南京军区医药卫生基金
- 作品数：39 被引量：241H指数：10
- 相关作者：张金元田军刘楠梅程劲胡大勇更多>>
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- 骨髓间充质干细胞干预对缺血再灌注诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSCs)对缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)诱导的急性肾损伤模型小鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)凋亡的保护作用及机制。方法:Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法有效分离出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs)。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、夹闭双侧肾蒂30min开放)、I/R+mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30min开放的同时尾静脉注射mMSCs)。造模并干预后,于1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠,留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr),制作肾组织切片行HE染色进行肾小管损伤程度评分,TUNEL法检测RTECs的凋亡,Western Blot法检测建模后第2天肾小管组织中Caspase-3、Bcl-2蛋白水平的表达。结果:I/R后小鼠的BUN及Scr均显著高于正常对照组,但同一时间点I/R+mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,以术后第7天差异最为显著(P<0.01),肾小管损伤程度评分也有着显著降低。TUNEL检测表明I/R可诱导RTECs发生明显的凋亡,以术后第2天凋亡指数(apoptosis index,AI)最高(46.71±11.20)(P<0.01),而mMSCs干预可显著降低各时间点RTECs的凋亡水平(P<0.05或P<0.01),至14d时AI基本恢复至对照组水平。Western blot进一步显示:I/R+mMSCs组小鼠的肾组织中Caspase-3蛋白水平明显下降(1.16±0.33,P<0.01),而Bcl-2水平却有明显增高(0.94±0.27,P<0.01)。结论:移植的MSCs对I/R诱导的肾损害小鼠RTECs凋亡具有抑制作用,从而有利于肾小管损伤的早期恢复,其保护机制可能与抑制Caspase-3表达,上调Bcl-2表达有关,但其细胞学和分子机制还有待进一步研究。
- 刘楠梅田军王巍巍程劲胡大勇张金元
- 关键词：急性肾损伤骨髓间充质干细胞缺血再灌注肾小管上皮细胞
- 力竭运动对大鼠肾小管凋亡和缺氧诱导因子-1α表达的影响及人参总皂苷干预研究被引量：8
- 2014年
- 目的探讨高强度力竭运动对大鼠肾小管凋亡及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,以及人参总皂苷的干预效果。方法采用跑台运动加力竭游泳方法制作大鼠过度运动肾损伤模型,35只雄性SD大鼠随机分为安静对照组(CTL,n=7)、模型组[再分为2h组(M2,n=7)及24h组(M24,n=7)]、人参总皂苷干预组[再分为2h组(G2,n=7)及24h组(G24,n=7)]。G2和G24组于运动前5d预先给予人参总皂苷100mg/(kg·d)灌胃,1次/d;对照组和模型组仅给予等体积蒸馏水灌胃。记录各组力竭运动滞留跑道动物数和力竭游泳时间。断头处死后留取肾组织,病理切片行TUNEL法检测肾小管上皮细胞(TEC)凋亡,免疫组化检测Caspase-3、HIF-1α的表达;Western blotting检测肾组织Caspase-3和HIF-1α蛋白表达水平。结果与CTL组比较,模型组14只大鼠有11只滞留跑道,且力竭游泳时间明显缩短;与模型组比较,人参总皂苷组大鼠耐力明显增强,14只大鼠仅6只滞留跑道,且力竭游泳时间显著延长(P<0.05)。M2组和M24组大鼠肾组织凋亡TUNEL阳性细胞数增多,其中M24组的阳性细胞数明显增加,主要为皮髓质交界处肾小管上皮细胞;与模型组比较,G2组和G24组的TUNEL阳性细胞数目明显下降(P<0.05)。免疫组化分析显示Caspases-3、HIF-1α在CTL组仅见个别肾小管弱阳性淡染;M2组的表达较CTL组增强,M24组的表达明显升高,在刷状缘脱落的小管处呈颗粒样强阳性着色。人参总皂苷干预组G2、G24的Caspases-3阳性表达均较M2、M24有明显下降,但HIF-1α阳性表达水平较模型组升高。Western blotting结果显示CTL组仅有微量Caspases-3和HIF-1α表达,模型组Caspases-3表达水平显著上调(M2组上调约2.7倍、M24组上调约3.0倍),而人参皂苷干预组G2、G24的Caspases-3表达较模型组降低(分别较M2、M24下调约58%、61%)。HIF-1α表达水平在模型组M2、M24均有一定程度升高,但人参总皂苷干预组的HIF-1α在早期即快速上调,并持�
- 王会玲李燕田军胡伟锋张金元
- 关键词：肾小管人参皂甙
- 乙肝两种血清学模式HBV DNA与HBV M定量结果的关系被引量：3
- 2007年
- 成军孙长贵王国政周乐光孙关忠
- 关键词：荧光定量聚合酶链反应
- 大鼠二次脑损伤后脑组织SOD及MDA的变化研究被引量：2
- 2015年
- 目的:观察大鼠二次脑损伤后脑组织SOD及MDA的变化,进一步探讨过氧化反应在二次脑损伤机制中的作用。方法:90只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、弥漫性脑损伤组(B组)和二次脑损伤组(C组),建模成功后,分别于伤后1 h、3 h、6h、12 h、24 h、48 h处死动物,取额叶组织匀浆,分别测定大鼠脑内SOD及MDA的含量。结果:伤后1h开始,B、C组中SOD含量呈现先上升后下降的趋势,并随时间呈持续下降趋势直至伤后24 h,C组较B组下降程度更加明显(P<0.05);伤后3 h,B、C组中SOD含量均增高,B组增高程度和速率均高于C组(P<0.05)。伤后1 h开始,B、C组MDA含量呈升高趋势,并于24小时达峰值,C组升高趋势较B组更显著,伤后6 h、24 h、48 h,C组与B组之间相比统计学差异显著(P<0.05)。结论:创伤性脑损伤及二次脑损伤后,脑组织内过氧化反应明显加重,SOD及MDA均出现明显变化,二次脑损伤的过氧化反应较脑损伤组更加严重且持续时间更长,且MDA较SOD的变化具有滞后性。
- 荆俊杰陈锦华魏梁锋赵清爽应建彬王守森王如密
- 关键词：弥漫性脑损伤二次脑损伤超氧化物歧化酶丙二醛
- 缺血-再灌注急性肾损伤后原位成人干/祖细胞参与肾小管上皮细胞再生被引量：1
- 2017年
- 目的对急性肾损伤(AKI)模型大鼠肾小管损伤部位肾原位成人干/祖细胞(ARPC)的动态改变进行观察,探讨ARPC对AKI肾小管再生修复的影响。方法雄性SD大鼠右侧肾切除同时左侧肾动脉夹闭45 min建立缺血-再灌注肾损伤模型(AKI组),设假手术组为对照组(Sham组)。AKI组分别于设定时间处死动物,采集血及肾脏标本,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),行HE染色观察肾脏病理改变,观察肾小管损伤和修复。免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜观察ARPC标记蛋白CD24+CD133+在肾组织的表达。结果 AKI组术后短时间内Scr、BUN即迅速升高[Scr:(124.74±6.93)μmol/L;BUN:(18.27±2.38)mmol/L],第3天达高峰[Scr:(228.32±24.76)μmol/L;BUN:(26.32±3.93)mmol/L],随后缓慢降低,Sham组保持在正常水平。第7天后逐渐下降至正常,第14天肾功能基本恢复正常。光镜下可见AKI早期(第1天)肾小管上皮细胞呈灶性坏死、小管浊肿,管腔面微绒毛消失,部分刷状缘脱落,肾间质水肿使小管间隙扩大;第3~7天病变范围扩大,程度加重,部分小管空泡变性,脱落、坏死,形成蛋白管型,部分基底膜裸露。1周后在肾小管损伤部位出现再生的上皮细胞,细胞呈扁平样,细胞核大小不等,排列紊乱。免疫荧光结果显示,AKI早期仅见少许CD24+CD133+细胞,3~5 d后损伤肾小管处出现较多CD24+CD133+细胞[(7.5±2.1)个/视野,(8.3±1.7)个/视野],持续至第14天仍可见较多阳性细胞[(2.2±1.3)个/视野],与Sham组(d0)比较,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论肾缺血-再灌注可引起急性肾小管坏死损伤,但肾小管上皮细胞可通过再生而迅速修复,肾脏结构和功能再建;此过程中ARPC激活并持续表达,可能参与肾小管再生。
- 王会玲李芮刘楠梅胡伟锋李燕徐凯
- 关键词：急性肾功能不全
- 某医院2001-2010年医药卫生成果统计分析被引量：4
- 2014年
- 本文对某医院2001-2010年获医药卫生成果进行总结,并对获奖成果的学科及第一完成人的年龄、职称、学历进行统计分析,提出医院科研成果管理工作要创新人才培养,加强学科建设,优化整合资源,加强课题管理,建立激励机制等建议.
- 梁永刚鲜荣华林叶青吴冰郑春雨
- 关键词：医药卫生统计分析
- 个体化3D打印钛合金下颌骨植入体的设计制作与临床应用被引量：29
- 2015年
- 目的:通过钛合金3D打印技术的拓展,对个体化钛合金下颌骨植入体的设计、制作与临床应用进行探讨。方法:1)对1例单侧下颌骨体部与升支造釉细胞瘤患者,在手术前对下颌骨作薄层螺旋CT扫描,然后采用计算机辅助技术,进行下颌骨三维重建、模拟病变切除、镜像修复及植入体的设计,同时通过力学分析对植入体进行生物力学优化;2)将设计完善的下颌骨植入体数据输入钛合金3D打印设备,完成解剖形态个体化的下颌骨钛合金植入体制作;3)根据术前设计进行病变侧下颌骨切除,术中即刻将下颌骨植入体植入。结果:基于钛合金3D打印技术设计和制作的下颌骨植入体,在解剖形态上完全达到个体化三维仿真,与健侧下颌骨对称一致,缺损下颌骨的解剖形态即刻得到个体化修复重建。结论:钛合金3D打印技术使得解剖形态高度个体化仿真的下颌骨植入体的设计制作和临床应用成为现实,优化设计的钛合金下颌骨植入体力学性能优良,重量轻,制作精度高,为下颌骨节段性缺损的修复重建提供了一种理想的方法。
- 张庆福刘刚刘国勤
- 关键词：下颌骨缺损3D打印钛合金
- X-连锁肾上腺-脑白质营养不良蛋白3个突变体的制备及其鉴定
- 2011年
- 目的构建R617C、P508L和G512S突变型表达载体并对其进行鉴定。方法以野生型pGEX-4T-2-NBD原核表达载体为模板,通过体外诱导突变构建突变型表达载体,序列分析鉴定R617C、P508L和G512S突变重组子。结果突变型重组载体测序结果与患者的突变位点完全符合;表达产物的12%SDS-PAGE和蛋白质印迹也显示,约40.5×103的特异性区带能被特异性单克隆抗体所识别,与预期的结果相符;通过GST蛋白纯化试剂盒获得较高纯度的目的蛋白。结论 3个ALDP突变体的成功构建为进一步研究突变对ALDP结构和功能的影响奠定了基础,为了解X-ALD的分子发病机制创造了条件。
- 谢海花王志红柯龙凤黄粱浒兰风华
- 关键词：体外研究突变原核表达载体
- 骨髓间充质干细胞干预对缺血再灌注致小鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用被引量：8
- 2011年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）干预对缺血再灌注（I／R）诱导的急性肾损伤小鼠肾小管上皮细胞（RTECs）自身修复的影响。方法Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化出C57BL／6小鼠的骨髓间充质干细胞（mMSCs），5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记。雄性C57BIM6小鼠45只，分为正常对照组（15只）、I／R组（15只、夹闭双侧肾蒂30min开放）、I／R＋BrdU—mMSCs组（15只、夹闭双侧肾蒂30min开放的同时尾静脉注射BrdU标记的mMSCs）。留取动脉血及肾组织，检测血尿素氮（BUN）及肌酐（Scr）水平，制作肾组织切片行苏木素-伊红（HE）染色，荧光组织化学观察mMSCs在受体小鼠肾组织的分布，免疫组织化学观察RTECs增强细胞核抗原（PCNA）的表达，TUNEL法检测RTECs凋亡，Westernblot检测建模后第2天肾小管组织中Caspase-3、bcl-2蛋白的表达。结果BrdU标记mMSCs的阳性率可达（98．71±0．32）％。I／R＋BrdU—mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I／R组为低，肾小管损伤病理明显减轻，且小鼠的肾脏中可检测到BrdU’细胞的分布。mMSCs干预后，RTECs细胞核PCNA阳性表达明显增多（P〈0．05或P〈0．01），而细胞凋亡的水平却较I／R组明显减少（P〈0．05或P〈0．01）。Westernblot进一步显示：I／R＋BrdU—mMSCs组小鼠的肾组织中Caspase-3蛋白水平明显下降[（1．16±0．33）比（1．64±0．27），P〈0．01]，而bcl-2水平却明显增高[（O．944-0．27）比（O．684-0．15），P〈0．01]。结论小鼠发生I／R诱导的急性肾损伤后可诱导移植的MSCs向损伤肾组织归巢，锚定在肾脏的MSCs可促进损伤RTECs的再生，抑制其凋亡，从而有助于RTECs的自身修复，延缓肾损害进展。
- 刘楠梅田军程劲胡大勇张金元
- 关键词：骨髓间充质干细胞缺血再灌注肾小管上皮细胞
- 驻海岛官兵心身健康与情境特质应对的相关性分析被引量：10
- 2013年
- 目的探讨海岛官兵心身健康水平与情景特质应对的关系。方法随机整群抽取并按标准剔除后获得499名海岛官兵列入研究组，615名非海岛官兵作为对照组，采用中国军人心理健康测评仪（TR-09）中的中国军人心身健康量表和军人情境特质应对方式量表进行测评，并分析其影响因素。结果海岛官兵心身健康各因子分较非海岛官兵高（t=7．513～24．028，P〈0．01）；海岛官兵心身健康各因子中精神病性、焦虑、抑郁3个因子分较其他因子分高，心血管及皮肤因子分数较低；除眼和耳、神经系统因子外，大专及大专以上文化官兵的心身健康分数较初中及高中文化官兵低（F=0．526～3．245，P〈0．05）；已婚官兵心身健康较未婚官兵好（t=0．663～2．869，P〈0．05）；军官心身健康分数较士兵与士官高（t=-1．434— -4．381，P〈0．05，心血管系统因子除外）；海岛官兵心身健康分值与积极应对呈负相关（r=-0．065— -0．121，P〈0．05，精神病性因子除外），与消极应对呈正相关（r=0．062～0．067，P〈0．05）。结论海岛官兵心身健康状况较差；高文化、已婚与低职务的海岛官兵心身健康状况较好；积极应对有益于官兵的心身健康，消极应对则起破坏作用。
- 牛威王伟忠朱亚清钟祥金灵平薛荣昌
- 关键词：军事人员
