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国家重点基础研究发展计划(2013CB733602): 作品数：50 被引量：219H指数：9; 相关作者：陆健蔡国林杨艳坤孙军勇刘秀霞更多>>; 相关机构：江南大学宿迁市江南大学产业技术研究院南京工业大学更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>; 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>

啤酒酵母提前絮凝的研究进展被引量：2: 2015年; 酵母提前絮凝是啤酒企业时有发生的现象,因其复杂的影响因素至今对酵母提前絮凝的发生机理及提前絮凝因子的本质没有明确的证实,也因此给整个啤酒酿造产业链造成了极大的困扰。近年来,随着环境污染及各种恶劣天气的出现,导致啤酒酵母提前絮凝发生相对增多,对麦芽企业及啤酒企业造成一定经济和名誉损失。作者综述了啤酒酵母提前絮凝的国内外最新研究进展,包括机理假说、提前絮凝因子的来源、形成机制及控制研究,以期对啤酒产业链提供有效解决酵母提前絮凝的思路和方法。; 陆健商曰玲孙军勇蔡国林; 关键词：啤酒大麦麦芽啤酒酵母微生物

玉米秸秆酶解制备阿魏酰聚糖被引量：1: 2016年; 玉米秸秆经多级旋风磨机械预处理后物理结构发生改变,更易被相应的酶水解从而释放出阿魏酰聚糖。相同酶解条件下,多级旋风磨预处理后的秸秆的阿魏酰聚糖含量是粗秸秆的3.34倍;用商品复合酶Validase TRL、HSP 6000BG和Rapidase Smart Clear,木糖苷酶及阿拉伯呋喃糖苷酶分别酶解机械预处理后的玉米秸秆,Validase TRL酶解效果最佳,阿魏酰聚糖得率为1.46μmol/g玉米秸秆,是不加酶时的3.48倍;协同酶解的最优组合为Validase TRL 100 U/g,木糖苷酶50U/g和阿拉伯呋喃糖苷酶50U/g,该条件下阿魏酰聚糖的得率为2.87μmol/g;酶解液经大孔树脂分离纯化后,阿魏酰聚糖的回收率为81.44%。; 尤梦竹陆健蔡国林; 关键词：玉米秸秆酶解

解淀粉芽孢杆菌胞外多糖对乳酸菌生长及代谢的调控作用被引量：2: 2019年; 研究解淀粉芽孢杆菌JN4的胞外多糖(exopolysaccharide, EPS-JN4)对乳酸菌生长及代谢的调控作用,有利于阐明EPS-JN4定向增殖乳酸菌的作用机制。采用PCR-变性梯度凝胶电泳技术分析EPS-JN4的定向增殖作用,并考察其对主要乳酸菌生长、主要代谢产物、肠道耐受性和表面疏水性的影响。EPS-JN4可以定向增殖罗伊氏乳杆菌,其对罗伊氏乳杆菌JN125的前期增殖速度较葡萄糖慢,但最高菌浓为葡萄糖的5.25倍,代谢产物中乳酸和醋酸含量则较葡萄糖分别降低了12.2%和32.4%。EPS-JN4增殖的罗伊氏乳杆菌JN125的肠道耐受性和表面疏水性显著提高,对其原因初步分析表明细胞膜蛋白和脂类物质含量提高了40.8%和105.7%,细胞膜组成中的十八碳脂肪酸和不饱和脂肪酸显著提高。EPS-JN4可以作为潜在的益生元,用于调节动物肠道健康。; 蔡国林蔡国林李晓敏陆健; 关键词：解淀粉芽孢杆菌胞外多糖乳酸菌益生元代谢

黄酒发酵过程中乳酸菌的分离及对其产生物胺能力的评价被引量：11: 2017年; 对黄酒酿造过程中乳酸菌进行分离,并对乳酸菌产生物胺能力进行检测。利用脱羧培养基对分离出的82株乳酸菌进行培养,结合反相高效液相色谱技术(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RPHPLC)测定发酵液中生物胺含量,具体色谱条件如下:使用丹磺酰氯(Dansyl Chloride,Dns-CL)进行柱前衍生,以乙腈-乙腈(φ=50%)为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L/min,254 nm紫外波检测。该方法在给定浓度范围内线性关系良好(R^2>0.996),平均回收率为94.46%~105.20%,相对偏差(RSD)均小于5%。检测到组胺产生菌株11株,最大生成量为18.19 mg/L,高产菌株分离自黄酒前酵第2天;酪胺产生菌株28株,最大生成量为30.38mg/L,高产菌株分离自黄酒前酵第2天;腐胺产生菌株51株,最大生成量为299.94 mg/L,高产菌株分离自浸米水。由此表明,有必要控制黄酒发酵过程中的乳酸菌,采用低产或不产生物胺的乳酸菌作为强化菌株,可降低黄酒中的生物胺含量。; 王然然李晓敏陈柳卞小稳蔡国林陆健; 关键词：黄酒乳酸菌生物胺

绍兴黄酒发酵过程中有机酸及产酸细菌的初步研究被引量：22: 2016年; 采用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）分析了绍兴黄酒发酵过程中有机酸组成及动态变化情况,运用变性梯度凝胶电泳技术（denatured gradient gel electrophoresis,DGGE）分析了细菌群落结构变化,以纯培养结合分子生物学的方法分离、鉴定了产酸细菌,并对其发酵特性进行了研究。结果表明,乳酸、乙酸和柠檬酸是黄酒发酵过程中产生的主要有机酸,其含量占总有机酸的55%以上。有机酸的含量随发酵的进行呈递增趋势,柠檬酸、草酸、酒石酸、乳酸、苹果酸、丙酮酸和乙酸含量增幅较大（90%~385%）,琥珀酸、富马酸、α-酮戊二酸增幅较小（28%~34%）。DGGE分离及测序结果表明,黄酒发酵过程中主要的细菌有乳酸杆菌（Lactobacillus）、糖多孢菌（Saccharopolyspora）、葡萄球菌（Staphylococcus）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、链霉菌（Streptomyces sp.）以及不可培养细菌（Uncultured bacterium）等。经16S r DNA序列分析鉴定及发酵特性研究,产酸细菌主要为乳酸杆菌,其中植物乳杆菌占70%,属于异型发酵乳酸菌。; 吴宗文孙军勇吴殿辉李晓敏谢广发陆健; 关键词：有机酸乳酸杆菌绍兴黄酒

澄清剂对黄酒混浊蛋白去除效果的研究被引量：5: 2015年; 研究了单宁、硅胶和Polyclar R Brewbrite等澄清剂对黄酒混浊蛋白特异性去除的效果,并通过采用N-三(羟甲基)甘氨酸-十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱,研究了黄酒混浊蛋白及不同澄清剂吸附蛋白的分子量、蛋白质种类及来源,并比较了澄清剂处理前后酒样隆丁区分和非生物稳定性的变化。结果表明:黄酒混浊蛋白的主要成分为类燕麦蛋白和二聚α-淀粉酶抑制剂,主要来源于小麦,几种澄清剂对二聚α-淀粉酶抑制剂都有一定的吸附作用,且处理后的酒样稳定性得到提高,其中以单宁效果最为明显。; 樊世英孙军勇谢广发陆健; 关键词：黄酒澄清剂

人-鼠嵌合单链抗体的构建及其在大肠杆菌中的高效可溶性表达和发酵条件优化被引量：4: 2016年; 从人血清白蛋白HSA免疫小鼠制备的杂交瘤单克隆抗体细胞中提取总RNA,通过反转录得到c DNA,经RT-PCR的方法扩增出单克隆抗体的重链可变区VH和轻链可变区VL的DNA编码序列,通过基因重组的方法将鼠源Fab段VH和VL与人源Fab段重链和轻链恒定区进行嵌合,获得人源化嵌合单链抗体(Single-chain Antibody Fragment,sc Fv),将sc Fv克隆到构建的表达载体p BY中导入到宿主菌BL21-trx B(DE3)中进行可溶性表达,在摇瓶水平通过对发酵条件进行优化,胞内可溶性表达量达到1.23 g/L,在此基础上进行反应器放大培养,对关键参数进行优化,sc Fv表达量达到2.49 g/L。通过人源化嵌合抗体的构建表达并完成了小试水平的研究,为进一步开发人源化单链抗体提供了方法和研究基础。; 刘萌孙杨杨艳坤白仲虎; 关键词：SCFV 可溶性表达酶联免疫吸附发酵条件优化

大肠杆菌中dAb一级结构与可溶性表达关联: 2017年; 抗体类药物研发是药物发展的一个重要研究方向,目前已有许多抗体在原核表达体系中成功表达。人们通常采用"试错法"优化表达系统,提高蛋白质产量,但该方法费时费力且成功率低,因此迫切需要探索氨基酸组成与蛋白质可溶性表达水平之间的关联,以指导表达系统的选择或蛋白质分子的定向改造。在单域抗体dAb分子的C端末尾添加一个氨基酸,发现单个氨基酸的改变足以引起蛋白质可溶性表达量发生显著变化。通过层次聚类、Cluster Omega对dAb氨基酸序列与表达水平分别进行分类,发现两者分类一致的比例达到70%,证明了氨基酸序列与蛋白质表达水平间的关联。通过对65个CDR随机突变的dAb分子进行线性建模分析其可溶性表达量,发现对dAb胞外质量分数有显著影响作用的氨基酸组合为S(丝氨酸),R(精氨酸),N(天冬酰胺),D(天冬氨酸),Q(谷氨酰胺),Y(酪氨酸),F(苯丙氨酸),G(甘氨酸),对dAb胞内质量分数有显著影响作用的氨基酸组合为G,R,C(半胱氨酸),N,S,Y,K(赖氨酸),A(丙氨酸),对dAb蛋白质总量有显著影响的组合为R,S,G,N,Y,C,Q,F,T(苏氨酸)。其中R、S和G的含量显著影响dAb的可溶性表达量且该影响不受分布位置的影响。蛋白质的极性亦是其可溶性表达水平的显著影响因素。; 郭雯雯刘萌刘萌杨艳坤戴晓峰; 关键词：DAB 氨基酸组成可溶性表达聚类分析

啤酒大麦种子蛋白质组的分级制备及初步分析被引量：1: 2014年; 大麦种子蛋白主要分为清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,它们在大麦种子中起到不同的作用,因此对每个组分的研究具有重要的理论和实际意义。根据4种蛋白质组分的溶解性不同,可利用分级提取的方法获得4种组分的蛋白质溶液;进而利用TCA沉淀和TCA-丙酮沉淀法对4种蛋白质进行除杂和浓缩,获得适用于双向电泳的蛋白质提取液。利用SDS-PAGE和双向电泳检测提取效果,发现所得SDS-PAGE凝胶条带清晰,双向电泳图谱分辨率高,蛋白质点清晰;经PDQuest分析,谱图结果显示检测到450个水溶蛋白质点和100个醇溶蛋白质点。大麦种子中各组分蛋白质组的分级提取方法的构建,为后续对各组分蛋白组进行质谱鉴定及功能分析奠定了基础。; 李晓敏游丽华王迎新陆健董建军余俊红尹花; 关键词：醇溶蛋白双向电泳

球磨预处理和固态发酵对玉米秸秆饲用品质的影响被引量：6: 2014年; 玉米秸秆经球磨预处理后物理空间结构和化学物质结构改变,更容易被相应的酶降解,进而被微生物利用,其饲用品质提高,从而可能替代饲料中的部分粮食.研究表明,球磨预处理后的玉米秸秆粒径大小均匀,约90％的颗粒集中在10-100μm,酸性洗涤纤维下降3.5％,可溶性总糖提高2.0倍,对其单糖组成分析发现：可溶性总糖的增加主要来自半纤维素和纤维素的分子断裂.用木聚糖酶和纤维素酶酶解球磨预处理后的玉米秸秆,可溶性总糖和还原糖含量比酶解前分别提高了3.3倍和9.7倍,球磨预处理后酶解效率大大提高.球磨预处理的玉米秸秆经固态酶解、发酵后,总酸质量分数达26.3 mg/g,纤维素和半纤维素质量分数分别下降9.1％和4.9％,乳酸菌含量达到1.5×109 CFU/g,饲用品质显著提高.; 王璐璐蔡国林朱德伟陆健; 关键词：玉米秸秆饲用品质固态发酵

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