国家自然科学基金(21307017)
- 作品数：11 被引量：26H指数：3
- 相关作者：曹佐武乜春城蒋治良温桂清梁爱惠更多>>
- 相关机构：暨南大学广西师范大学贺州学院更多>>
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- ZP2抑或ZP3——精卵识别机制的争辩被引量：3
- 2013年
- 本文综述受精研究的新进展,精子与卵透明带的识别是受精过程中的一个关键过程。自从上世纪七十年代以来,国际上有关实验室对受精机理进行了系统的研究,取得了明显的进展,建立了精卵识别的经典理论,认为卵透明带ZP3是精子的初级受体与顶体反应的诱导剂。然而,近年来的深入研究结果与原来的理论发生明显冲突,使得原来清晰的阐述变得迷糊,原来顺理成章的结论重新变成疑点。
- 曹佐武
- 关键词：透明带受精顶体反应多精子受精
- 碘-纳米金共振瑞利散射能量转移分析平台的构建及应用
- 在pH 2.8的Na HPO-柠檬酸缓冲溶液和KI存在下,纳米金呈聚集状态,在370 nm处产生较强的共振瑞利散射峰。当加入HO时,体系中的HO与KI反应生成配阴离子I,它可吸附在纳米金聚集体(NGA)表面,NGA的共振...
- 王耀辉梁晓静尚广云温桂清梁爱惠蒋治良
- 关键词：纳米金碘H2O2
- 文献传递
- 小鼠ZP2肽的基因克隆和原核表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 目的:克隆小鼠卵透明带2(mZP2)肽的基因并构建原核表达载体。方法:从小鼠卵巢组织中分离出mRNA,并以此作为模板,通过RT-PCR扩增出小鼠ZP2肽的cDNA片段,将其克隆到pET原核表达载体。将该重组mZP2基因转化Rosetta-gami(DE3)pLysS菌,通过SDS-PAGE和Western blotting分析重组蛋白的表达情况。结果:克隆小鼠ZP2肽的cDNA片段,构建原核表达载体pET-mZP2,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明表达产物是约36 ku具有6个组氨酸标签肽的融合蛋白。结论:成功克隆小鼠ZP2基因片段,构建的mZP2原核表达载体具有表达功能。
- 乜春城禹艳红谢妍曹佐武
- 关键词：RT-PCR基因克隆基因表达
- 肼还原制备红色纳米银胶及其光谱特性研究
- 以柠檬酸三钠为稳定剂,用水合肼还原硝酸银,制备了稳定性较好的红色纳米银胶(AgNR)。利用紫外可见吸收、共振瑞利散射、表面增强拉曼散射(SERS)对其进行了表征。用紫外可见分光光度计考察水合肼浓度、聚乙烯吡咯烷酮(PVP...
- 尚广云梁晓静王耀辉温桂清罗杨合梁爱惠蒋治良
- 关键词：瑞利散射SERS
- 文献传递
- 人ZP3的N端肽的体外表达
- 2013年
- 目的：为了深入研究透明带的功能，体外表达人ZP3的N 端肽段。方法：通过PCR克隆人ZP3的第77～703的DNA序列，利用该片段构建hZP3的N端肽的原核表达载体，转化大肠杆菌Rosetta （DE3）进行体外表达，利用分离的表达产物免疫小鼠，通过ELISA检测抗体反应，利用Western blotting和免疫组化检测抗血清与重组透明带蛋白和人卵巢天然的透明带蛋白的特异反应。结果：Western blotting结果显示，获得了约27 ku的重组蛋白，用该蛋白免疫小鼠获得了抗体滴度近20000的抗血清，该抗体能与重组透明带蛋白和人卵巢天然的透明带蛋白的特异反应。结论：成功表达人ZP3的N端重组肽，表达产物具有免疫原性。
- 曹佐武徐放谢琪璇乜春城姚冠颖
- 关键词：透明带抗原性体外表达免疫组化
- 线粒体病的基因治疗被引量：3
- 2011年
- 线粒体基因突变导致的线粒体病仍是不治之症,目前只有针对症状的支持性疗法。根治线粒体病只能寄希望于基因治疗。基因治疗的主要目标是修补特定基因突变导致的功能缺陷,或促使异质性的转变,以降低突变型与野生型基因组的比例。所探讨的途径主要包括:①在肽核酸和锌指肽的引导下选择性抑制突变基因组的复制;②利用特定的限制性内切酶去除突变的线粒体基因组;③把特定的tRNAs输入线粒体;④把异位表达的线粒体多肽输入线粒体。但临床上基因治疗线粒体病还需更多的研究。
- 曹佐武
- 关键词：线粒体病基因治疗异位表达
- 小鼠ZP2抗体的制备及其免疫活性研究被引量：1
- 2015年
- 目的制备抗小鼠ZP2(m ZP2)抗体并研究抗血清的免疫活性。方法利用Rosetta宿主菌诱导表达m ZP2重组蛋白,电泳分离重组ZP2蛋白,切胶制备免疫抗原;利用乳化抗原主动免疫新西兰雄兔制抗血清;通过ELISA测定抗体应答水平;以免疫组化测定抗血清特异性;通过精卵结合实验检测抗血清对小鼠卵子结合顶体反应后精子的影响。结果 ELISA结果说明用重组蛋白免疫新西兰雄兔诱发产生了抗血清。免疫组化实验证明抗血清与小鼠卵巢透明带发生了特异性反应,精卵结合实验显示抗ZP2抗体能抑制顶体反应后精子与卵子结合。结论重组m ZP2蛋白诱发产生了抗ZP2抗体,抗体能抑制顶体反应后的精子与卵子结合。
- 乜春城姚冠颖曹佐武
- 关键词：抗血清免疫组化精卵结合
- 纳米金共振瑞利散射光谱法测定甲醛
- 在醋酸乙酸铵介质存在下,金纳米粒子(AuNPs)呈聚集状态,在370 nm处产生较强的共振瑞利散射峰。当体系中存在甲醛时,它与乙酰丙酮生成黄色的二乙酰基二氢卢剔啶(DDL),导致纳米金瑞利散射信号猝灭。随着甲醛浓度的增加...
- 梁晓静尚广云王耀辉温桂清罗杨合梁爱惠蒋治良
- 关键词：纳米金甲醛共振瑞利散射
- 文献传递
- 氢化物-KI3-罗丹明6G体系荧光法测定痕量硒被引量：3
- 2015年
- 硒是人和动物体内必需的微量元素,但硒摄入过量会导致硒中毒,因此痕量硒的准确检测具有非常重要的意义。本研究目的是建立一种灵敏、具有选择性测定硒的氢化物发生荧光分析新方法。在0.36mol·L^-1硫酸介质中,以NaBH4为还原剂,Se（Ⅳ）被还原为H2Se气体。用KI3溶液作为吸收液,I3^-被H2Se气体还原成I^-。当加入罗丹明6G时,罗丹明6G（Rh6G）与吸收液中的I3^-形成缔合微粒导致荧光强度减弱。有Se（Ⅳ）存在时,罗丹明6G与I3^-结合较少,剩余量增多,荧光强度增强。优化了分析条件,选择0.36mol·L^-1 H2SO4,21.6g·L^-1 NaBH4,23.3μmol·L^-1 Rh6G,50μmol·L^-1 KI3,激发波长为480nm时瑞利散射不影响荧光测量。在选定条件下,Se（Ⅳ）浓度在0.02～0.60μg·mL^-1范围内与562nm处的荧光强度增加值ΔF呈线性关系,线性回归方程为ΔF562nm=12.6c＋20.9,方法检出限为0.01μg·mL^-1。考察了共存物质对氢化物发生-分子荧光法测定5.07×10^-6 mol·L^-1 Se（Ⅳ）的干扰情况。结果表明该法具有较高的选择性,即0.5mmol·L^-1的Ba^2＋,Ca^2＋,Zn^2＋,Fe^3＋,0.25mmol·L^-1的Mg^2＋,0.05mmol·L^-1的K^＋,0.2mmol·L^-1的Al^3＋,0.025mmol·L^-1的Te（Ⅵ）均对测定不产生干扰。Hg^2＋,Cd^2＋和Cu^2＋等易与Se（Ⅳ）结合生成沉淀,干扰Se（Ⅳ）的测定,这些干扰离子可以通过加入络合剂消除干扰。该氢化物发生-分子荧光光谱新方法已用于水中痕量硒的测定,结果满意,回收率在91.8%～107.1%之间。
- 梁爱惠李院黄珊珊罗杨合温桂清蒋治良
- 关键词：氢化物发生罗丹明6G荧光法
- 金纳米棒表面等离子体共振瑞利散射能量转移光谱测定痕量硼被引量：2
- 2015年
- 硼是一种生命体必需的微量元素,但过量的硼对人体以及动植物有害。建立一种高灵敏度,高选择性以及简便的硼检测方法,对于环境和人类健康都具有很重要的意义。本研究的目的是建立一种简便,灵敏,选择性测定硼的金纳米棒等离子体共振瑞利散射能量转移光谱新方法。直径为12nm,长度为37nm的金纳米棒采用种子生长法制备。在pH 5.6的NH4Ac-HAc的缓冲溶液中和甲亚胺-H存在下,金纳米棒在404nm处产生较强的共振瑞利散射峰。当体系中存在硼酸时,硼酸与甲亚胺-H形成硼酸-甲亚胺-H配合物。作为散射受体的配合物与散射共振能量转移的给体纳金米棒靠近时,发生瑞利散射共振能量转移,导致瑞利散射信号猝灭。随着硼酸浓度的增加,形成的配合物增加,金纳米棒转移给黄色配合物的散射光能量增大,导致体系404nm处的瑞利散射强度线性降低。其降低值ΔI404nm与硼的浓度在10～750ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系。考察了共存物质对该法测定2.3×10^-7 mol·L^-1 B的干扰情况。结果表明该法具有较高的选择性,即4×10^-4 mol·L^-1的Mn^2＋,Cd^2＋,Zn^2＋,Bi^3＋,Na^＋,Al^3＋,葡萄糖,Hg^2＋,IO3^-,F-,SO4^2-,SiO3^2-,NO3^-,ClO4^-,过氧化氢等对硼的测定无干扰。据此建立了一个灵敏度高,选择性好,简便快速检测硼的瑞利散射共振能量转移新方法。
- 叶玲玲李廷盛罗杨合温桂清梁爱惠蒋治良
- 关键词：金纳米棒
