国家教育部博士点基金(20124433110010)
- 作品数：3 被引量：15H指数：3
- 相关作者：李国新朱显军叶耿泰沈智勇刘浩更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院更多>>
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- CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制被引量：4
- 2015年
- 目的检测胶原三股螺旋重叠蛋白(CTHRC1)在结直肠癌组织及细胞中的表达,探讨CTHRC1对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。方法应用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRC1在结直肠癌组织和5株结直肠癌细胞的表达;将靶向作用于CTHRC1的sh RNA和NC转染进LOVO细胞;CCK-8、Transwell、平板克隆检测细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。Western blotting检测转染后CTHRC1、ERK1/2、P-ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-catenin表达的变化。结果与正常黏膜组织相比,20例癌组织中的CTHRC1 m RNA的平均表达量为0.0411±0.054,显著高于正常黏膜组织P=0.016,蛋白水平的结果与之一致;同时,CTHRC1在SW620和LOVO细胞里的表达(m RNA水平和蛋白水平)均显著高于HT29细胞株;较之对照组,CTHRC1敲低组抑制了LOVO细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,差异均具有统计学意义P<0.05。当CTHRC1在m RNA和蛋白水平的表达均被明显抑制时,总ERK1/2在保持基本不变的的前提下,P-ERK1/2明显降低,EMT出现逆转(即MET,E-cadherin升高,N-cadherin、Vimentin、β-catenin降低)。结论 CTHRC1在结直肠癌组织及高转移潜能的人结直肠癌细胞株SW620和LOVO中高表达。敲低CTHRC1抑制了结直肠癌细胞株LOVO的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。CTHRC1通过增强ERK1/2的磷酸化所介导的EMT促进结直肠癌的侵袭转移。
- 严力叶耿泰沈智勇朱显军刘浩李国新
- 关键词：结直肠癌短发卡RNA上皮间充质转化ERK1/2
- TALEN介导的MYH9基因沉默及对细胞周期与凋亡的影响被引量：8
- 2016年
- 目的利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因,观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法根据斯丹赛Fast TALETMTALEN试剂盒说明书,设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot等检测质粒活性,成功挑取MYH9基因敲低单克隆株,并对构建好的细胞株进行周期和凋亡检测。结果成功挑选的MGC803单克隆细胞株未检测到MYH9基因完全敲除;MYH9基因敲低后,MGC803细胞周期受阻于G2/M期(P<0.05),早期凋亡增加(P<0.05)。结论利用TALEN技术成功构建MGC803细胞MYH9基因敲低单克隆株,该模型有助于后期深入探讨胃癌MYH9基因功能。
- 朱显军邓海军叶耿泰沈智勇李风萍郭伟洪杨庆斌刘浩李国新
- 关键词：细胞周期细胞凋亡
- 微小RNA-338-3p对结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2013年
- 目的 观察微小RNA-338-3p（miR-338-3p）对人结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 构建慢病毒介导的miR-338-3p及其抑制剂的表达载体并转染结直肠癌细胞株SW-620,流式细胞仪筛选建立稳定过表达miR-338-3p及其抑制剂的SW-620亚细胞株,利用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-338-3p表达,Western blot检测其靶基因Smoothened（SMO）蛋白表达水平,通过噻唑蓝比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态.结果 经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了包含miR-338-3p及其抑制剂的慢病毒表达载体,荧光显微镜下观察可见SW-620细胞表达绿色荧光.稳定过表达miR-338-3p的SW-620亚细胞株中,miR-338-3p表达水平显著高于阴性对照组（相对表达量3.91 ±0.51比2.36±0.44,P＜0.01）,SMO蛋白表达水平明显下降,且肿瘤细胞增殖能力减弱[细胞增殖抑制率（CPIR）：（61.9±5.2）％比（41.6±4.8）％,P＜0.01],细胞凋亡增加.稳定过表达miR-338-3p抑制剂的SW-620亚细胞株中,miR-338-3p表达水平显著低于阴性对照组（相对表达量0.92±0.29比2.36±0.44,P＜0.01）,SMO蛋白表达水平明显升高,且肿瘤细胞增殖能力增强[CPIR：（19.2±3.8）％比（41.6±4.8）％,P＜O.01],细胞凋亡减少；而此种促增殖作用可被anti-SMO-siRNA部分逆转,说明此种生物学效应确由SMO所介导.结论 miR-338-3p可通过抑制结直肠癌细胞中SMO蛋白表达而抑制肿瘤细胞生长.
- 孙凯雷尚通邓海军董泾青李国新
- 关键词：结直肠癌慢病毒
- 腹膜转移相关肌球蛋白MYH9促进胃癌CTNNB1基因转录及胃癌细胞失巢凋亡抵抗
- 胃癌腹膜转移严重影响患者预后。尽管“种子-土壤”学说作为胃癌腹膜转移的经典理论得到广泛接受，胃癌细胞腹膜转移内在分子机制尚不十分清楚。蛋白是一切生命活动的执行者。为寻找胃癌腹膜转移关键蛋白，本研究首先采用双向凝胶电泳和质...
- 叶耿泰
- 关键词：胃癌腹膜转移
- 文献传递
