福建省科技创新平台建设项目(2006H0085)
- 作品数:2 被引量:13H指数:2
- 相关作者:林琳胡长浩沈麟施文芳刘燕雅更多>>
- 相关机构:福建师范大学更多>>
- 发文基金:福建省科技创新平台建设项目国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 冷藏牛奶中脂肪酶产生菌的分离
- 本文从福建农林大学及康利达乳品有限公司采集牛奶样品,并将其置于4℃预处理一周,让耐冷菌成为优势菌。采用常规稀释度方法稀释样品至适当浓度,涂布2%三丁酸甘油酷平皿筛选培养基,培养温度分别为4℃和18C,挑取在平皿筛选培养基...
- 施文芳胡长浩沈麟林琳
- 关键词:脂肪酶酶学特性假单胞菌
- 脂肪酶菌种的筛选鉴定及部分酶学性质的研究
- 脂肪酶的热稳定性问题一直是脂肪酶生产和应用的瓶颈问题。本研究小组致力于从耐高温菌种筛选、分子突变、结构修饰等方面研究和解决该问题。从自然界筛选耐高温脂肪酶菌种,获得相应的基因,不但菌种本身将来有可能成为耐高温脂肪酶的生产...
- 胡长浩施文芳陈彦刘燕雅林琳
- 关键词:脂肪酶酶学性质
- 随机突变对扩展青霉脂肪酶最适作用温度的改善被引量:4
- 2009年
- 利用error-prone PCR和staggered extension process(StEP)相结合的方法对扩展青霉脂肪酶(PEL)进行定向进化,构建含有随机突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-mutantx,电转化引入毕赤酵母GS115中,进行异源表达。高通量筛选获得一株最适作用温度比野生型提高了5℃的突变株。15%的SDS-PAGE表明突变体分子量与野生型一致,约为28kDa。基因测序结果表明,突变体第270位丙氨酸变为苏氨酸,后者是氢键的供体,能形成具有稳定空间结构的氢键,使酶结构更加稳定,在高温下更适于与底物结合。
- 胡长浩邹有土刘燕雅冯蔚宗林琳
- 关键词:扩展青霉脂肪酶随机突变最适作用温度
- 脂肪酶菌种的筛选、鉴定及酶学性质研究被引量:9
- 2009年
- 目的:筛选耐热脂肪酶产生菌并研究其酶学特性。方法:以固体平板法筛选产酶菌株,单因素和分子进化树分析确定产酶条件、酶学性质及分类地位。结果:产酶条件初步确定为2%糊精、3%酵母膏、MgSO4·7ddH2O 0.1%、K2HPO40.1%、CaCl20.1%、三丁酸甘油酯乳化液0.1%,起始pH7.0,装量为50mL/250mL摇瓶,发酵温度及周期为35℃,22h。酶学性质表明:较适作用温度,pH分别为45℃,10.0,在pH5.0~11.0范围内稳定;该酶具有较好的热稳定性,60℃下温浴30min仍保留77%的活性;可水解长链油脂(C18∶0);0.01%的SDS及10mmol/L的Pb2+、Ba2+抑制该酶的活性,0.05%的EDTA没有影响,0.01%的Triton X-100、Tween80及10mmol/L的K+有促进作用;16S rDNA的分子进化树分析表明,该菌株与Staphylococcus aureus有最紧密的亲缘关系。结论:获得了一株耐热脂肪酶产生菌FL-12,并初步鉴定为Staphylococcus aureus。
- 胡长浩施文芳沈麟林琳
- 关键词:热稳定性酶学性质