国家自然科学基金(30100148)
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 相关作者：骆文静陈景元赵芳陈耀明王文亮更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院更多>>
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- 过表达的p27^(kip1)对肝癌细胞的抑制作用
- 2005年
- 目的:探讨过表达的p27kip1对肝癌细胞(HHCC)的抑制作用。方法:利用脂质体介导法将真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His(+)C-p27kip1基因导入HHCC中,用Westernblot检测p27kip1是否导入到HHCC中;用平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验检测过表达的p27kip1对HHCC的抑制作用;应用流式细胞仪、电子显微镜探讨过表达的p27kip1抑制HHCC生长的可能机制。结果:Westernblot检测表明,转染p27kip1的HHCC100%表达p27kip1蛋白。过表达的p27kip1对HHCC有明显的抑制作用,抑制率为49.09%～56.00%;过表达的p27kip1可以封闭G1期的进程和诱导HHCC发生凋亡,凋亡百分比为12.3%。结论:过表达的p27kip1可以通过诱导凋亡抑制肝癌细胞生长。
- 安家泽窦科峰陈景元王文亮王知力郑刚骆文静
- 关键词：肝细胞肝癌P27^KIP1
- EB1089对肝癌HepG_2细胞的抑制作用被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨EB1 0 89对体外培养的肝癌HepG2 细胞增殖的影响 .方法 :以 1 ,1 0 ,1 0 0nmol/LEB1 0 89分别作用 2 ,4 ,6和 8d,采用平板克隆形成实验、细胞计数法及MTT法测定EB1 0 89对HepG2 细胞生长增殖的抑制作用 ,并绘制生长曲线 .流式细胞仪检测细胞周期的改变及凋亡 .结果 :平板克隆形成试验及MTT提示 ,EB1 0 89对HepG2 细胞的增殖有显著抑制作用 ,抑制率为 1 6 .9%～ 74 .3% ,EB1 0 89的IC50 为 8.2nmol/L ;细胞计数法的结果提示与平板克隆形成试验结果一致 .流式细胞仪检测结果显示 ,1 0nmol/LEB1 0 89处理HepG2 细胞 4d ,G1期细胞占 71 .0 % ,对照组G1期细胞为 6 3.2 % ,呈降低趋势 ;处理组与对照组S期及G2期分别占 2 8.9%和 36 .8% ,呈增加趋势 ,且处理组有凋亡峰出现 ,凋亡细胞占 2 1 .4 % .结论 :EB1 0 89能够显著抑制肝癌HepG2 细胞的增殖 。
- 张雪平骆文静郑刚陈景元
- 关键词：EB1089HEPG2细胞细胞周期细胞凋亡
- EB1089抑制肝癌细胞增殖的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨维生素D类似物EB10 89对肝癌细胞增殖的可能机制。方法 体外培养了肝癌细胞株HHCC细胞 ,培养时添加 10 0、10和 1nmol LEB10 89分别作用 2d、4d、6d后 ,用四唑蓝比色实验 (MTT)、平板克隆形成实验检测细胞的存活和生长 ;用电子显微镜和流式细胞仪方法检测细胞凋亡 ;用Westerblot方法检测蛋白的表达。结果 EB10 89可以抑制肝癌细胞增殖 (抑制率为 17 5 0 %～ 72 14 % ) ,诱导肝癌细胞发生凋亡。10nmol LEB10 89作用肝癌细胞 4d可使p2 7kip1和PTEN蛋白表达增加。结论 EB10 89对于人肝癌细胞的增殖具有抑制作用 ,能机诱导肝癌细胞凋亡 ,增加肝癌细胞中p2 7kip1和PTEN蛋白的表达。
- 骆文静陈景元张雪萍王文亮陈耀明赵芳
- 关键词：PTEN
- p27^(Kip1)诱导肝癌细胞凋亡的实验研究
- 2008年
- 目的:探讨过表达的p27Kip1对肝癌细胞的抑制作用。方法:利用脂质体介导法将真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His(+)C-p27Kip1基因导入HHCC细胞中,用Westernblot检测p27Kip1是否导入到肝癌细胞中;用流式细胞仪检测过表达的p27Kip1对肝癌细胞HHCC的抑制作用;电子显微镜技术探讨过表达的p27Kip1抑制肝癌细胞生长的可能机制。结果:Westernblot检测表明,转染p27Kip1的HHCC细胞大部分有p27Kip1蛋白的表达;而转染空载体或未转染的HHCC细胞,均未见p27Kip1蛋白表达。经连续3次克隆化后,转染pcDNA3.1/Myc-His(+)C-p27Kip1的HHCC细胞100%表达p27Kip1蛋白。过表达的p27Kip1对HHCC细胞有明显的抑制作用,其抑制率为49.09%～56%;过表达的p27Kip1可以封闭G1期的进程和诱导肝癌细胞发生凋亡,其凋亡百分比为12.3%。结论:过表达的p27Kip1可以通过诱导肝癌细胞凋亡抑制肝癌细胞生长。
- 安家泽窦科峰骆文静
- 关键词：基因表达调控细胞凋亡
- 维生素D类似物EB1 089对肝癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：13
- 2004年
- 目的探讨维生素D类似物EB1089对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养维生素D3受体(VDR)阳性和阴性的肝癌细胞株HepG2和HCCT细胞,培养时添加100、10和1nmol/LEB1089,分别作用2、4和6d后,用四唑蓝比色实验(MTT)、平板克隆形成实验检测细胞的存活和生长;用反转录PCR(RTPCR)检测VDRmRNA的表达;用流式细胞仪和电子显微镜检测细胞凋亡。结果EB1089对VDRmRNA表达阳性的HepG2细胞的抑制率为175%～721%,对VDRmRNA表达阴性的HCCT细胞没有抑制作用;电镜结果显示EB1089可诱导HepG2细胞凋亡,流式细胞仪结果显示凋亡细胞的百分比为214%,并可阻滞细胞周期于G1期。结论EB1089对人肝癌细胞株HepG2的增殖具有抑制作用,可通过VDR受体抑制人肝癌细胞的增殖,并可诱导HepG2细胞凋亡。
- 骆文静陈景元徐文赵芳陈耀明沈学锋
- 关键词：维生素D类似物EB1089肝癌细胞增殖细胞凋亡
