贵州省科技厅科学技术基金(J[2010]2267)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 相关作者：潘际刚聂杨徐国强王念孙达权更多>>
- 相关机构：贵州医科大学贵阳医学院更多>>
- 发文基金：贵州省科技厅科学技术基金贵阳市科学技术计划项目国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MPST基因慢病毒载体的构建及在SH-SY5Y细胞中的表达被引量：2
- 2019年
- 为构建MPST基因慢病毒表达载体,获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株,本研究通过PCR扩增出MPST目的基因,将其克隆到慢病毒表达载体p EB-GFP (T2A) PURO上,将重组慢病毒表达载体和慢病毒包装质粒系统(pLP/VSVG, pLP1, p LP2)共转染293T细胞,用获得重组的慢病毒液感染SH-SY5Y细胞,嘌呤霉素筛选稳定表达MPST基因的(SH-MPST)细胞株。采用Real-time PCR和Western blotting以及ELISA等方法对筛出来的SH-MPST中的MPST的表达及功能进行鉴定。与空转染组(SH-PEB)相比,SH-MPST细胞中MPST mRNA及蛋白的表达水平显著增加,且细胞内MPST酶活性、酶含量及细胞释放硫化氢的水平均显著增加(p<0.05)。以上研究表明,MPST基因慢病毒表达载体成功构建,并获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株,这将为MPST功能的深入研究提供依据。
- 范海琼孙达权柳香香王念徐国强潘际刚
- 关键词：慢病毒过表达SH-SY5Y细胞硫化氢
- 氟中毒对大鼠内源性胱硫醚-β-合成酶及硫化氢水平的影响被引量：2
- 2014年
- 目的观察慢性氟中毒对大鼠内源性胱硫醚-β-合成酶（CBS）及硫化氢（H2S）水平的影响。方法48只SD大鼠（体质量105-180g）按体质量采用随机数字表法分为3组，每组16只大鼠（雌雄各半），其中对照组、低氟组、高氟组大鼠饲料氟含量分别为9．80、15．40、23．80mg／kg。染氟6个月后，氟离子选择电极法检测大鼠尿氟及骨氟；亚甲基蓝法检测大鼠血清及脑组织H2s含量、CBS活性；蛋白质印迹法（Westernblot）检测大鼠脑组织CBS蛋白表达。结果染氟6个月后，与对照组比较，低氟组和高氟组大鼠均有氟斑牙出现；大鼠尿氟、骨氟组间比较差异有统计学意义（，值分别为65．16、67．93，P均〈0．05）。其中尿氟和骨氟在低氟组[（5．25±0．45）mg／L，（1196．54±72．78）mg／kg]和高氟组[（13．17±0．98）mg／L，（2656．61±170．12）mg/kg]的水平均高于对照组[（3．64±0．20）mg／L，（870．71±71．51）mg／kg，P均〈0．05]，且呈剂量依赖性增加（P均〈0．01）。大鼠血清、脑组织中H2s含量组间比较差异有统计学意义（F值分别为4．83、1456．13，P均〈0．05）。其中高氟组大鼠血清H2S[（17．64±2.38）μmol／L]高于对照组[（10．29±0．74）μmol／L，P〈0．01]；低氟组和高氟组大鼠脑组织H2S[（364．74±2．06）、（513．43±4．18）μmol／L]均高于对照组[（314．94±0．72）μmol／L，P均〈0，01]，且呈剂量依赖性增加（P〈0．01）。大鼠脑组织中CBS活性组间比较差异有统计学意义（F=760．63，P〈0．01）。其中低氟组和高氟组大鼠脑组织CBS活性[（438．90±2．83）、（529．83±2．37）mmol·kg-1·min-1]低于对照组[（596．33±2．75）mmol·kg-1·min-1，P均〈0．01]。高氟组大鼠脑组织CBS蛋白表达（1．49±0．08）高于对照组（1．19±0．06，P〈0．05）。结论慢性氟中毒能够影响大鼠内源性CBS及H2S水平，除CBS活性外，�
- 潘际刚楼迪栋刘艳洁魏娜刘咏妍官志忠
- 关键词：氟中毒胱硫醚-Β-合成酶硫化氢
- 亚砷酸钠对SH-SY5Y细胞生长和3MST表达的影响被引量：4
- 2016年
- 神经母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一。因其恶性程度高，手术加化疗的方案对于侵润性的神经母细胞瘤效果不佳。砷，俗名砒霜，很早被用来治疗急性粒性白血病。现在发现砷对神经母细胞瘤、胶质瘤，以及来源于肝脏、前列腺、肾脏、子宫颈和胆囊等固体肿瘤也有效［1］。然而，其作用机制尚未完全明了。有报道，肿瘤细胞H2 S合成酶表达上调［2］。那么，砷是否可通过下调H2 S合成酶的表达发挥抗癌作用？本实验采用SH－SY5Y细胞和亚砷酸钠（ NaAsO2）对此问题进行了探讨。
- 聂杨王念徐国强潘际刚
- 关键词：亚砷酸钠神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞
