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上海市自然科学基金(13ZRl403500)
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氯硝柳胺对人三阴性乳腺癌MDA—MB.231细胞的放射增敏作用研究
被引量:1
2014年
目的研究氯硝柳胺对人三阴性乳腺癌MDA—MB-231细胞的放射增敏作用及其与Wnt/13-连环蛋白信号通路相关的作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的氯硝柳胺对MDA—MB-231细胞生长的抑制效应,求得IC50值。将细胞分为空白对照组、氯硝柳胺单纯给药组、单纯照射组和氯硝柳胺+照射组,氯硝柳胺预处理的浓度为1.0和1.5umol/L,137Csy射线的照射剂量为0、2、4和6Gy;克隆形成试验检测氯硝柳胺对MDA—MB-231细胞的放射增敏作用;免疫荧光法检测辐射诱导的-yH2AX焦点形成;流式细胞仪检测细胞周期的变化;Westernblot法检测磷酸化和非磷酸化B-连环蛋白和CyelinD1蛋白表达。结果氯硝柳胺抑制MDA—MB-231细胞生长24h的IC50值为13.63umol/L;1.0和1.5umol/L氯硝柳胺对MDA—MB-231细胞均有较好的放射增敏作用,放射增敏比SER分别为1.37和1.62,随给药剂量的增大而增强;氯硝柳胺预处理使受照MDA.MB-231细胞y-/H2AX焦点形成率较单纯照射组显著增加(t=3.91,P〈0.05),G2/M期阻滞明显减少(t=8.05,P〈0.01),并显著抑制了辐射诱导的磷酸化B-连环蛋白(S675)、非磷酸化B-连环蛋白和CyelinD1蛋白表达的升高。结论氯硝柳胺对MDA-MB-231细胞具有显著的放射增敏作用,其作用机制与抑制Wnt/B-连环蛋白信号通路,从而抑制DNADSBs修复和减少辐射诱导的G2/M期阻滞有关。Wnt/B-连环蛋白信号通路可能是有效的三阴性乳腺癌放射增敏的新靶点。
殷丽娜
张旭霞
王晶
张亚平
暴一众
张俊香
陈红红
关键词:
氯硝柳胺
放射增敏
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