC单体型明显增加患肺癌的风险(OR=2.06;95%CI:1.20—3.54;P〈0.05)。[结论]XPC启动区.27位点CG+CC基因型和.371位点GA+AA基因型与中国人群肺癌易感性有关。 白云 冯茂辉 许平 彭映 杨晓波 王峰 邬堂春关键词:肺癌 启动区 单体型 大鼠体内镉负荷与尿金属硫蛋白关系的实验研究 被引量:3 2006年 [目的]分析大鼠尿金属硫蛋白(UMT)与体内镉负荷的关系,探讨UMT作为镉接触性生物标志物的可行性。[方法]24只SD大鼠分为4组,分别皮下注射给予0、0.5、1.0、2.0mgCd/kg体重CdCl27d。原子吸收分光光度法(AAS)测定肝脏、肾脏、胰脏、尿液、血液中镉的含量;比色法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测UMT的含量。[结果]镉染毒大鼠血镉、尿镉、肝镉、肾镉、胰镉含量随染镉剂量的增加而明显增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);各染镉组大鼠UNAG水平未见明显改变(P>0.05);UMT含量随着染镉剂量的增加而明显增加(P<0.05),并且与肝镉、肾镉、胰镉、血镉、尿镉含量呈明显正相关,相关系数分别为0.703、0.815、0.691、0.654、0.641(P<0.01)。[结论]UMT与体内镉负荷指标间存在较好的一致性,能反映机体镉负荷水平,可作为镉接触生物标志物。 宁勇 陈亮 雷立健 金泰廙关键词:镉 金属硫蛋白 皮下注射 槲皮素抑制HSP70表达对紫外线C致DNA损伤的影响 被引量:6 2007年 目的研究热休克蛋白70(HSP70)在紫外线C致DNA损伤中的保护作用。方法用254 nm紫外线不同照射剂量(10,20,40,80 J/m2)照射槲皮素(quercetin)抑制HSP70表达的A549细胞株(A549/quercetin),用Western-blot检测HSP70的水平,用碱性单细胞凝胶电泳检测DNA损伤,用彗星细胞率和Olive尾矩评价DNA损伤情况。A549细胞作为正常对照组,DMSO处理作为溶剂对照组(A549/DMSO)。结果无论在A549组、A549/DMSO组,还是在A549/quercetin组,DNA损伤的彗星细胞率随着紫外照射的剂量增加而逐渐增加,在10 J/m2时,未观察到HSP70的保护作用,3组的彗星细胞率差异无统计学意义;在20 J/m2照射时,可以观察到HSP70的保护作用,但不明显;40 J/m2照射时,观察到HSP70对DNA有很明显的保护作用;80 J/m2照射时,HSP70的保护作用又逐渐地消失了。进一步分析40 J/m2照射的Olive尾矩显示,与A549组或A549/DMSO组相比,A549/quercetin组Olive尾矩明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HSP70能保护细胞免受一定剂量范围内的紫外线C照射引起的DNA损伤。 牛丕业 宫智勇 谭皓 王峰 邹云锋 杨瑾 段燕英 袁晶 邬堂春关键词:热休克蛋白70 槲皮素 单细胞凝胶电泳 丙烯睛对大鼠的子宫增重作用 被引量:1 2005年 [目的 ]研究丙烯腈 (AN)的雌激素样作用。 [方法 ]采用经典大鼠子官增重测试方法 ,对去卵巢SD大鼠皮下注射剂量分别为 0、10、15、2 5、40、60mg/kg受试物丙烯腈 ,每天 1次、连续 3d ,同时皮下注射剂量为 0 .0 0 1mg/kg雌二醇。同时设雌二醇为阳性对照组和去离子水为溶剂对照组。最后 1次给药 2 4h后 ,将大鼠麻醉后取血并处死 ,观察受试动物子宫湿重、干重及肝脏、肾脏重量等指标。 [结果 ]丙烯腈各剂量组大鼠子官干重、湿重与溶剂对照组差异无显著性(P >0 .0 5 ) ,阳性对照组与溶剂对照组及丙烯腈各剂量组比较 ,子宫干重、湿重差异有显著性 (P <0 .0 5 )。丙烯腈各剂量组除最高剂量组肝脏重量有轻微增加外 (P <0 .0 5 ) ,受试动物未出现明显系统毒性。 [结论 王宁 荣顺兴 周元陵 钟先玖 金泰廙关键词:子宫 雌二醇 皮下注射 肝脏 干重 增重作用