天津市自然科学基金(043606711)
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
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- 基于分子杂交和单分子PCR的同源基因克隆技术
- 2006年
- 文章以拟南芥谷胱甘肽-S-转移酶Zeta类(GSTZ)基因为饵基因,建立了一种基于分子杂交和单分子PCR的同源基因克隆新方法。获得的6个甘蓝型油菜GSTZ全长cDNA克隆中,有5个与GenBank注册序列(AY208158)完全相同。
- 陈喜文刘晓光陈德富陈飞雪
- 关键词：同源克隆全长CDNA分子杂交
- 糖化酶工业株的鉴定及糖化酶基因的克隆被引量：1
- 2007年
- 对4种糖化酶工业株的rDNA片段进行克隆,在对比其rDNA-ITS1序列与GenBank数据库的基础上,结合形态学观察对菌株进行了鉴定。结果显示,4种菌株分别为黑曲霉、无花果曲霉、米曲霉和灰色小克银汉霉。通过Me-gAlign得到的进化树表明,前3种菌株亲缘关系较近,三者与灰色小克银汉霉的亲缘关系较远。进一步克隆了黑曲霉、无花果曲霉和米曲霉的糖化酶基因,并在毕赤酵母中实现了分泌表达。
- 马丽娜陈喜文陈德富
- 关键词：进化树曲霉糖化酶毕赤酵母
- 曲霉属糖化酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：8
- 2007年
- 从黑曲霉、无花果曲霉、米曲霉中提取总 RNA,RT-PCR 分别获得其糖化酶基因,所得序列在 Gen-Bank 数据库中注册,注册号分别为 AY652617、AY642120和 DQ211971.BLAST 分析显示,克隆的曲霉属糖化酶基因与 GenBank 数据库相应序列同源性很高.将这些糖化酶基因与表达载体 pPIC9重组后,电转化进毕赤酵母株 GS115,均获得了分泌表达糖化酶的酵母工程菌株.甲醇诱导72 h 后,糖化酶的分泌量达到最高,分别为(11.6±0.2)、(12.4±0.2)和(10.0±0.2)U/mL.SDS-PAGE 显示,分泌表达的糖化酶分子量均约为80 kDa.
- 马丽娜陈喜文陈德富王绘砖宋嵘
- 关键词：糖化酶分泌表达曲霉属毕赤酵母
