江苏省自然科学基金(BK2010230)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
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- 相关机构：郑州大学苏州大学附属第二医院更多>>
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- 新候选肿瘤抑制基因溶质载体8号家族中的2号成员基因对胶质瘤细胞株U87的侵袭迁移能力和裸鼠致瘤性的影响被引量：4
- 2013年
- 目的 探讨溶质载体8号家族中的2号成员基因（SLC8A2）对胶质瘤细胞U87的迁移侵袭能力和裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 构建稳定表达SLC8A2基因的U87-SLC8A2细胞株（实验组）和稳定表达GFP的U87-NC细胞株（阴性对照组）.Transwell小室及预铺50μl Matrigel基质胶的Transwell小室检测SLC8A2对U87细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染该基因后肿瘤细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9及MT1-MMP转录水平的变化,明胶酶谱法检测分泌至细胞培养基中MMP-2酶活性的变化；裸鼠皮下移植瘤实验（5只/组）检测SLC8A2对U87细胞致瘤性的影响.结果 U87-NC和U87-SLC8A2穿过Transwell小室基膜的细胞数分别为（279.70±17.50）个及（4.30±0.58）个,而穿过预铺Matrigel基质胶的Transwell小室基膜的细胞数分别为（274.0±21.3）个和（12.7±1.2）个,差异有统计学意义（P＜0.01）；与U87-NC比较,U87-SLC8A2细胞中MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MTl-MMP的转录水平分别下降了（55.4±3.2）％、（78.7±5.3）％、（79.7±4.6）％、（53.9±3.2）％及（70.9±4.4）％（P＜0.01）,且U87-SLC8A2细胞分泌的MMP-2酶活性较U87-NC下降了（93.2±5.1）％（P＜0.01）；接种U87-SLC8A2细胞的裸鼠全都不致瘤,而接种对照组细胞的裸鼠全部致瘤成功.结论 SLC8A2可下调MMP的活性而抑制胶质瘤细胞U87的侵袭迁移能力,并能显著抑制U87细胞在裸鼠体内的生长及增殖.
- 余聚屈鸣麒刘泓渊兰青步星耀
- 关键词：致瘤性
- 乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在胶质瘤细胞株U87、U251中表达沉默的表观遗传学机制被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂基因（maspin）在人胶质瘤细胞株U87、U251中沉默与表观遗传学关系.方法 运用逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）、Western blot检测maspin基因在U87、U251的表达.甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）测定maspin基因启动子区区域甲基化状态.同时运用亚硫酸氢盐测序法（BSP）检测maspin基因启动子区甲基化CpG位点.RT-PCR检测12 μmol/L 5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-DC）和/或500 nmol/L曲古霉素（TSA）、15 μmol/L 5-Aza-DC/或500 nmol/L TSA分别处理U87、U251后,maspin基因mRNA表达水平.结果 在胶质瘤细胞株U87、U251中maspin基因表达沉默.maspin基因启动子CpG位点处于甲基化状态.RT-PCR结果显示,未处理组、5-Aza-DC、TSA、5-Aza-DC和TSA分别处理U87后,maspin mRNA相对表达量分别为：0.001 2±0.000 1 、0.0303 ±0.0006、0.019 6±0.001 6、0.052 6 ±0.003 4；未处理组和5-Aza-DC、TSA、5-Aza-DC和TSA分别处理U251后,maspin mRNA相对表达量分别为：0.002 2±0.0030、0.0122±0.0008、0.0249±0.0012、0.038 4±0.003 1.表明5-Aza-DC和/或TSA能恢复U87、U251中maspin基因表达（P＜0.01）.结论 maspin在胶质瘤中的表达抑制与其启动子CpG岛甲基化及组蛋白去乙酰化相关,5-Aza-DC和/或TSA能恢复maspin在胶质瘤细株U87、U251中的转录.
- 刘泓渊屈鸣麒余聚兰青步星耀
- 关键词：胶质瘤组蛋白乙酰化
