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猪囊尾蚴一种蛋白抗原基因的分子克隆: 2004年; 目的　从猪囊尾蚴cDNA文库中筛选出编码某种蛋白抗原的基因。　方法　提取猪囊尾蚴mRNA ,经反转录合成cDNA ,构建cDNA文库。以兔抗猪囊尾蚴多克隆抗体筛选cDNA文库 ,得到阳性克隆后 ,将其亚克隆到pBlue scriptSK质粒中 ,以载体臂上的通用引物采用双脱氧末端终止法测定插入片段的核苷酸序列 ,GENETYX软件分析核苷酸序列编码的氨基酸序列 ,在GenBank中进行核苷酸序列同源性检索。　结果与结论　经过 3次筛选 ,从cDNA文库中筛选出一个长度为 13 2 0bp的基因片段。此克隆的开放阅读框为 12 60bp ,编码 42 0个氨基酸 ,含有两个糖基结合位点。与GenBank中的基因进行同源性分析 ,其部分核苷酸序列与秀丽隐杆线虫 (Caenorhabditiselegans)红细胞膜内蛋白和恶性疟原虫 (Plasmodiumfalciparum ); 刘殿武李文玲张丽梅; 关键词：猪囊尾蚴基因蛋白抗原恶性疟原虫原基 DNA文库

猪囊尾蚴cYI基因表达重组子的建立及在大肠杆菌中的表达被引量：1: 2008年; 目的研究猪囊尾蚴cYI基因在大肠埃希菌中的表达情况。方法以本室保存的cYI基因为模板,应用PCR技术获得目的基因,运用分子克隆技术,将cYI基因插入到质粒pET28b的NdeI和XhoI位点构建pET28b-cYI重组表达质粒,转化到大肠杆菌DE3后,利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳方法观察其表达情况。结果成功建立了pET28b-cYI重组质粒,并转化到大肠杆菌DE3中表达出相对分子量为18 000的特异性蛋白,表达量为菌体蛋白的30%。结论cYI基因重组子可在大肠杆菌中表达出特异性蛋白,表达量为菌体蛋白的30%。; 刘英丽刘殿武杜喆李曼郑杰张魏丽; 关键词：囊尾蚴基因表达大肠杆菌

猪囊尾蚴一种蛋白抗原的cDNA分子克隆被引量：1: 2004年; 目的　从猪囊尾蚴 c DNA文库中克隆某种编码蛋白抗原的基因。方法　用脑囊尾蚴病人血清筛选猪囊尾蚴 c DNA文库 ,获得阳性克隆后 ,经 PCR技术扩增噬菌体载体中插入的 c DNA片段 ,并将其亚克隆入 p U C18质粒载体中 ,用双脱氧核苷酸末端终止法测定插入片段的核苷酸序列。测序后与 Gen Bank中的核苷酸序列进行同源性分析。结果　经 3次筛选 ,从 c DNA文库中克隆出一个阳性克隆 ,测序后其长度为 5 4 6 bp,含有一个开放读码框 ,编码 15 8个氨基酸。同源序列分析结果表明此基因片段与编码猪囊尾蚴的一种免疫原性蛋白基因 (NC- 9)同源性高达 99%。; 杨洁张丽梅刘殿武; 关键词：猪囊尾蚴 CDNA文库分子克隆 PCR

猪囊尾蚴线粒体NADH脱氢酶的基因克隆被引量：7: 2003年; 目的　研究猪囊尾蚴线粒体 NADH脱氢酶亚单位 1基因的结构特点。　方法　提取猪囊尾蚴 m RNA,反转录合成 c DNA,构建 c DNA文库。用兔抗囊尾蚴抗血清筛选文库 ,得到阳性克隆 ,将其亚克隆到 p Bluescript SK质粒中测序 ,并与 Gen Bank中核苷酸序列进行同源性分析。　结果与结论　 3次筛选得到 1个阳性克隆 ,其长度为 10 82bp。其中 1～ 5 78bp为开放阅读框 ,编码猪囊尾蚴线粒体 NADH脱氢酶亚单位 1的 192个氨基酸残基 ,5 79～ 10 82 bp为 t RNA- Asn、t RNA- Ile与 t RNA- Pro的基因编码区。; 张莉刘殿武; 关键词：猪囊尾蚴线粒体 NADH脱氢酶基因克隆 CDNA文库

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河北省自然科学基金(397262)