国家自然科学基金(30200297)
- 作品数：7 被引量：31H指数：4
- 相关作者：马向东陈必良王德堂辛晓燕马兴更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胚胎先天性神经管缺陷的表达差异基因及信号传导被引量：7
- 2008年
- 目的:研究妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的分子机制.方法:将29只SD雌性大鼠分为3组:正常对照组,8只;②实验模型组,链脲佐菌素(STZ)构建的妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷,12只;③实验对照组,STZ构建的糖尿病大鼠模型但胚胎不伴有先天性神经管缺陷发生,9只.于妊娠第12日取出各组胚胎,解剖显微镜下进行形态学分析.提取卵黄囊细胞mRNA,用cDNA基因芯片技术对表达差异基因进行检测.提取卵黄囊细胞蛋白质,应用特异性抗磷酸化抗体进行免疫共沉淀及WesternBlot,对MAP Kinase信号途径上各蛋白激酶活性进行分析.结果:提取实验模型组大鼠胚胎卵黄囊细胞mRNA,与正常对照组大鼠胚胎卵黄囊细胞mRNA共1200个基因同时进行比较,共筛选出表达差异基因79条,其中42条表达上调基因,包括凋亡相关基因BAX,bcl-2,heat shock70,glucose-transporter3等;37条表达下调基因包括phospholipase A2,insulin-likegrowth factorⅡreceptor等.与正常对照组相比较,ERK1/2蛋白激酶活性显著下降;JNK1/2活性明显升高,凋亡相关蛋白Caspase-3,Bax高表达,凋亡抑制蛋白AKT活性明显受抑.结论:妊娠合并糖尿病诱发的胚胎先天性神经管缺陷的发生,与MAP Kinase及细胞凋亡信号传导机制参与密切相关.
- 马向东吴小明马兴赵东涛陈必良辛晓燕王德堂
- 关键词：CDNA神经管缺陷MAPKINASE
- 妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的分子机制被引量：1
- 2003年
- 妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的分子病因学是多因素的复杂过程 ,涉及到脂质代谢障碍、超氧阴离子自由基的参与、卵黄囊细胞膜的原发性损伤等。最新研究证实 ,糖尿病相关的胚胎先天性神经管缺陷的发生 ,与MAPKinase及细胞凋亡信号传导机制及其相关基因表达调控密切相关。先天性神经管缺陷的胚胎卵黄囊细胞中 ,磷酸化状态的ERK1/ 2活性显著降低 ,其上游的Raf 1蛋白表达及活性相应减弱 ;而磷酸化的JNK/SAPK1/ 2活性状态明显增强。同时出现细胞调亡特征性DNAladder ,凋亡相关基因caspase 3Bax明显高表达。脂质补充物和抗氧化剂的治疗可通过逆转MAPKinase及细胞凋亡信号传导途径 。
- 马向东
- 关键词：神经管缺陷信号传导糖尿病MAPKINASE妊娠合并症分子病因学
- 妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷动物模型的MAP激酶信号传导机制被引量：8
- 2004年
- 为了揭示妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的分子机制,并探讨其有效的防治方法。实验选用6个实验组的Sprague Dawley大鼠:第1组为常规饲养的正常对照组;第2组尾静脉注射65mg/kgStreptozotocin(STZ)构建妊娠合并糖尿病、且诱发先天性神经管缺陷的实验组大鼠;第3组为STZ构建的糖尿病、但胚胎不伴有先天性神经管缺陷的大鼠模型;第4、5、6组为STZ构建的糖尿病治疗组大鼠,每日分别给予80μg/mL花生四烯酸(arachidonicacid,AA)、400mg维生素E、抗氧化剂(维生素E)和不饱和脂肪酸(safloweroil)混合物cocktail治疗。于妊娠第12天取出各组胚胎,解剖显微镜下进行形态学分析;提取卵黄囊细胞蛋白质,应用特异性抗磷酸化抗体进行免疫共沉淀及Western印迹,对MAP激酶信号途径上各蛋白激酶ERK1/2、JNK1/2、RAF 1活性进行分析。与正常对照组相比,妊娠合并糖尿病诱发的先天性神经管缺陷胚胎中(第2组),ERK1/2蛋白激酶活性显著下降,其上游RAF 1活性相应降低;与此相反,JNK1/2活性明显升高。在给予花生四烯酸、维生素E补充物治疗后,通过调节MAP激酶信号通路蛋白激酶活性,逆转了胚胎神经管缺陷的发生。妊娠合并糖尿病诱发的胚胎先天性神经管缺陷的发生,与MAP激酶信号传导机制异常密切相关。
- 陈必良马向东辛晓燕王德堂E.Albert ReeceM.D.
- 关键词：神经管缺陷MAP激酶JNK/SAPKRAF-1动物模型
- 妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的MAP激酶及细胞凋亡信号传导机制被引量：19
- 2003年
- 目的 :探讨妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的分子机制。方法 :将雌性SD大鼠分为 3组 :第 1组为正常对照组 ;第 2组为streptozotocin (STZ)构建的妊娠合并糖尿病诱发先天性神经管缺陷的实验组 ;第 3组为STZ构建的糖尿病大鼠模型 ,胚胎不伴有先天性神经管缺陷。于妊娠第 1 2天取出各组胚胎 ,解剖显微镜下进行形态学分析 ;对卵黄囊细胞进行DNA片段分析 ;提取卵黄囊细胞蛋白质 ,应用特异性抗磷酸化抗体进行免疫共沉淀及Westernblot对MAPkinase(MAPK)信号途径上各蛋白激酶活性进行分析。结果 :第 2组中 ,卵黄囊细胞出现细胞凋亡特征性的DNAladder,与正常对照组相比ERK1 /2蛋白激酶活性显著下降 ;与此相反 ,JNK1 /2活性明显升高 ,凋亡相关基因caspase 3、Bax高表达 ,凋亡抑制基因AKT活性明显受抑。结论 :糖尿病诱发的胚胎先天性神经管缺陷的发生 。
- 马向东陈必良辛晓燕王德堂E.Albert Reece
- 关键词：妊娠神经管缺损糖尿病有丝分裂素激活蛋白激酶类细胞凋亡
- 妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷细胞凋亡信号转导的初步研究被引量：5
- 2005年
- 目的揭示妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的分子机制,并探讨其有效的防治途径。方法选用SD大鼠分6个实验组:第1组为正常对照组,第2组为应用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建的妊娠合并糖尿病大鼠模型并诱发胚胎先天性神经管缺陷的实验组大鼠,第3组为STZ构建的糖尿病大鼠模型且胚胎不伴有神经管缺陷;第4、5、6组为STZ构建的糖尿病治疗组大鼠,每日分别给予花生四烯酸(arachidonic acid,AA)、维生素E、cocktail(抗氧化剂维生素E和不饱和脂肪酸红花油safflower oil混合物)治疗。于妊娠第12天分别取出各组胚胎,形态学分析后对卵黄囊细胞进行DNA片段分析;应用特异性抗磷酸化抗体对细胞凋亡信号途径上各蛋白激酶、蛋白酶的活性进行分析。结果妊娠合并糖尿病诱发的先天性神经管缺陷胚胎(第2组)中卵黄囊细胞出现细胞凋亡特征性的DNA梯状电泳,与正常对照组相比,凋亡相关基因caspase-3、bax显著高表达,而凋亡抑制基因AKT活性明显受抑。经AA、维生素E补充物等治疗后,可抑制细胞凋亡信号通路蛋白激酶、蛋白酶的表达并逆转了胚胎神经管缺陷的发生。结论妊娠合并糖尿病诱发的胚胎先天性神经管缺陷的发生,与卵黄囊细胞凋亡信号传导途径的启动相关,不饱和脂肪酸和抗氧化剂补充物对神经管缺陷的预防和治疗作用可能通过对细胞凋亡信号途径的逆转而实现。
- 陈必良马向东马兴王德堂
- 关键词：神经管缺陷糖尿病细胞凋亡AKTCASPASE-3BAX
- 神经管缺陷大鼠模型胚胎形态学改变及PLA_2、COX-2表达被引量：1
- 2010年
- 目的:研究神经管缺陷大鼠模型胚胎形态学改变及PLA2、COX-2表达。方法:16只SD雌性大鼠分为2组:第一组为正常对照组,8只,受孕后正常饲养;第二组为糖尿病模型组,8只,受孕后第6天经过尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)构建先天性神经管缺陷组大鼠。妊娠12日后取出所有胚胎做HE染色观察胚胎形态学及免疫荧光染色的方法观察PLA2、COX-2表达。结果:(1)HE染色及免疫荧光发现糖尿病胚胎的神经管形态发育明显畸形(2)免疫荧光发现PLA2、COX-2糖尿病胚胎的表达明显降低。结论:PLA2、COX-2基因表达在SD大鼠神经管的发育过程中起着重要的作用。可能对临床治疗神经管畸形提供了一种新方法。
- 沈瑾马向东招明高张卫华李杨
- 关键词：神经管缺陷PLA2COX-2
- 胚胎神经管缺陷大鼠模型差异基因的表达被引量：2
- 2009年
- 通过构建妊娠合并糖尿病诱发先天性神经管缺陷的SD大鼠模型,与胚胎不伴有先天性神经管缺陷组大鼠和正常对照组大鼠胚胎进行研究,提取卵黄囊细胞的mRNA,cDNA基因芯片技术对表达差异基因进行检测,应用特异性抗磷酸化抗体进行免疫共沉淀及Western blotting,对卵黄囊细胞MAP Kinase信号途径蛋白激酶活性进行分析。在神经管缺陷大鼠胚胎卵黄囊细胞和对照组1200个基因中,共筛选出表达差异基因79个,其中42个基因表达上调、37个基因表达下调。同时发现神经管缺陷胚胎卵黄囊细胞出现细胞凋亡特征性的DNA ladder(梯状电泳),凋亡相关基因caspase-3、Bax高表达,凋亡抑制基因AKT活性明显受抑;与正常对照组相比ERK1/2蛋白激酶活性显著下降、JNK1/2活性明显升高。因此,认为妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的发生存在多种差异基因表达,以及MAP Kinase、凋亡信号传导机制的共同作用。
- 马向东马兴吴小明陈必良王德堂
- 关键词：神经管缺陷糖尿病MAPKINASE细胞凋亡
