山东省高等学校科技计划项目(J10LF64)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：李文通李洪利张宝刚尹崇高冯洁更多>>
- 相关机构：潍坊医学院济宁市第一人民医院更多>>
- 发文基金：山东省高等学校科技计划项目山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- NUAK1增加乳腺癌细胞的趋化和粘附能力被引量：1
- 2014年
- 本课题组先前已证明NUAK1/ARK5可通过影响F-actin的聚合从而促进乳腺癌细胞的侵袭和转移.但是NUAK1是否还通过其它机制影响乳腺癌的侵袭和转移尚有待于探讨.本文证明NUAK1还可以影响乳腺癌细胞趋化、粘附能力从而在乳腺癌细胞侵袭转移中起重要作用.应用化学合成的小RNA干扰质粒转染到乳腺癌细胞系MDA-MB-231中,用免疫印迹技术检测NUAK1蛋白的表达情况.结果显示,在敲除NUAK1的细胞(siNUAK1/MDA231)中,NUAK1蛋白表达水平明显降低;趋化运动实验结果显示,siNUAK1/MDA231细胞的趋化运动能力比未处理组(Scr/MDA231)细胞明显降低;细胞粘附实验结果显示,EGF刺激5 min、15 min后,siNUAK1/MDA231细胞比Scr/MDA231细胞粘附细胞数量均明显减少;免疫印迹技术检测integrinβ1磷酸化验证NUAK1影响乳腺癌细胞粘附的机制.结果显示,siNUAK1/MDA231细胞内integrinβ1磷酸化比Scr/MDA231细胞不同程度降低.上述结果表明,NUAK1通过磷酸化integrinβ1促进乳腺癌细胞与纤维粘连蛋白的粘附,从而促进乳腺癌的侵袭和转移.
- 李洪利尹崇高
- 关键词：乳腺癌整合素Β1粘附
- 乳腺癌中MTDH的表达及意义被引量：3
- 2012年
- 乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,其侵袭转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因[1]。近来,美国新泽西癌症研究所和普林斯顿大学的研究人员发现身患严重乳腺癌的患者体内,8号人类染色体的一小部分被重复了多次,肿瘤内一种名为Metadherin（MTDH）基因发生变异,表现异常活跃[2]。本研究探讨MTDH在乳腺癌发病中的作用。
- 尹崇高高乃尧李洪利李文通张宝刚
- 关键词：乳腺癌肿瘤患者人类染色体恶性肿瘤
- Snail促进乳腺癌MCF-7细胞移植瘤对多柔比星的耐药及其机制
- 2011年
- 目的:探讨Snail在乳腺癌MCF-7细胞移植瘤对多柔比星耐药中的作用及其可能的机制。方法:构建Snail基因真核表达载体pcDNA3.1-Snail,转染至MCF-7细胞,筛选稳定表达Snail的MCF-7/Snail细胞,以转染空质粒pcDNA3.1的MCF-7细胞(MCF-7/pcDNA)为对照。构建小鼠MCF-7/Snail及MCF-7/pcDNA细胞移植瘤模型,注射多柔比星,观测移植瘤生长,计算抑瘤率。免疫组织化学方法检测移植瘤组织中Snail、多药耐药基因-1(multidrug resistance-1,MDR-1)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达。结果:成功构建pcDNA3.1-Snail表达载体,转染MCF-7细胞后获得MCF-7/Snail和MCF-7/pcDNA细胞,并制备小鼠移植瘤。多柔比星治疗后,MCF-7/Snail细胞移植瘤的瘤重明显高于MCF-7/pcDNA细胞移植瘤[(1.413±0.674)g vs(1.257±0.576)g,P<0.05],多柔比星对MCF-7/Snail移植瘤抑瘤率明显低于MCF-7/pcDNA移植瘤(18.42%vs30.18%,P<0.05),MCF-7/Snail细胞移植瘤的组织中Snail、MDR-1、MMP-9的表达均显著高于MCF-7/pcDNA移植瘤(408.08±20.39vs67.67±16.56,363.50±26.56vs55.08±12.23,396.25±16.03vs56.92±7.35;均P<0.01),且Snail与MDR-1和MMP-9的表达均呈正相关(r1=0.89,P<0.01;r2=0.81,P<0.01)。结论:Snail促进乳腺癌MCF-7细胞移植瘤对多柔比星的耐药,其机制与增强MDR-1和MM9-9表达有关。
- 王琳李洪利赵修世赵云赵一诺李文通张式暖
- 关键词：多柔比星SNAILMDR-1MMP-9
- 连接蛋白43、Vimentin联合检测与乳腺癌转移关系的研究被引量：6
- 2012年
- 目的:观察连接蛋白43(CX43)、波形蛋白(Vimentin)在乳腺癌组织中的表达,探讨两者与乳腺癌转移之间的关系。方法:收集112例乳腺癌组织及30例癌旁正常乳腺组织,应用免疫组织化学法、westernblot法分别检测CX43、Vimentin的表达,并进行相关性分析。结果:免疫组织化学:(1)癌旁正常乳腺组织与乳腺癌组织中CX43的阳性表达率分别是86.7%和40.2%,而Vimentin的阳性表达率分别是20.0%和72.3%,表达差异均有统计学意义(P<0.05),且CX43与Vimentin的表达差异成负相关性(χ2=17.014,P=0.000<0.05,r=-0.226,P=0.017<0.05)。(2)CX43(-)/Vimentin(+)组与CX43(+)/Vimentin(-)组比较,淋巴结转移率较高(χ2=9.391,P=0.002<0.05)。(3)CX43表达与病理分级、TNM分期和转移成负相关(P<0.05),而Vimentin的表达与三者成正相关(P<0.05)。WesternBlot:CX43、Vimentin在正常、无淋巴结转移及有淋巴结转移的乳腺组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05),有淋巴结转移的乳腺癌组织CX43的表达量最低而Vimentin的表达量最高。结论:CX43表达量的降低与Vimentin表达量的升高可能与乳腺癌转移有关,CX43、Vimentin联合检测可能对筛选乳腺癌高转移患者有一定的意义。
- 张立英周风华李文通冯洁吕世军
- 关键词：乳腺肿瘤CX43VIMENTIN
- Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的研究被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测90例胶质瘤组织中ARK5及Gab2表达。采用小RNA干扰转染LN-229细胞株,Western Blot检测瞬时转染后ARK5及Gab2表达。体外侵袭实验检测转染后侵袭能力变化及Western Blot检测Gab2下降后Akt和ARK5的磷酸化。结果:胶质瘤组织中ARK5和Gab2免疫组织化学阳性结果呈正相关且在高级别胶质瘤(WHO分级为Ⅲ、Ⅳ级)中表达明显高于低级别胶质瘤(WHO分级为Ⅰ、Ⅱ级)。转染ARK5、Gab2、ARK5-Gab2及SCR质粒的LN-229细胞分别称siARK5/LN-229、siGab2/LN-229、siARK5-siGab2/LN-229和SCR/LN-229。其中siARK5干扰效率为70%,siGab2的干扰效率为75%。转染后,与SCR/LN-229相比,siARK5/LN-229中ARK5表达降低,siGab2/LN-229中Gab2表达降低,siARK5-siGab2/LN-229中ARK5和Gab2表达均降低。siARK5/LN-229和siGab2/LN-229侵袭并穿透Matrigel膜基质的细胞数均比对照组少(P<0.01),且siARK5-siGab2/LN-229细胞数减少更显著(P<0.01)。在IGF-1刺激下,siGab2/LN-229中Akt和ARK5的磷酸化减弱。结论:应用小RNA干扰技术降低ARK5或Gab2表达使LN-229细胞侵袭转移能力降低,同时Gab2表达降低抑制ARK5和Akt磷酸化,提示Gab2-Akt-ARK5通路参与胶质瘤细胞的侵袭。
- 孙磊刘雨清李小龙刘菲张丽娜李洪利张宝刚
- 关键词：胶质瘤小RNA干扰
