河南省医学科技攻关计划项目(200702015)
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 相关作者:石瑞如张国龙张健源李传友孙照刚更多>>
- 相关机构:河南省胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所更多>>
- 发文基金:河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 高效液相色谱法检测结核分枝杆菌链霉素耐药基因突变被引量:4
- 2008年
- 目的采用变性高效液相色谱(DHPLC)法和测序法来分析结核分枝杆菌链霉素耐药基因rpsL和rrs基因突变,从而检测是否对链霉素耐药。方法215株结核分枝杆菌临床分离株(经常规方法证实,115株为链霉素耐药,100株为敏感),测定链霉素最小抑菌浓度(MIC),同时采用DHPLC和测序法检测rpsL和rrs基因突变。结果85.2%(98/115)的链霉素耐药株携有rpsL和(或)rrs基因突变,其中rpsL基因突变占大多数(76.5%,88/115)。对98株带有基因突变的菌株的分析表明,rpsL,rrs基因的突变类型与MIC之间未见密切关系。100株敏感株未检出基因突变。DHPLC法与测序法结果完全一致。结论本工作建立的DHPLC法可以认为是结核分枝杆菌链霉素耐药分析的一种有效的工具。
- 石瑞如张健源苑雪芹孙照刚李传友
- 关键词:微生物敏感性试验
- 异源双链分析法快速检测结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药性
- 2010年
- 目的采用变性高效液相色谱(DHPLC)和Surveyor酶法分析结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药基因gyrA突变,探讨这两种异源双链分析法在结核菌耐药快速检测中的应用价值。方法 102株结核分枝杆菌临床分离株(常规药敏试验显示80株氧氟沙星耐药,22株敏感),PCR扩增gyrA基因氟喹诺酮类耐药决定区域,与参照菌株M.tbErdman的扩增产物形成异源双链,然后分别采用DHPLC和Surveyor酶法检测基因突变,同时进行DNA测序作为对照。结果 DHPLC法和Surveyor酶法与DNA测序法相比,具有同样的检出率(均为100%),80株耐药株均存在gyrA基因突变,而22株敏感株均无基因突变发生。结论 DHPLC法和Surveyor酶法均可用来快速检测结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药。两者均简便,稳定,灵敏,前者高通量,全自动化,但需要昂贵的设备;后者成本低,不需要特殊设备,适合我国大部分临床实验室开展。
- 王伟石瑞如张国龙付光宇彭义利苑星
- 关键词:基因突变核酸酶分枝杆菌结核
- DHPLC法和测序法检测结核分枝杆菌临床分离株链霉素的耐药性
- 2011年
- 目的我国是WHO认定的结核病高发区域之一。链霉素在我国已经使用50年以上,现在在结核病治疗中仍广泛使用。本工作采用变性高效液相色谱(DHPLC)法和测序法来分析结核分枝杆菌链霉素耐药基因rpsL和rrs基因突变,从而检测是否对链霉素耐药。方法215株结核分枝杆菌临床分离株(经常规方法证实,115株为链霉素耐药,100株为敏感),测定链霉素最小抑菌浓度(MIC),同时采用DHPLC和测序法检测rpsL和rrs基因突变。结果85.2%(98/115)的链霉素耐药株携有rpsL或/和rrs基因突变,其中rpsL基因突变占大多数(76.5%,88/115)。对98株带有基因突变的菌株的分析表明,rpsL,rrs基因的突变类型与MIC之间未见密切关系。100株敏感株未检出基因突变。DHPLC法与测序法结果完全一致。结论本工作建立的DHPLC法可以认为是结核分枝杆菌链霉素耐药分析的一种有效的工具。
- 孙芳赵玉玲王子玲苏振修赫金平石瑞如张国龙
- 关键词:结核分枝杆菌DHPLCRPSL