国家自然科学基金(30870858) 作品数:3 被引量:9 H指数:2 相关作者: 姜宏 谢俊霞 宋宁 徐华敏 吕占云 更多>> 相关机构: 青岛大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省自然科学杰出青年基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Alpha-synuclein aggregation is involved in the iron toxicity to SK-N-SH neuroblastoma cells <正>Increased nigral iron levels and intracytoplasmic Lewy bodies(LBs) in the degenerating neurons are found in... Hong JIANG~*,Qing HE,Wen-Jing LI,Ning SONG,Jun-Xia XIE~* Department of Physiology,Shandong Provincial Key Laboratory of Pathogenesis and Prevention of Neurological Disorders and State Key Disciplines:Physiology,Medical College of Qingdao University,Qingdao 266071,China关键词:ALPHA-SYNUCLEIN IRON 文献传递 携带人alpha-突触核蛋白真核重组质粒构建及其SK-N-SH细胞表达 被引量:2 2010年 目的构建携带人alpha-突触核蛋白真核重组质粒,检测其在人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中的表达及对细胞存活率的影响。方法 PCR扩增alpha-突触核蛋白基因,产物纯化后与pcDNA3.1(+)载体进行连接反应,构建pcDNA3.1(+)/alpha-突触核蛋白真核重组质粒。Lipofectamine法转染人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,RT-PCR方法检测SK-N-SH细胞中alpha-突触核蛋白mRNA的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测其对细胞存活率的影响。结果酶切鉴定及基因测序证明人alpha-突触核蛋白基因已被完整、正确地插入到pcDNA3.1(+)载体中。RT-PCR结果显示该表达载体转染SK-N-SH细胞后,细胞内alpha-突触核蛋白mRNA的表达水平明显增高,MTT方法检测结果显示该表达载体转染并未引起细胞存活率的改变。结论 alpha-突触核蛋白真核重组质粒构建成功,并可在SK-N-SH细胞内表达,且对细胞的存活率不产生任何影响,从而为进一步研究alpha-突触核蛋白在帕金森病发病机制中的作用奠定了基础。 和青 杜婷婷 宋宁 谢俊霞 姜宏关键词:Α突触核蛋白 质粒 帕金森病 高铁饮食致C57BL/6小鼠黑质DA多巴胺能神经元选择性损伤的研究 被引量:6 2010年 目的研究高铁饮食对C57BL/6小鼠黑质(SN)和中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺能神经元的不同损伤。方法将C57BL/6小鼠随机分为高铁饮食组和正常对照组,利用免疫组织化学染色法及铁染色技术检测两组小鼠SN和VTA的酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数及铁水平的变化。结果高铁饮食组SN的TH阳性细胞数较正常对照组明显减少(t=16.31,P<0.001),铁染色阳性细胞数较对照组明显增高(t=13.01,P<0.001)。而两组小鼠VTA的TH阳性细胞数及铁染色阳性细胞数均无明显差别。结论铁在SN的选择性聚积参与了SN多巴胺能神经元的选择性损伤。 吕占云 姜宏 徐华敏 谢俊霞关键词:黑质 腹侧被盖区 神经元 酪氨酸单氧化酶 小鼠 铁离子对α-突触核蛋白聚集的诱发作用具有剂量和时间依赖性(英文) 被引量:1 2010年 目的帕金森氏病的一个重要标志是胞浆内路易小体的形成。路易小体的主要成分是α-突触核蛋白的聚集体,它和铁的积聚一同存在于黒质区。本实验旨在研究铁和α-突触核蛋白聚集的关系。方法 SK-N-SH细胞在不同浓度的三价铁作用下,分别孵育24h或48h,用MTT法和硫磺素S染色法分别检测细胞存活率、观察α-突触核蛋白的聚集情况。结果随着铁离子浓度的升高,细胞存活率显著下降。其中5mmol/L和10mmol/L三价铁引起的α-突触核蛋白的聚集相较于1mmol/L的三价铁引起的聚集更为严重。此外,在同一浓度的三价铁作用下,孵育48h引起的聚集比孵育24h引起的聚集更严重。结论铁离子诱发的α-突触核蛋白的聚集具有剂量和时间的依赖性,并且α-突触核蛋白的聚集介导了铁的毒性作用。 李文静 姜宏 宋宁 谢俊霞关键词:帕金森氏病 Α-突触核蛋白