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去细胞喉支架的制备及喉肌细胞再生的可行性研究被引量：6: 2009年; 目的探讨灌注法去细胞技术制备去细胞全喉支架及利用骨髓间充质干细胞使喉肌细胞再生的可行性。方法新西兰大白兔作为喉支架供体，通过双侧颈总动脉顺行灌注去离子剂，构建出喉肌去细胞外基质及活性软骨的全喉支架，取部分灌注后标本进行观察，其余用于下一步实验。青紫蓝兔为受体兔，取其骨髓间充质干细胞诱导培养为骨骼肌细胞后注入全喉支架的去细胞基质中。体外培养1d后异位移植入受体兔大网膜。8周取出标本进行观察。结果大体观察发现喉在经去离子剂灌注后2h已经呈透明状态，组织学及扫描电镜显示喉肌去细胞基质内无细胞残留物，纤维网状结构存在，孔隙率80．4％±3．2％（x^-±s，下同）；软骨细胞存活率86．9％±1．5％。移植至大网膜的喉体4周和8周取出时大体观察发现喉支架完整，其表面有血管形成。组织学显示肌束存在，免疫组织化学检测α-肌动蛋白表达阳性。结论诱导后的骨髓间充质干细胞注入经去细胞技术处理的全喉支架可以构建出保留软骨支架并含有再生肌肉组织的喉，植入大网膜内生长有助于其血管化。; 侯楠崔鹏程陈文弦罗家胜马瑞娜; 关键词：喉软骨喉肌间质干细胞

去细胞全喉软骨支架的免疫学研究被引量：5: 2010年; 目的评价去细胞全喉软骨支架的免疫原性。方法通过对兔离体喉行双侧颈总动脉顺行灌注去离子剂，构建去软组织细胞全喉支架12只。12只去细胞全喉软骨支架及12只新鲜喉分别埋植于24只青紫蓝兔喉旁肌内，于埋植后2、4、12、24周分别取材进行大体观察、组织学观察及淋巴细胞浸润计数比较。结果去细胞全喉软骨支架颜色透明苍白，完整地保留了喉的去细胞组织结构及软骨活性。去细胞全喉软骨支架埋植于青紫蓝兔喉旁肌后，各观察时间点未出现明显的免疫排斥反应，4周后埋植喉体积逐渐缩小，但软骨结构仍存在。对照组新鲜喉埋植2周时即出现明显的免疫排斥反应，4周后喉的形状完全消失，喉大部分结构已被溶解，被纤维结缔组织取代，周围组织出现不同程度的溶解坏死。同一时间点，对照组淋巴细胞浸润程度明显高于实验组，差异有统计学意义（2周与4周的t值分别为15．11和13．91，P值均〈0．01）。结论灌注法去细胞技术能够构建出具有低免疫原性的喉软骨支架，该支架有可能成为良好的喉修复材料。; 马瑞娜崔鹏程侯楠罗家胜王兴; 关键词：移植物排斥

体外构建气管黏膜上皮组织的研究被引量：1: 2008年; 目的:应用组织工程原理和方法在体外构建气管黏膜上皮组织.方法:将原代兔气管上皮细胞种植在铺有鼠尾胶原的小肠黏膜下层(SIS)上培养,在体外构建气管黏膜上皮组织,培养1wk后行HE染色,对气管上皮细胞行免疫细胞学鉴定.结果:原代气管上皮细胞培养1wk后增殖旺盛,10d时上皮细胞分布范围更广.将构建的气管黏膜上皮组织行HE染色,显示有气管黏膜上皮和SIS双层结构.抗角蛋白单克隆抗体免疫细胞化学反应阳性显色率可达90%左右.结论:将铺有鼠尾胶原的SIS复合气管上皮细胞生长,成功的在体外构建出组织工程化的气管黏膜上皮组织.; 吴明明崔鹏程赵大庆郑德育段小红; 关键词：上皮细胞小肠黏膜下层

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陕西省自然科学基金(2006C224)