国家自然科学基金(30970736)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：第二军医大学上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 共培养诱导骨髓间充质干细胞向睾丸间质细胞分化的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨共培养诱导骨髓问充质干细胞（BMSCs）向睾丸间质细胞（Lc）分化的可行性，为解决组织工程化雄激素分泌组织研究中种子细胞来源不足的问题提供有效手段。方法通过Ficoll液分离、贴壁后传代并富集3周大鼠的BMSCs，及以差速贴壁法获得的大鼠Lc。将两种细胞通过tran-swell培养皿的间接共培养作为实验组，单纯的LC及BMSCs培养组分别做阳性及阴性对照。4周后，各组BMSCs进行Lc的特异性指标免疫组化及RT-PCR检测。结果4周后，免疫组化显示，实验组部分BMSCs表达LC特异性标志物3B-HSD、LHR；RT-PCR检测stAR及3p-HSDmRNA呈阳性表达，而对照组呈阴性。结论通过体外共培养模拟LC生长的微环境，能够诱导BMSCs向LC方向上分化，在改善培养条件及提高诱导效率后，将可能为雄激素缺乏性疾病提供一条有前景的治疗途径。
- 周英晋邢新王晓云周广东杜红岩毕宏达肖斌
- 关键词：共培养骨髓间充质干细胞睾丸间质细胞
- 睾丸Leydig干细胞分离、纯化及鉴定的体外研究被引量：1
- 2011年
- 目的改进Leydig干细胞的分离及纯化方法,观察其生物学特性并进行鉴定。方法通过胶原酶消化、差速贴壁法及双抗体免疫磁珠分选法,从大鼠睾丸内获得Leydig干细胞。以条件培养液进行培养,采用CCK法测定增殖能力。通过PDGFRα、LIFR及3β-HSD免疫组织化学染色鉴定Leydig干细胞。经定向诱导分化后,检测Leydig细胞的睾酮分泌能力。结果每个睾丸约可获得83 000个干细胞,经免疫组织化学染色分析,PDGFRα阳性率为(98.0±0.8)%。在条件培养液中培养的SLCs增殖明显,在1个月内能稳定维持其干性而未向Leydig细胞系分化。免疫组织化学染色结果表明,PDGFRα、LIFR阳性表达,3β-HSD为阴性表达。Leydig干细胞在含有T3和HCG的培养液中培养后,第5天即可测到睾酮分泌,分化后的细胞3β-HSD+。结论由差速贴壁法及双抗体免疫磁珠分选法能获得纯化的PDGFRα+/LHR-细胞,这些细胞符合SLCs所必须具有的特征。采用该方法获取SLCs,操作简便,细胞损伤小并且获取纯度高。
- 肖斌王晓云周广东周英晋毕宏达朱吉张敬德邢新
- 关键词：细胞培养分化
