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河北省医学科学研究重点课题(20120166)
作品数:
3
被引量:21
H指数:2
相关作者:
张弘
杨植
高建国
杜建青
姜海军
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相关机构:
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杨植
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张弘
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莪术醇对胃癌SGC7901细胞凋亡及AIF、Endo G表达的影响
被引量:17
2015年
[目的]观察莪术醇对胃癌细胞株SGC7901细胞凋亡及凋亡诱导因子(AIF)和核酸内切酶G(Endo G)表达的影响,探讨其作用机制。[方法]对体外培养的SGC7901细胞,分别加入不同浓度的莪术醇处理,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot方法检测AIF、Endo G蛋白的表达水平。利用Caspase-3抑制剂ZVAD-FMK进一步确定AIF和Endo G在莪术醇抑制胃癌SGC7901细胞凋亡的机制。[结果 ]莪术醇能显著抑制SGC7901细胞增殖;与对照组比较,莪术醇组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),AIF、Endo G蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与对照组比较,同时给予莪术醇和ZVAD-FMK组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),AIF、Endo G蛋白表达明显升高(P<0.01);但与莪术醇组比较无显著差异。[结论]莪术醇可上调AIF、Endo G表达,通过非Caspase依赖通路诱导胃癌SGC7901细胞凋亡。
张弘
张连荣
姜海军
高建国
杜建青
杨植
关键词:
莪术醇
细胞凋亡
凋亡诱导因子
核酸内切酶G
莪术醇对胃癌细胞凋亡的影响及机制研究
被引量:2
2013年
目的观察莪术醇对胃癌细胞株BGC823细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养BGC823细胞,分别加入12.5、25、50、100mg/L莪术醇培养液,对照组加入10ml/L无水乙醇培养液,分别孵育24h和48h,采用M_rr法分析增殖率;应用流式细胞仪检测各浓度莪术醇处理BGC823细胞48h的凋亡率及细胞周期的分布;分光光度法检测Caspase-3活性;100mg/L莪术醇孵育BGC823细胞48h后,用RT—PCR和Westernblot法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax和SurvivinmRNA和蛋白的表达水平。结果莪术醇抑制BGC823细胞增殖,并且随浓度的增加和时间的延长而加强;不同浓度莪术醇处理BGC823细胞,均使处于G。/G,期的细胞显著增加,s期细胞明显减少(P〈0.05);细胞凋亡率随莪术醇浓度增加而升高(P〈0.05);Caspase-3活性呈浓度依赖性增加(P〈0.05);100mg/L莪术醇孵育BGC823细胞48h后,Caspase-3、Bax表达均显著升高(P〈0.05),Survivin、Bcl-2表达均显著下降(P〈0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低(P〈0.05)。结论莪术醇对胃癌BGC823细胞生长具有抑制作用,阻滞细胞周期于G。/G.期,并促进其凋亡。其作用与增强Caspase-3的活性,上调Caspase-3、Bax表达,下调Survivin、Bcl-2表达及降低Bcl-2/Bax比值有关。
张弘
张连荣
姜海军
高建国
杜建青
杨植
关键词:
胃肿瘤
细胞凋亡
细胞增殖
细胞周期
莪术醇对人胃癌细胞株BGC823增殖的影响及其机制
被引量:3
2015年
目的观察莪术醇对人胃癌细胞株BGC823细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养BGC823细胞,分别加入12.5、25.0、50.0、100.0mg/L莪术醇,对照组加入10ml/L无水乙醇,分别孵育24、48h。采用噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验分析莪术醇对BGC823细胞增殖的影响。流式细胞术测定细胞周期的变化。100mg/L莪术醇孵育BGC823细胞48h后,收集细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和p16mRNA的表达,Westernblot测定PCNA、CyclinD1、CDK4和p16蛋白的表达水平。结果MTT结果显示,莪术醇剂量和时间依赖性抑制BGC823细胞增殖,莪术醇为12.5、25.0、50.0、100.0mg/L时对BGC823细胞抑制率在24h分别为(13.59±2.74)%、(22.51±4.62)%、(46.09±6.14)%、(73.67±8.24)%,在48h分别为(15.02±2.26)%、(25.31±4.79)%、(53.62±6.37)%、(82.14±9.65)%;克隆形成实验结果显示,莪术醇具有剂量依赖性抑制BGC823细胞克隆形成率的能力,莪术醇为12.5、25.0、50.0、100.0mg/L作用14d时BGC823细胞克隆形成率为(0.88±0.14)%、(0.57±0.09)%、(0.36±0.06)%、(0.11±0.02)%;流式细胞结果显示,莪术醇处理48h后,G0/G1期的细胞均显著增加,S期细胞明显减少,且随浓度增高变化更为明显(P〈0.05);RT-PCR和Westernblot结果显示,100mg/L莪术醇孵育BGC823细胞48h后,PCNA和CyclinD、CDK4mRNA和蛋白表达显著下降,p16mRNA和蛋白表达显著上升(P〈0.05)。PCNA、CyclinD1、CDK4、p16的mRNA在对照组相对表达量为0.64±0.16、0.57±0.12、0.46±0.06、0.26±0.04,在莪术醇组为0.31±0.07、0.19±0.05、0.15±0.04、0.59±0.09;各指标蛋白的相对表达量在对照组为0�
张弘
张连荣
姜海军
高建国
杜建青
杨植
关键词:
莪术醇
胃癌
增殖
细胞周期
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