重庆市自然科学基金(CSTC2007BA1005)
- 作品数：4 被引量：62H指数：4
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- 3种致病菌多重PCR检测体系的建立及应用被引量：11
- 2008年
- 金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogen,LM)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus,BC)是食品中重要的致病菌,建立其多重PCR的快速检测体系,对开发食源性致病微生物快速检测试剂盒具有重要意义。根据SA的nuc基因、LM的hly基因和BC的hemolysin基因,设计合成3对特异性引物,然后进行单基因PCR反应特异性验证。在此基础上建立了3种致病菌的多重PCR检测体系,并应用于食品检测中,同时以国标法进行对比验证。结果表明,建立的多重PCR检测方法简单、快速、灵敏度高,检测灵敏度可达到1 cfu/mL,整个检测时间在16 h以内,具有较大的应用价值,可广泛应用于食品卫生检测以及临床检验等领域。
- 陈伟杨迎伍邓伟李正国
- 关键词：食源性致病菌多重PCR食品
- 传统分离培养结合DGGE法检测榨菜腌制过程的细菌多样性被引量：40
- 2009年
- 采用传统分离培养和基于16S rRNA作为分子标记的变性梯度凝胶电泳(Denaturing gra-dient gel electrophoresis,DGGE)的方法,分析榨菜腌制过程中不同时期的可培养细菌数量、多样性及其群落结构。结果表明,用传统分离与分子鉴定方法获得7个属的细菌类群,其中乳杆菌属(Acidobacterium)是优势菌群,明串珠菌属(Leuconostoc)是次优势菌群。对通过DGGE方法得到的11条16S rRNA优势条带序列进行了比对,结果表明明串珠菌属(Leuconostoc)的丰度最高,是腌制过程中主要的优势菌群,乳球菌(Lactococcus lactis)是次优势菌。传统分离法与DGGE法结合能够更有效的分析榨菜腌制过程中微生物的多样性及其动态变化,获得更全面的微生物多样性信息。
- 李正国付晓红邓伟杨迎伍崔英双赵平
- 关键词：JUNCEA
- 腌制萝卜腐败微生物的分离及其特性研究被引量：4
- 2008年
- 通过对巴氏杀菌腐败变软的腌制萝卜中的微生物进行分离,得到两株腐败细菌及一株真菌。通过生理生化鉴定和分子生物学鉴定,确定两株细菌分别为枯草芽孢杆菌和表皮葡萄球菌,真菌为新缝匠菌。通过对腐败菌的耐受温度、耐酸和耐盐性质研究发现,在加工过程中,控制7%的含盐量、pH4.5及80℃巴氏杀菌15min,可以有效控制3株腐败菌的生长繁殖。本研究结果为腌制萝卜的防腐保鲜提供了重要的参考。
- 付晓红杨迎伍邓伟李正国
- 关键词：萝卜微生物
- 肉制品中志贺氏菌DNA的快速提取方法被引量：7
- 2009年
- 肉制品中致病菌DNA的提取对PCR检测具有重要意义。以污染志贺氏菌的猪肉为材料,比较了沸水浴法、裂解液煮沸法、CTAB/SDS法、改良的碱性异硫氰酸胍法4种提取方法对志贺氏菌DNA的提取效果,并以提取的DNA为模板进行PCR检测。结果表明:改良的碱性异硫氰酸胍法提取志贺氏菌DNA的效果较好,猪肉中志贺氏菌的PCR最低检出限为5×100CFU/g,整个检测时间<8h。经改良的碱性异硫氰酸胍法操作简便、经济省时,可用于肉类的PCR检测。
- 陈伟李正国杨平杨迎伍王国民
- 关键词：肉制品志贺氏菌DNAPCR
