您的位置: 专家智库 > >

黑龙江省自然科学基金(D0250)

作品数:2 被引量:10H指数:2
相关作者:毕郑钢袁绍辉尚剑邵国军更多>>
相关机构:哈尔滨医科大学更多>>
发文基金:黑龙江省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇基质干细胞
  • 2篇骨髓基质
  • 2篇骨髓基质干细...
  • 2篇干细胞
  • 1篇形态发生蛋白
  • 1篇雪旺细胞
  • 1篇诱导分化
  • 1篇载体转染
  • 1篇神经再生
  • 1篇重组腺相关病...
  • 1篇转染
  • 1篇组织工程神经
  • 1篇细胞
  • 1篇腺相关病毒
  • 1篇骨髓
  • 1篇骨髓干细胞
  • 1篇骨形态
  • 1篇骨形态发生蛋...
  • 1篇骨形态发生蛋...
  • 1篇分化

机构

  • 2篇哈尔滨医科大...

作者

  • 2篇尚剑
  • 2篇袁绍辉
  • 2篇毕郑钢
  • 1篇邵国军

传媒

  • 1篇中国矫形外科...
  • 1篇中华创伤骨科...

年份

  • 1篇2008
  • 1篇2006
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
融合基因骨形态发生蛋白-4/7重组腺相关病毒载体转染对骨髓基质干细胞成骨活性的作用被引量:3
2008年
目的应用高效细菌内同源重组系统pAd-Easy制备融合基因骨形态发生蛋白-4/7(BMP-4/7)基因的重组腺相关病毒(AAV),转染兔骨髓基质干细胞(BMSCs),检测BMP-4/7的成骨活性。方法采用RT-PCR一步法和基因重组法,从胎盘组织中克隆BMP.4和BMP-7成熟肽cDNA,获取BMP-4/7融合基因,克隆到pGEM质粒中;从pGEM-BMP-4/7质粒中切取BMP-4/7融合基因克隆到穿梭载体,在大肠杆菌内重组,在293细胞中构建AAV—BMP-4/7重组腺相关病毒载体;采用SDS—PAGE电泳检测BM-4/7融合基因蛋白在大肠杆菌的表达;采用ELISA法检测融合基因BMP-4/7在BMSCs中的表达。AAV-BMP4/7转染兔BMSCs细胞7、14d后,行碱性磷酸酶及骨钙素含量测定,观察成骨活性,以非转染组作为对照。结果成功构建高滴度的携带BMP4/7融合基因的重组腺相关病毒AAV-BMP4/7。AAV-BMP-4/7重组质粒载体转化大肠杆菌进行诱导表达,SDS—PAGE电泳可见29~30KD蛋白带,大多数蛋白存在于包涵体内。ELISA检测显示经AAV转染的BMSCs中BMP-4/7蛋白有表达,随着转染MOI值的增加,BMP4/7蛋白的表达增高(P〈0.01)。AAV.BMP-4/7转染细胞后,碱性磷酸酶及骨钙素含量均明显增高,并与转染后诱导培养的时间呈正相关,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论融合基因BMP4/7可提高BMPs表达水平,有成骨活性,通过AAV可稳定表达。
袁绍辉尚剑邵国军毕郑钢
关键词:骨形态发生蛋白
骨髓干细胞诱导分化构建组织工程神经被引量:7
2006年
[目的]探讨组织工程化神经修复周围神经缺损的作用。[方法]以DMEM为培养基体外诱导人骨髓基质干细胞分化为雪旺细胞,与细胞外基质及可降解聚乳酸导管构建组织工程化神经;建立坐骨神经缺损10 mm的W istar大鼠动物模型,A组:经诱导骨髓基质干细胞分化雪旺细胞与天然细胞外基质(extra cellu lar m atrix,ECM)凝胶及可降解聚乳酸导管构建组织工程化神经桥接神经缺损;B组:单纯将ECM凝胶注入可降解聚乳酸导管桥接神经缺损;C组:自体神经移植组。术后12周进行神经电生理检测、新生神经组织学观察和轴突计数等检测坐骨神经功能恢复情况。[结果]1.诱导后骨髓基质干细胞呈梭形、胞核大、周围有光晕、突起细长呈纵形排列,GAFP及S-100免疫组织化学染色阳性。动物模型各组经移植术后12周,再生神经已通过缺损区长至神经远端。A组、C组组织学及电生理检测指标均优于B组(PAB=0.021,PBC=0.001),A组与C组无显著性差异(PAC=0.065);A、B组聚乳酸导管降解吸收明显。[结论]骨髓基质干细胞在体外可诱导分化为雪旺氏细胞,利用其与细胞外基质及可降解聚乳酸导管构建组织工程化神经可以修复周围神经缺损。
尚剑袁绍辉毕郑钢
关键词:骨髓基质干细胞雪旺细胞神经再生
共1页<1>
聚类工具0