北京市自然科学基金(5111001)
- 作品数：19 被引量：70H指数：5
- 相关作者：王有年师光禄马兰青郭辉力柳春梅更多>>
- 相关机构：北京农学院中华人民共和国农业部北京林业大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 烟草4CL与虎杖STS融合基因的构建、表达及融合蛋白纯化被引量：2
- 2014年
- 白藜芦醇具有抗菌、抗癌、抗肿瘤、保护心血管、抗氧化等众多药理作用.4-香豆酰辅酶A连接酶（4-Coumarate-CoA ligase,4CL）和芪合酶（Stilbene synthase,STS）是其生物合成的关键酶和限速酶.本研究利用悬挂PCR （Overlap PCR）技术将白藜芦醇生物合成的最后两个关键酶4CL和STS的基因融合,构建原核表达pET30a-Nt4CL∷PcPKS5重组质粒,原核表达Nt4CL∷PcPKS5融合酶蛋白.预测其共编码945个氨基酸,含15个氨基酸的过渡氨基酸链（Linker）,编码蛋白质分子量（Mr）为102.8 kDa,等电点（pI）为5.69.原核表达筛选结果表明：温度为25℃,IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导起始OD600值在0.4～0.6之间,诱导4h时目标蛋白的表达量最高.细胞破碎后,经Ni2＋亲和柱纯化、PD-10柱脱盐后可纯化得到融合蛋白.本研究为通过分子生物学途径合成白藜芦醇奠定基础.
- 杨亚东郭辉力刘文彬杨明峰马兰青王有年
- 关键词：白藜芦醇融合基因双功能酶原核表达
- 欧亚旋覆花提取物对朱砂叶螨生物活性及其体内几种酶活性的影响
- 2012年
- 植食性害螨是危害农业生产的一个重要生物类群,我国每年用于主要作物的杀螨剂费用约90多亿元（师光禄等,1994）。朱砂叶螨（Tetranychus cinnabarinus）是其中一个重要的种类,可危害粮、棉、油、林木、果树等43科146种植物（李连昌等,1992；忤均祥等，2002）。
- 段丹丹王有年成军招嘉宁师光禄
- 关键词：朱砂叶螨谷胱甘肽-S-转移酶乙酰胆碱酯酶
- 烟草Nt4CL与虎杖PcSTS基因的融合表达与功能分析被引量：1
- 2016年
- 4-香豆酰辅酶A连接酶(4-coumarate-Co A ligase,4CL)和芪合酶(stilbene synthase,STS)是白藜芦醇苯丙氨酸代谢合成的最后两个关键酶。运用悬挂PCR(overlap PCR)的方法将烟草4CL基因(Nt4CL)和虎杖STS基因(Pc PKS5)用3个中性氨基酸链连接,得到融合基因Nt4CL-Pc PKS5,将其插入原核表达载体中,构建p ET30a-Nt4CL-Pc PKS5重组质粒,表达Nt4CL-Pc PKS5融合蛋白。经Ni2+纯化和PD-10柱脱盐后,得到可溶性纯化蛋白。体外酶促反应结果表明该融合酶具有4CL和STS的双重活性,其催化产物为白藜芦醇。酶促反应最适条件为:p H 6.5,反应温度为45℃。研究结果获得了有效催化白藜芦醇生物合成的双功能融合酶,为进一步利用融合酶基因转化工程菌株实现白藜芦醇工业化生产奠定了基础。
- 刘文彬郭辉力刘欢黄丽娜张奋强马兰青
- 关键词：白藜芦醇融合基因原核表达酶促反应
- 葡萄白藜芦醇合酶基因VvSTS的克隆及其在原核中的表达
- 白藜芦醇是一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物,存在于少数几种植物中,是一种植保素,同时具有多种药理和保健功能,如抗肿瘤、心血管保护、抗氧化功能等。白藜芦醇合酶是催化合成白藜芦醇的关键酶,为进一步验证葡萄白藜芦醇合酶基因...
- 郭辉力罗在柒杨亚东马兰青王有年
- 关键词：葡萄白藜芦醇合酶基因克隆原核表达
- 脱落酸(ABA)对不同裂果性枣叶片和果实表面气孔的影响被引量：3
- 2015年
- 以‘京枣39’(Zizyphus jujuha Mill.cv.‘Jing 39’)和‘郎家园枣’(Zizyphus jujuha Mill.cv.‘Langjiayuanzao’)为试材,研究了喷施脱落酸(ABA)后不同时间和在喷施3次ABA后对不同裂果性枣叶片和果实表面气孔的影响。结果表明:ABA处理时,随着喷施次数的增加,‘京枣39’品种叶片气孔密度逐渐降低,到第3次喷施后显著降低,而‘郎家园枣’在第3次喷施后气孔密度较第2次却有所回升;同时,‘京枣39’果实气孔密度逐渐降低,与对照有显著差异,而‘郎家园枣’果实气孔密度变化不明显。在ABA处理后不同时间,‘京枣39’叶片气孔密度、果皮气孔开度与对照处理有显著差异,果皮气孔密度无差异,‘郎家园枣’果皮气孔开度与对照处理有显著差异,果实和叶片气孔密度均无显著差异。‘京枣39’果实气孔开度随着喷施ABA次数的增加而增加,到第3次喷施后显著增加,而‘郎家园枣’果实气孔开度和对照比较无显著差异。该研究结果对于指导枣的生产具有重要意义。
- 李彦玲杨爱珍王晓琴师光禄王有年
- 关键词：气孔密度气孔开度
- 辣蓼不同种间植物次生代谢产物种类及差异被引量：5
- 2012年
- 辣蓼是一种广泛分布于我国的传统中草药,通常指水辣蓼(Polygonum hydropiper)和旱辣蓼(Polygonumflaccidum)的干燥全草,具有健脾化湿、除湿化滞、止痢止痛、解毒化瘀等功效。近几年两种辣蓼植物提取物在兽药、植物源农药方面进行了较为深入研究,结果表明,水辣蓼和旱辣蓼的作用机制、功效及应用方向存在明显差别。本文对上述两种植物的次生代谢产物种类及其差异进行了综述和对比分析,为辣蓼植物活性成分功能研究与深化利用提供依据。
- 柳春梅吕鹤书师光禄马兰青王有年
- 关键词：次生代谢产物
- 红景天甙生物合成途径:酪醇合成的起始反应及其糖基化被引量：16
- 2012年
- 红景天甙(Salidroside)生源途径分子机制的解析是利用基因工程、代谢工程技术合成目标化合物的基础。糖基化是红景天甙生物合成的最后一步反应。在前期工作中,本课题组率先报道了与红景天甙生物合成相关的3个尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(UGTs)基因,在体外酶学性质研究的基础上,利用根癌农杆菌和发根农杆菌介导分别建立了相关转基因体系,鉴别了红景天甙生物合成最适UGT及植物和毛状根生物反应器系统合成红景天甙的效率差异;酪醇(Tyrosol)是红景天甙糖基化反应的甙元底物分子,其具体的代谢通路及其调控机制仍不明确。针对酪醇生物合成来源主要存在两种观点:一是酪醇可能来自于苯丙烷代谢途径产生的4-香豆酸,该途径起源于苯丙氨酸;二是生物碱代谢途径的中间产物酪胺可能是酪醇生物合成的前体,该途径则起源于酪氨酸。在后续工作中,否定了酪醇来源于苯丙烷代谢途径的可能性,进一步的工作证实酪氨酸脱羧酶(TyrDC)在酪醇生物合成的起始反应中担负着重要功能,酪醇作为一种苯乙烷类化合物衍生物,其生物合成来源于生物碱代谢途径。
- 马兰青柳春梅于寒松张继星高东尧李彦舫王有年
- 关键词：红景天甙酪醇分子调控红景天
- 枣果皮组织结构与裂果关系研究被引量：8
- 2016年
- 【目的】为寻求枣裂果防控、裂果机理和抗裂良种选育提供理论依据和参考。【方法】从花后15 d开始采样,每10 d采样1次,调查易裂品种‘京枣39’（Ziziphus jujube Mill.‘Jing39’）和抗裂品种‘郎家园枣’（Ziziphus jujube Mill.‘Langjiayuanzao’）生长发育规律与裂果的关系,在果园中和室内统计裂果率,制作石蜡切片,观测正常果和裂果的果皮结构和细胞形态特征以及在不同生长发育时期的组织结构变化。【结果】（1）‘京枣39’生长比较迅速,细胞膨大期长,单果重在每个时期均大于‘郎家园枣’。‘郎家园枣’的横纵经均小于‘京枣39’。（2）‘京枣39’正常果的表皮层厚度和角质层厚度均显著大于裂果,同时显著大于‘郎家园枣’正常果和裂果,‘京枣39’表皮厚度和角质层厚度裂果/正常果的比值均分别小于‘郎家园枣’,正常果的表皮细胞和角质层细胞比裂果的排列紧密,正常果的表皮细胞和角质层细胞大多呈方形、长方形或长柱形,裂果的大多呈长圆形、椭圆形或卵圆形。（3）花后40~70 d‘京枣39’表皮层厚度和角质层厚度变化较大,细胞体积增长比较迅速,花后40 d之后,‘京枣39’果肉细胞中空腔大小和数量多于‘郎家园枣’。【结论】‘京枣39’比‘郎家园枣’膨大期长、细胞体积增长迅速,同一品种,表皮厚度是主要导致裂果的因素,与角质层无显著规律,‘京枣39’正常果的表皮层和角质层比裂果的厚,当降到一定值时将变为裂果,裂果表皮厚度/正常果表皮厚度和裂果角质层厚度/正常果角质层厚度的比值可以作为衡量枣果裂果的重要依据,其比值小将易裂果,果实发育后期果肉空腔数量越多、体积越大越容易发生裂果。
- 李彦玲杨爱珍孟泽王晓琴师光禄王有年
- 关键词：裂果
- 桃园蜗牛驱避防治试验初探被引量：1
- 2011年
- 在对平谷地区桃园灰巴蜗牛的发生规律和危害情况进行调查的基础上,探索出一种操作简单、环保、成本低的蜗牛防治方法,即在桃树树干上缠胶带刷CuSO4.5H2O溶液防止蜗牛上树危害。结果表明:在试验区试验期内的总降雨量为447.5mm,降雨次数为小雨级别19次,中雨级别7次,大雨级别4次,暴雨级别2次,大暴雨级别1次的情况下,16.7%CuSO4.5H2O溶液可有效阻隔蜗牛上树。此方法在果园中防治蜗牛值得大力推广。
- 关伟张文忠张金珠刘明杨海清师光禄王有年
- 关键词：灰巴蜗牛桃树
- 壶瓶枣茎段遗传转化虎杖芪合酶基因体系的建立
- 壶瓶枣个大,皮簿,肉厚,风味甘美,享有盛誉,是山西省太谷县特产。但壶瓶枣易裂果,落果较重,果品耐贮运力差,严重影响产量和质量。通过生物技术与基因工程手段,对壶瓶枣优良单株开展无性系组织培养繁育,通过优化获得茎段诱导丛生芽...
- 罗在柒郭辉力杨亚东杨明峰马兰青王有年
- 关键词：枣树农杆菌介导法
