国家自然科学基金(81270593)
- 作品数：11 被引量：49H指数：4
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- 相关机构：苏州大学南阳市中心医院南京医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 流式微球法检测vWF活性及其在评估脑卒中预后中的应用被引量：2
- 2019年
- 目的:建立流式微球技术(FCIA)检测血浆血管性血友病因子活性(vWF:GPIbR)的方法,及其在缺血性脑卒中(IS)预后评估的应用。方法:包被抗人血小板糖蛋白Ibα(GPIbα)单克隆抗体SZ151 IgG的微球与重组GPIbα孵育,加入待检血浆和瑞斯托霉素,最终与FITC标记的绵羊抗人vWF IgG多抗反应,上流式细胞仪检测。联合应用vWF抗原(vWF:Ag)、vWF:GPIbR活性和vWF胶原结合活性(vWF:CB)检测,分析脑卒中患者的v WF状态。结果:流式微球法批内差异和批间差异分别为7.7%和13.5%;其与经典的ELISA法有较好的相关性(r=0.813,P <0.001),两种方法的偏倚为9.95%。与ELISA法相比,流式微球法有更高的特异度和准确度(P<0.05)。脑卒中患者vWF:Ag、vWF:GPIbR和vWF:CB水平显著高于正常对照组(H值分别为7.8、6.4、6.2)(P<0.001)。脑卒中患者vWF:GPIbR与vWF:Ag、超敏CRP、Autar评分和住院天数呈较好的正相关。结论:流式微球技术检测血浆vWF:GPIbR简单可靠,特异度高,准确性好。v WF:GPIbR参与了脑卒中的发生,并能够用于预测脑卒中患者的血栓形成风险,评估预后。
- 闫彬闫彬何杨陆士奇王琪王琪赵益明
- 关键词：流式微球技术血管性血友病因子血管性血友病脑卒中
- 血小板新型活化受体CLEC-2和平足蛋白在肿瘤转移中的研究进展被引量：4
- 2017年
- 平足蛋白(podoplanin,PDPN)是广泛表达在多种肿瘤细胞中的Ⅰ型跨膜糖蛋白。C型凝集素受体2(C-type lectin-like receptor-2,CLEC-2)属于Ⅱ型跨膜糖蛋白,是近年来发现的一种新型血小板表面活化受体,是PDPN的内源性受体,两者结合后可引起血小板活化聚集。聚集的血小板调节肿瘤细胞黏附到血管壁,逃避宿主免疫攻击,并释放一系列促进肿瘤细胞生长和转移的活性物质,从而形成新的转移灶,提示PDPN和CLEC-2可成为治疗肿瘤转移的新靶点。本文主要讨论了这两个靶点促进肿瘤转移的机制,并对其最近治疗进展加以总结和期望。
- 徐梦乔赵益明
- 关键词：肿瘤转移血小板
- 红细胞分布宽度对食管癌的预测价值被引量：10
- 2018年
- 目的探讨红细胞分布宽度(RDW)对食管癌(EC)患者的临床预测价值。方法选取本院2014年1月-2016年9月124例诊断为食管癌的患者作为疾病组,并选取同期来院体检的150例健康者作为对照组。收集2组对象的一般人口学数据和临床资料,并抽取外周血检测血常规、生化等指标。结果疾病组RDW、NLR、hs-CRP、PDW和PLR水平高于对照组,疾病组Hb、LDL、白蛋白和前白蛋白水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),而其他指标在2组间差异无统计学意义(P>0.05)。RDW对EC诊断的ROC曲线下面积(AUC)为0.782。非条件Logistic回归分析显示,RDW可作为EC的独立预测指标(OR=2.006,95%CI:1.523~2.698,P=0.01)。结论高水平的RDW与食管癌的发生相关,且是食管癌的一个预测因子,RDW检测对于预测EC具有一定的临床价值。
- 徐梦乔闫彬李翔翔王琪阮长耿赵益明
- 关键词：食管癌红细胞分布宽度
- 血管性血友病因子与肝脏疾病关系的研究进展被引量：6
- 2018年
- 肝脏疾病是指由各种原因导致的急慢性肝脏病变。肝脏疾病患者由于受到病毒性肝炎、细菌衍生物、内毒素等多种因素的刺激，导致血管内皮细胞活化和损伤。血管性血友病因子（VWF）作为血管内皮细胞功能的特异性标志物，其在肝脏疾病的发生、发展过程中也发挥着重要的作用。现就VWF与肝脏疾病关系的研究进展进行综述。
- 王琪赵益明
- 关键词：肝脏疾病血管内皮
- 血管性血友病因子在缺血性脑卒中防治中的研究进展被引量：1
- 2019年
- 血管性血友病因子(von Willebrand factor,VWF)主要是由内皮细胞产生的多聚体糖蛋白,能够调节高剪切力下的血栓形成,被称为沟通血小板和内皮下胶原的桥梁.研究发现,缺血性脑卒中患者体内存在VWF的异常,并且VWF在评估脑卒中的预测、治疗和预后中显示出独特意义.众多基础和临床证据表明VWF是缺血性脑卒中防治的潜在靶点.近年来,VWF在缺血性脑卒中防治中的研究获得了快速发展,文中就这一领域的发现做一综述.
- 闫彬陆士奇赵益明
- 关键词：血管性血友病因子卒中靶点
- 免疫亲和质谱技术鉴定抗血管性血友病因子单克隆抗体SZ-125的抗原表位被引量：4
- 2013年
- 目的应用免疫亲和分离与质谱分析技术,结合合成肽法和氨基酸定点诱变技术,鉴定抗血管性血友病因子(vWF)单克隆抗体(mAb)SZ-125的抗原表位。方法采用胰蛋白酶水解vWF A3区蛋白,产生一系列肽段,利用固定在琼脂糖珠上的SZ-125与其发生免疫亲和反应。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对抗原决定簇肽段-抗体复合物进行分析。用人工合成分析得到的氨基酸序列并对其中的重要氨基酸位点进行了原位点突变。合成蛋白及突变蛋白均验证了其与抗体SZ-125间的结合力。结果与SZ-125结合部位即连续表位的肽段为1001EGGPSQIGDALGFAVR1016。免疫分析证实,合成肽段NH2-EGGPSQIGDALGFAVR-COOH可以与SZ-125结合。进一步通过定点诱变技术,分析得到决定抗原-抗体结合的关键氨基酸为E1001、F1013、V1015、R1016。结论运用免疫亲和质谱、肽段合成、氨基酸定点突变等手段,精确定位了mAbSZ-125所结合的具体氨基酸位点。
- 李雪美王富强沈飞赵益明江淼
- 关键词：单克隆抗体血管性血友病因子抗原表位质谱分析
- 流式微球技术检测血浆vWF抗原方法的建立及其临床应用被引量：1
- 2020年
- 目的:建立流式微球技术(FCIA)检测血浆vWF抗原(vWF:Ag)的方法,探索其在预测缺血性脑卒中患者长期预后中的价值。方法:包被抗人vWF单克隆抗体SZ29 IgG的微球捕获血浆vWF,再与FITC标记的绵羊抗人vWF IgG多克隆抗体孵育,结束后在流式细胞仪上检测分析。21例血管性血友病患者和105例健康对照者用FCIA法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)同时检测血浆vWF:Ag,进行方法学间的评估。应用FCIA法检测61例脑卒中患者的初诊vWF:Ag水平,随访2年预后情况。结果:FCIA法检测血浆vWF:Ag的标准曲线拟合较好(R2=0.99),与ELISA的差异无统计学意义。经Bland-Altman一致性检验,2种方法的偏倚为1.12%,95%一致性界限为(-45.06%,47.30%);经线性回归分析,FCIA法与ELISA法有较好的相关性(斜率=0.97,r=0.86,P<0.0001),且耗时短、灵敏度更高。与对照组相比,脑卒中患者的vWF:Ag、vWF:GPIbR和vWF胶原结合活性显著升高(Z值分别为8.36、8.71、6.22,P<0.01)。vWF:Ag与改良Barthel指数评分呈负相关(r=-0.31,P<0.05),与改良Rankin评分无相关性。结论:流式微球技术检测vWF:Ag不仅是ELISA法的有效补充,且快速灵敏,提高了对3型血管性血友病的诊断。脑卒中患者vWF:Ag水平升高预示着2年的日常活动能力恢复差,长期预后不良。
- 闫彬闫彬何杨曲乐徐梦乔王琪王琪赵益明
- 关键词：流式微球技术血管性血友病因子血管性血友病脑卒中
- 血管性血友病因子与脑血管疾病关系的研究进展被引量：4
- 2014年
- 脑血管疾病（cerebrovasculardisease，CVD）是指由各种原因导致的急慢性脑血管病变，其中血管壁受损是其最主要的病因。血管性血友病因子（vwF）作为血管内皮细胞功能的特异性标志物，其在CVD的发生、发展过程中也发挥着重要的作用。本文将就vWF与CVD关系的研究进展进行综述。
- 曲乐赵益明
- 关键词：血管内皮功能紊乱
- 血管性血友病因子与急性心肌梗死关系的研究进展被引量：12
- 2017年
- 血管性血友病因子（von Willebrand factor,VWF）是一种主要由血管内皮细胞产生的多聚体糖蛋白,是评估出血和血栓状态的风险因子.在高剪切力环境下,VWF参与血小板的黏附和聚集,并引发血栓形成.急性心肌梗死（acutemyocardial infarction,AMI）是一种以动脉粥样硬化斑块破裂诱发血栓形成,进而使冠状动脉闭塞而发生心肌缺血为病理特征的血栓栓塞性疾病.2015年的统计显示,
- 闫彬赵益明
- 关键词：血管性血友病因子急性心肌梗死动脉粥样硬化斑块破裂血栓栓塞性疾病冠状动脉闭塞
- UNC5B单克隆抗体的制备及对黑素瘤细胞体外迁移能力的影响被引量：1
- 2015年
- 目的制备非协调性分子5同源蛋白B(UNC5B)的单克隆抗体(mAb),分析其功能。方法将UNC5B基因片段与原核表达载体pET-32a连接,连接产物转化大肠杆菌BL21(DE3),进行原核诱导表达并纯化重组蛋白。用UNC5B重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术筛选可稳定分泌抗UNC5B的杂交瘤细胞株,并用Western blot法、ELISA和流式细胞术鉴定。利用细胞划痕实验观察UNC5BmAb对黑素瘤细胞迁移能力的影响。结果表达并纯化了UNC5B重组蛋白;筛选出1株高效价的2C9mAb,通过ELISA、Western blot法和流式细胞术证实该m Ab特异性识别UNC5B;划痕实验证明在netrin-1存在的条件下,UNC5BmAb可促进黑素瘤细胞迁移。结论成功制备了UNC5B的特异性m Ab,在netrin-1存在时,该抗体可促进黑素瘤细胞迁移。
- 左元玲杨剑峰何杨赵益明
- 关键词：蛋白纯化单克隆抗体细胞迁移
