国家自然科学基金(3989329022)
- 作品数:5 被引量:22H指数:4
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- IBV青岛腺胃分离株S1纤突蛋白基因的克隆与鉴定被引量:2
- 2000年
- 参考Genebank发表的传染性支气管炎病毒 (IBV)S1纤突蛋白基因序列 ,自行设计合成了 1对引物 ,对IBV青岛腺胃分离株 (SD/97/0 2 )RNA进行RT PCR扩增。产物经琼脂糖凝胶电泳分析 ,呈现 1条 16 5 7bp的条带 ,将其克隆入pMD18 T载体中 ,并进行序列测定 ,证实为S1基因。将此重组质粒命名为pMDQXS1。
- 潘杰彦陈德胜戴亚斌陈溥言
- 关键词:鸡传染性支气管炎病毒基因克隆
- 传染性支气管炎病毒腺胃青岛株(SD/97/02)核衣壳蛋白基因的克隆与鉴定被引量:5
- 2000年
- 潘杰彦陈德胜王忠田陈溥言蔡宝祥
- 关键词:核衣壳蛋白基因
- 传染性支气管炎病毒地方分离毒株S1基因的RT-PCR方法研究被引量:6
- 2000年
- 以传染性支气管炎病毒 (IBV)标准毒株M41为材料 ,根据Genbank公开序列自行合成一对特异引物 ,用于扩增IBV的完整S1基因。建立了针对IBV基因组RNA特点的RT PCR方法。对反应体系中的重要反应物Mg2 +、dNTP和引物浓度进行优化 ,确定其浓度值分别为 1 5mmol/L ,2 0 0 μmol/L和 40 μmol/L。使用此反应体系对国内IBV地方分离毒株JS/95 / 0 3 ,SD/ 97/ 0 1等 10多个毒株的S1基因进行扩增 ,均扩增出预期 1 7kb的完整S1基因 。
- 陈德胜潘杰彦贾立群戴亚斌蔡宝祥陈溥言
- 关键词:传染性支气管炎病毒地方分离株S1基因
- 传染性支气管炎病毒纤突蛋白S1基因的T/A载体克隆策略被引量:6
- 2000年
- 参考Genbank收录的IBV纤突蛋白 (S1)基因序列 ,自行设计合成一对引物 ,对传染性支气管炎病毒 (IBV)江苏省地方分离毒株 (JS/95/0 3)RNA进行RT PCR扩增 ,产物经琼脂糖凝胶电泳分析 ,呈现一条 1716bp的条带 ,将其克隆入T/A质粒pMD18 T载体中 ,转化大肠杆菌JM10 9,挑选阳性克隆 ,用质粒少量提取法提取重组质粒 ,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切对重组克隆质粒进行鉴定 ,然后进行序列测定 ,证实为S1基因。将此重组质粒命名为pMDJS950 3S。
- 陈德胜潘杰彦戴亚斌蔡宝祥陈溥言
- 关键词:传染性支气管炎病毒S1基因基因克隆
- 传染性支气管炎病毒江苏分离株核蛋白基因序列测定与同源性分析被引量:6
- 2001年
- 将本室鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)江苏省地方分离肾型毒株JS/ 95 / 0 3接种鸡胚 ,分离、纯化病毒 ,提取单股RNA做为反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)的扩增模板。用Genbank公开序列多重比较后设计一对引物 ,使用单管RT PCR方法 ,特异扩增IBV核蛋白 (N)基因 5’端 85 4bp的片段。扩增产物纯化后测序 ,序列分析表明 ,IBVN基因也存在较大变异 ,此毒株与呼吸型疫苗株M
- 陈德胜潘杰彦贾立群蔡宝祥陈溥言
- 关键词:传染性支气管炎病毒N基因冠状病毒