国家自然科学基金(81071636) 作品数:8 被引量:10 H指数:2 相关作者: 谭晓华 杨磊 高媛 南玉龙 张进霞 更多>> 相关机构: 杭州师范大学 石河子大学 教育部 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Pep-1-vMIP-Ⅱ对小鼠抗HIV-Ⅰ基因表达的作用 2013年 目的探讨融合蛋白Pep-1-vMIP-Ⅱ在影响宿主ARGs基因表达抵抗HIV-Ⅰ感染中的作用。方法小鼠背部涂抹Pep-1-vMIP-Ⅱ2 h后,用免疫组织化学方法测定不同组织器官中vMIP-Ⅱ的穿膜情况。用实时定量PCR,检测24 h后不同组织器官中ARGs mRNA表达水平;用Graphpad Prism 5软件分析实验数据。结果皮肤涂抹Pep-1-vMIP-Ⅱ组2 h后vMIP-Ⅱ在肾脏分布明显增加(P<0.05);涂抹Pep1-vMIP-Ⅱ24 h后,白细胞、肾、心、肝和肺中CCL5的mRNA表达水平有明显差异(P<0.05),脑组织中CCL5的表达未见明显增加;MX1、MX2在多种组织中都表达上调(P<0.05)。结论Pep-1-vMIP-Ⅱ可以穿透小鼠皮肤进入肾脏组织,主要通过激活CCL5基因表达发挥调控作用。 高媛 南玉龙 杨磊 谭晓华 尹洪萍 汪浩病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ对载脂蛋白B mRNA编辑酶催化样蛋白3G和正常T细胞表达分泌的调节活化蛋白表达的影响 被引量:1 2014年 目的:明确病毒巨噬细胞炎症蛋白-II(viral macrophage inflammatory protein-II,vMIP-II)对HIV-1抑制因子:载脂蛋白BmRNA编辑酶催化蛋白3G(apolipoproteon B mRNA-editing catalytic polypeptide-3G,APOBEC 3G)和正常T细胞表达分泌的调节活化蛋白(regulated upon activation normal T expressed and secreted,RANTES)表达的影响。方法:构建vMIP-II真核表达载pEGFP-N3-vMIP-II,分别采用电穿孔和脂质体转染的方法将其转染至Jurkat和293T细胞。荧光定量PCR检测vMIP-II基因对Jurkat细胞和293T细胞内的抗艾滋病基因APOBEC3G和RANTES表达水平的影响。结果:测序结果显示成功构建了的vMIP-II真核表达载体,荧光显微镜观察估计转染效率达到50%左右。与空载体组相比较,转染pEGFP-N3-vMIP-II组的Jurkat细胞内的APOBEC3G和RANTES分别上调4.97倍和7.31倍,293T细胞内的APOBEC3G和RANTES分别上调为5.73倍和8.14倍。结论:vMIP-II基因不同程度的上调了Jurkat细胞和293T细胞内的抗艾滋病基因APOBEC3G和RANTES的表达。 李靖 谭晓华 何淼 刘如锦 王小波 杨磊关键词:载脂蛋白B let-7在肿瘤中的表达及相关靶基因研究进展 被引量:3 2016年 let-7是发现较早的一类小分子RNA(miRNA)。人let-7 miRNA家族共有13位成员,分别位于9个不同的染色体位点。let-7家族在细胞增殖、分化和肿瘤发生中扮演着重要的角色。研究表明在许多肿瘤的形成过程中,绝大部分let-7家族成员表达水平降低,因此,let-7普遍认为是一种肿瘤抑制基因。let-7靶向作用于多个基因,干扰由let-7控制的网络可能起到治疗癌症的目的。研究在肿瘤的发展过程中let-7是如何表达调控,并恢复let-7家族的表达,在癌症的治疗中具有深远意义。本文就let-7在肿瘤中的表达及相关靶基因作一综述。 张进霞 谭晓华 连福志 杨磊关键词:LET-7 肿瘤 靶基因 Let-7在KSHV原发感染过程中的表达变化 被引量:1 2012年 为研究在KSHV原发感染过程中Let-7表达水平的变化情况。采用20ng/mL TPA诱导培养BCBL-1细胞4d,收集并裂解细胞;超速离心制备KSHV病毒颗粒;感染293T细胞,采用实时定量聚合酶链反应(quantitative Real-timepolymerase chain reaction,qRT-PCR)检测感染1-6d内Let-7的表达水平。结果显示,Let-7在KSHV原发感染293T细胞的1-4d表达水平均下调,感染后1-2d表达水平最低。7a、7b、7g、7i均下调为对照细胞的0.01倍以下。之后随感染天数增加Let-7表达水平逐渐增加,其中Let-7c(7d、7f)表达水平在第6天分别达到未感染对照细胞的0.9倍,Let-7b、Let-7e、mir-98在第6天的表达水平与对照细胞接近除了Let-7e上调3倍。由此可知,Let-7在KSHV原发感染过程中总体表现为下调趋势。因此推测,Let-7可能在KSHV原发感染过程中产生重要调控作用。 南玉龙 谭晓华 高媛 杨磊关键词:LET-7 KSHV 原发感染 卡波氏肉瘤 RBP-Jκ在KSHV复制中的作用研究进展 被引量:1 2017年 KSHV被称为人类疱疹病毒8型,是卡波氏肉瘤,原发性渗出性淋巴瘤和多中心Castleman病等疾病的病原。KSHV存在潜伏和裂解两种复制状态,但是其机制尚不清楚。现有研究证实病毒的复制和转录激活因子(RTA)能促进多种病毒基因的表达,激活病毒进入裂解期;同时RTA也可以激活相关抗原(LANA)基因表达,而LANA又反过来抑制RTA的表达,在KSHV潜伏感染中发挥关键作用。RBP-Jκ是Notch通路的主要转录抑制因子,也是RTA激活病毒裂解复制所必需的因子;RBP-Jκ也可与LANA结合,发挥抑制RTA表达的功能。本文将对RBP-Jκ在KSHV复制中的重要作用作一综述。 齐燕 谭晓华 周通 牛万强 杨磊关键词:KSHV RTA LANA KSHV潜伏和裂解感染机制的研究进展 被引量:2 2012年 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(kapois's sarcoma,KS)的病原,并与PEL、MCD等多种淋巴增殖紊乱性疾病相关。其生命周期可分为潜伏感染和裂解感染两个阶段。在潜伏感染阶段,KSHV的病毒基因表达受到严格调控,只有少数病毒潜伏相关基因的持续表达,潜伏感染对病毒长期持续感染复制是必不可少的。在裂解复制阶段,病毒基因绝大部分复制表达,并包装产生新的感染性病毒颗粒。现就KSHV病毒潜伏感染和裂解感染机制的研究进展作一综述。 南玉龙 谭晓华 杨磊下调let-7微小RNA对卡波西肉瘤相关疱疹病毒裂解复制和丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶4及其下游因子的影响 2016年 目的 探讨下调let-7微小RNA(miRNA)的表达对卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)裂解复制的影响。方法 采用miRNA海绵技术抑制let-7 miRNAs的表达,脂质体法将pEGFP-C2-let-7 sponge质粒转染到BCBL-1和293T细胞中。实时荧光定量PCR法检测let-7 miRNAs的表达,丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶4(MAP4K4)、环氧合酶2(COX-2)和基质金属蛋白酶13(MMP-13)mRNA的表达以及KSHV开放读码框(ORF)50和ORF72基因DNA复制水平。Western blot法检测MAP4K4和COX-2蛋白的表达以及p38丝裂原活化蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白的表达及磷酸化水平。结果 在BCBL-1细胞中,let-7 sponge组中let-7 miRNAs的相对表达水平与空载体组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05);在293T细胞中,let-7 sponge组中let-7a、let-7b、let-7c、let-7d、let-7e、let-7f、let-7g和let-7i的相对表达水平与空载体组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。质粒转染BCBL-1细胞48 h后,空载体组和let-7 sponge组中KSHV ORF50 DNA的相对复制水平分别为1.00±0.10和2.33±0.18,差异有统计学意义(P〈0.001); KSHV ORF50 mRNA的相对表达水平分别为1.08±0.48和3.22±0.27,差异有统计学意义(P〈0.001)。空载体组和let-7 sponge组中KSHV ORF72 DNA的相对复制水平分别为1.07±0.49和1.67±0.45,mRNA相对表达水平分别为1.01±0.19和1.54±0.11,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。转染质粒48 h后,空载体组和let-7 sponge组中MAP4K4 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.05和5.73±0.96,COX-2 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.05和2.68±0.19,MMP-13 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.02和2.69±0.25,差异均有统计学意义(均P〈0.001)。let-7 sponge组与空载体组比较,MAP4K4和COX-2的蛋白表达水平也明显提高。在BCBL-1细胞中let-7 m 张进霞 谭晓华 袁震 李燕虎 齐燕 南希 齐明键 高鹤 连福治 杨磊关键词:疱疹病毒8型 卡波西肉瘤 卡波济肉瘤相关疱疹病毒编码的microRNAs最新研究进展 被引量:2 2013年 microRNAs(miRNAs)是一类长约23个核苷酸的非编码小RNA,通过其诱导的沉默复合物(miRNA-induced silencing complex,miRISC)在转录水平特异性识别靶mRNA进而使其降解或抑制翻译而发挥功能[1]。2004年Pfeffer等[2]在研究Epstei-Barr病毒(EBV)感染的细胞中首次发现病毒编码的miRNAs(miR-BHRF1-1、miR-BHRF1-2、miR-BHRF1-3和miR-BART1、 高媛 谭晓华 杨磊关键词:MICRORNAS 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 卡波济肉瘤