广东省中医药管理局基金(2007085)
- 作品数：2 被引量：13H指数：2
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- 龟版有效成分抗无血清损伤表皮干细胞凋亡的研究被引量：6
- 2011年
- 目的:探讨龟版有效成分对无血清培养所致的表皮干细胞(epidermal stemcell,ESC)凋亡的药效作用和可能机制。方法:分离培养孕龄2周的Sprague-Dawley胎鼠背部皮肤制备ESC,分为正常组、模型对照组和龟版有效成分各组。采用含龟版有效成分的无血清达尔伯克改良伊格尔培养基培养24、48和72h后,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-di methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT)法检测ESC的活力,筛选药物最佳作用时间;ESC用各药物培养48h后,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V和碘化丙锭双标后用流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)和Bcl-2蛋白的表达水平。结果:MTT检测结果表明,在24、48和72h时各有效成分组ESC活力较模型对照组增强(P<0.01),且作用48h时乙酸乙酯部位提取物组ESC活力高于十八酸乙酯、十四酸甾醇酯、4-甾酮各组(P<0.05,P<0.01)。作用48h时,乙酸乙酯部位提取物抗凋亡效果最强,4-甾酮抗凋亡效果最弱。蛋白免疫印迹结果表明,乙酸乙酯部位提取物、十八酸乙酯、十四酸甾醇酯、4-甾酮均能显著上调Bcl-2和下调caspase-3的表达,有抗凋亡作用。结论:乙酸乙酯部位提取物有较强的抗ESC凋亡作用,优于它的各组分单独作用,调控Bcl-2与caspase-3之间的表达平衡可能是其抗ESC凋亡的机制之一。
- 陈兰黎晖李春曹佳会伍艺灵刘洋周健洪陈东风李伊为
- 关键词：龟版表皮干细胞凋亡BCL-2半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- 龟板有效成分抗紫外线损伤所致的胎鼠表皮干细胞的凋亡被引量：8
- 2010年
- 目的确定紫外线损伤所致的胎鼠表皮干细胞凋亡模型,筛选抗凋亡的龟板有效成分,为进一步应用开发打下基础。方法分离培养胎鼠表皮干细胞,用流式细胞仪检测CK19和Integrin β1双标阳性细胞鉴定纯度。用紫外线直接照射细胞造成损伤模型,用龟板各成分对照培养,用流式细胞仪检测FITC-Annexin V和碘化丙锭(PI)双标,根据细胞凋亡率确定紫外线损伤模型和筛选具有抗凋亡作用的龟板有效成分。结果①第3代胎鼠表皮干细胞已达到96.57%以上纯度;②紫外线照射量为100mJ/cm2损伤15min再培养20h可获得稳定的损伤模型,总凋亡率为41.06%;③龟板有效成分2B、S6、S8、S9均有抗凋亡作用。结论龟板有效成分S8具有较好的抗紫外线损伤所致的胎鼠表皮干细胞凋亡作用,应进一步探讨其机制。
- 李春陈兰黎晖邓汝东张赛霞陈东风李伊为
- 关键词：龟板表皮干细胞紫外线损伤凋亡胎鼠
