国家自然科学基金(30771585)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
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- 猪Prox1基因的染色体定位和亚细胞定位的研究被引量：3
- 2013年
- 在克隆猪Prox1基因(sProx1)的基础上,对猪Prox1基因进行染色体定位分析,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物进行亚细胞水平定位。本研究将人和鼠的Prox1基因编码区在猪的ESTs数据库中进行检索,然后根据EST进行序列拼接并设计引物对猪Prox1基因编码区进行克隆。通过比对人、鼠及其他物种Prox1基因第二个内含子序列,设计引物扩增猪Prox1基因部分内含子,根据克隆得到的部分内含子序列设计引物,利用猪-仓鼠体细胞辐射杂种板(IMpRH)对猪Prox1基因进行染色体定位。根据已获得的猪Prox1基因编码区序列,构建猪Prox1基因的融合绿色荧光超表达载体EGFP-Prox1,并转染猪肾PK15细胞,12h后倒置荧光显微镜观察Prox1蛋白在亚细胞内的定位。结果表明:Prox1基因定位于猪第9号染色体长臂的26区,与标记SW1651紧密连锁;构建猪Prox1基因的真核表达载体pEGFP-N1-Prox1,融合蛋白EGFP-Prox1定位于PK15细胞的细胞核中。
- 袁继红龙欢田明芳杨在清
- 关键词：染色体定位亚细胞定位
- 游离脂肪酸对3T3-L1细胞IL-6 mRNA及蛋白表达的影响
- 2013年
- 用不同种类游离脂肪酸(FFA)处理体外培养成熟的3T3-L1脂肪细胞,用实时荧光定量PCR和ELISA分析FFA处理前后IL-6 mRNA和蛋白质水平的表达差异。结果表明:各类脂肪酸对IL-6 mRNA的表达均具有上调作用,并且各种脂肪酸显著影响IL-6蛋白的分泌。
- 袁继红朱意付家忠
- 关键词：脂肪酸白细胞介素-6脂肪细胞
- 猪糖原合酶激酶3β基因的克隆、染色体定位和组织表达谱分析被引量：1
- 2011年
- 糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3,βGSK3β)是一种在机体内分布广泛且结构高度保守的丝/苏氨酸蛋白激酶。本研究利用电子克隆的方法克隆了猪GSK3β(sGSK3β)基因的编码区序列;用猪-仓鼠体细胞辐射杂种板(IMpRH)对其进行了染色体定位;用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,以10个不同组织样品cDNA为模板对sGSK3β的组织表达谱进行了分析。研究结果表明,sGSK3β基因的编码区有1263个核苷酸,编码420个氨基酸,其氨基酸序列与人、大鼠、小鼠和斑马鱼同源性分别为95.6%、98.8%、98.8%、93.3%;sGSK3β基因定位于猪的13q41-46,与标记SW1876紧密连锁。组织表达谱分析结果表明sGSK3β基因在猪的10种组织中存在着表达量的差异,在肝脏和肺脏中高表达,在脂肪、肾脏、脾脏、大脑和小脑中次之,而在心脏、胃和肌肉中只检测到本底表达。
- 袁继红龙欢林瑞意杨在清
- 关键词：基因克隆染色体定位组织表达谱
- 成熟脂肪细胞中脂联素基因表达的脂肪酸应答调控被引量：11
- 2009年
- 用不同种类、不同浓度游离脂肪酸(FFA)处理体外培养的成熟3T3-L1脂肪细胞,实时荧光定量PCR和Western-blotting分析FFA处理前后脂联素基因mRNA和蛋白质水平的表达差异。结果表明:各类脂肪酸对脂联素mRNA的表达均具有下调作用,且抑制效应呈时间、剂量依赖性;并且各种脂肪酸显著地影响脂联素蛋白的分泌作用。
- 袁继红龙欢雷霆陈小冬杨在清
- 关键词：脂肪酸脂联素基因表达脂肪细胞
