贵州省科学技术基金(JLKZ[2012]48)
- 作品数：1 被引量：21H指数：1
- 相关作者：覃松李康刘国跃陈淼戢慧更多>>
- 相关机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省科技计划项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡相关微小RNA的筛选被引量：21
- 2013年
- 目的 利用基因组芯片筛选Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）凋亡相关微小RNA （microRNA,miRNA）,以期为临床防治高氧性急性肺损伤（HALI）提供新策略.方法 原代培养雄性SD大鼠AECⅡ36 h,加入0.5 mmol/L H2O2诱导建立AECⅡ凋亡模型,透射电镜下鉴定AECⅡ并观察凋亡细胞形态；于制模前及制模后2.5、6、12、24 h收集细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率；基因芯片技术筛选AECⅡ凋亡相关miRNA,并采用实时荧光聚合酶链反应（RT-PCR）对基因芯片结果进行验证.结果 透射电镜下观察可见特征性的微绒毛及嗜锇性板层小体,鉴定为AECⅡ.透射电镜下可见细胞质回缩,染色质凝聚、边聚,细胞表面微绒毛稀少,嗜锇性板层小体排空.H2O2损伤细胞后,细胞凋亡率较空白对照组显著增加,且随损伤时间延长而逐渐上升[制模前及制模后2.5、6、12、24 h分别为（9.43±1.02）％、（18.38±2.91）％、（28.57±1.18）％、（35.83±2.66）％、（57.68±2.22）％,两两比较P＜ 0.05].与制模前相比,制模24h细胞伴有多种miRNAs的差异表达,其中rno-miR-449a-5p、rno-miR-34b/c-5p、rno-miR-200a/c-3p、rno-miR-146a-5p、rno-miR-141-3p、rno-miR-21-5p、rno-miR-375-3p、rno-miR-29b-3p、rno-miR-214-5p、rno-miR-210-5p及rno-miR-214-3p与凋亡密切相关.RT-PCR结果验证凋亡相关miRNAs结果与芯片结果一致.结论 利用基因组芯片筛选AECⅡ凋亡相关miRNA,其中miR-34家族可能是AECⅡ凋亡调控的主要参与者.rno-miR-21-5p可能是AECⅡ内重要的抗凋亡基因.
- 戢慧陈淼钱明江李康刘国跃覃松
- 关键词：凋亡微小RNA基因芯片
