广东省自然科学基金(05300720)
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
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- 康士德治疗晚期前列腺癌临床分析
- 2008年
- 目的探讨康士德在晚期前列腺癌治疗中的疗效。方法晚期前列腺癌患者64例分为2组，其中康士德联合去势治疗46例为治疗组，单纯手术去势治疗18例为对照组，比较2组临床症状、血清前列腺特异性抗原（PSA）值、前列腺大小、肿瘤体积、生化复发时间以及病死率等。结果治疗组患者临床症状缓解率为82．6％，对照组为72．2％，2组比较有统计学意义；治疗组有34例（73．9％）的患者PSA下降到4.0ng/ml以下，而对照组只有5例（27．8％），2组比较有统计学意义；2组前列腺体积均下降，但组间比较无统计学意义；治疗组生化复发时间平均为22．6个月，生化复发率为34．8％，客观进展率为39．1％，而对照组生化复发时间平均为12．4个月，生化复发率为55．6％；客观进展率为50.0％，2组比较有统计学意义。结论康士德能明显减轻患者的临床症状及局部体征，是治疗晚期前列腺癌安全有效的药物。
- 黄海董文许可慰郭正辉江春韩金利姚友生谢文练黄健
- 关键词：前列腺癌内分泌治疗
- p65基因序列shRNA慢病毒载体构建及其作用功能的初步研究
- 2010年
- 目的 建立稳定阻断前列腺癌细胞株LNCaP中核因子NF-κB（p65）表达的shRNA序列,构建慢病毒载体,检测p65在前列腺癌细胞中的作用功能.方法 根据p65基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3针对p65基因cds区的siRNA序列,组建shRNA对应的4对互补单链DNA将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中转染前列腺癌细胞,采用RTPCR方法检测不同序列片断对p65 mRNA的抑制效率,免疫印迹方法检测其对p65蛋白表达的抑制效率.将获得的慢病毒载体感染LNCaP细胞,设对照组、空转组.采用MTT、流式细胞术、Transwell等方法检测p65的生物学作用.结果 设计的3条针对p65序列中,第3条序列对前列腺癌细胞株中p65 mRNA的干扰效率为59%,对蛋白表达的抑制率达81%.目的序列位于p65（NM_021975）的1096～1113,茎环序列为5＇-GATCC GCCCTATCCCTTTACGTCATTCAAGAGAT-GACGTAAAGGGATAGGGCTTTTTG-3＇.转染细胞后,细胞可以稳定低表达p65.MTT检测实验组细胞96 h内未出现对数增殖,生长能力低于对照组和空转组.流式细胞检测实验组G0～G1期细胞百分率为61.49%,高于对照组的44.89%和空转组的41.52%;而S期细胞百分率为28.58%,低于对照组的47.36%和空转组的46.10%,差异有统计学意义（P＜0.05）.Transwell检测实验组透过细胞数为（16.5000±6.62076）个,低于对照组和空转组[（45.6333±13.54159）个,（36.8333±5.68412）个],差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 成功获得稳定阻断前列腺癌细胞株LNCaP中p65表达的shRNA序列,并构建慢病毒载体;初步验证了p65在前列腺癌细胞增殖、侵袭和转移中的促进作用.
- 黄海杜涛黄健林天歆张彩霞董文尹心宝郭正辉许可慰江春韩金利
- 关键词：前列腺肿瘤核因子ΚB
- 稳定阻断前列腺癌细胞中p65的shRNA基因序列的获得及蔓病毒载体的构建
- 2010年
- 目的 获得稳定阻断前列腺癌细胞株Lncap中核因子[NF-κB（p65）]表达的shRNA序列,并构建蔓病毒载体.方法 根据p65基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3 3条针对p65基因cds区的siRNA序列,组建shRNA对应的4对互补的单链DNA,包括siRNA的正义链和反义链;正义链序列按5＇向3＇顺序依次为：酶切位点（BamH Ⅰ）、干扰序列（19bp）、loop环（TTCAAGAGA）、干扰序列的反向互补序列（19 bp）、中止信号（TTTTT）、酶切位点（EcoR Ⅰ）.将合成的序列插入空载体pSI H1-H1-copGFP shRNA Vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real-time聚合酶链反应（PCR）检测不同序列片段对p65的mRNA抑制效果,通过Western blot检测对p65蛋白表达的抑制效果.从而获得可以稳定高效抑制前列腺癌细胞中p65表达的shRNA序列.结果 设计的3条针对p65的序列中第3条的抑制效果最好,目的序列位于p65（NM_021975）的1096～1113,茎环序列为5＇-GATCC GCCCTATCCCTTTACGTCA TTCAAGAGA TGACGTAAAGGGATAGGGC TTTTT G-3＇.其对前列腺癌细胞株中p65的mRNA的干扰效率为59%,对其蛋白表达的抑制率为81%.转染细胞后,细胞可以稳定低表达p65.结论 成功获得稳定阻断前列腺癌细胞株Lncap中p65表达的shRNA序列,并构建蔓病毒载体.
- 郭正辉黄海杜涛林天歆李海源许可慰宁志丰江春韩金利黄健
- 关键词：核因子前列腺癌RNA干扰
- 靶向于前列腺癌特异性膜抗原shRNA的筛选与鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中前列腺癌特异性膜抗原（PSMA）表达的shRNA序列。方法根据PSMA基因信息，设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对PSMA基因cds区的siRNA序列及无意义的对照序列，组建与之对应的4对互补的单链DNA序列，包括siRNA的正义链和反义链；正义链序列按5’向3’顺序依次为：酶切位点（BamHⅠ）、干扰序列（19bp）、loop环（TTCAAGAGA）、干扰序列的反向互补序列（19bp）、中止信号（TTTTT）、酶切位点（EcoRⅠ）。将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中，转染前列腺癌细胞后，通过real-time PCR检测不同序列片段对PSMA的mRNA抑制效果并通过Western blot检测对目的蛋白PSMA的抑制效果。结果设计的3条针对PSMA的序列中第2条的抑制效果最好，目的序列位于PSMA（NM_0004476）的1207到1226，茎环序列为5’-GATCC GTCTCAAAGTGCCCTACAA TTCAAGAGA TFGTAGGGCACTTTGAGAC TTTTT G-3’。其对前列腺癌细胞株中PSMA的mRNA的抑制率为60．0％，对其蛋白表达的抑制率为86％。转染细胞后，细胞可以稳定低表达PSMA。结论成功获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中PSMA表达的shRNA序列。
- 郭正辉黄海杜涛许可慰林天歆曾乐祥江春韩金利黄健
- 关键词：前列腺癌RNA干扰抗原
