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温敏型生物降解水凝胶载体防龋基因疫苗pVAX1-spap/A经不同途径免疫新西兰大白兔的实验研究被引量：4: 2014年; 目的:观察温敏型生物降解水凝胶PLGA-PEG-PLGA搭载防龋基因疫苗pVAX1-spap/A的免疫效果及重组质粒的原位表达情况。方法:28只新西兰大白兔随机分为7组。首次免疫后1周加强免疫,再1周加强免疫第2次,共3次。每次免疫剂量200μg/只。于免疫前1d和免疫后第1,2,3,4,6,8,10,12,14,16周采集动物血液及唾液标本,间接ELISA法检测特异性抗体IgA和IgG。结果:以温敏型生物降解水凝胶PLGA-PEG-PLGA作为载体的防龋基因疫苗pVAX1-spap/A免疫新西兰大白兔后,特异性IgA和IgG抗体水平明显升高,持续14周,与对照组比较差异有统计学意义。在免疫部位的检查到目的蛋白表达。结论:温敏型生物降解水凝胶PLGA-PEG-PLGA作为载体的防龋基因疫苗pVAX1-spap/A经四种途径免疫新西兰大白兔后,目的蛋白能够在免疫部位表达,能够有效诱导动物的体液免疫和黏膜免疫应答。; 管晓燕李敏刘建国李虎白国辉肖茜文董竞男张丁文; 关键词：基因疫苗水凝胶免疫

蛋白质组学在口腔疾病研究中的应用: 2015年; 蛋白质组一词最早由澳大利亚学者Wilkins等［1］首次提出，是蛋白质和基因组两词的合并，意指“一种细胞、组织乃至一种生物的基因组所表达的全套蛋白质”，鉴定和分析蛋白质组的科学即为蛋白质组学［2］。蛋白质组学除了分离和识别蛋白质，它还利用蛋白质的表达水平以及翻译后的修饰（如磷酸化、羟基化、糖基化、乙酰化）相互之间的作用分析蛋白质的功能。与基因组不同，蛋白质组是动态的，一方面从整体上揭示生物体或细胞的蛋白质活动，另一方面也从机体或细胞的蛋白质水平发现和研究生命活动的生理和病理现象，更具整体性和可调节性。; 肖茜文管晓燕刘建国; 关键词：蛋白质组学口腔疾病标记物

变异链球菌表面蛋白SpaP P区真核表达质粒的构建及表达被引量：3: 2010年; 背景:变异链球菌是龋病的主要致龋菌,针对介导变异链球菌非蔗糖依赖性黏附的重要毒力因子SpaP的基因疫苗在理论上能对抗变异链球菌黏附于牙面和进一步破坏牙体硬组织。目的:构建变异链球菌表面蛋白P区(SpaP/P)真核表达质粒pVAX1-spap/P,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:通过基因重组技术,构建真核表达质粒pVAX1-spap/P,并经酶切分析、测序分析鉴定正确后,采用脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,然后经免疫组织化学SABC法检测其在细胞中的表达。结果与结论:真核表达质粒pVAX1-spap/P经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切分析,证实携带1.2kb的目的基因spap/P片段,经测序分析,目的基因正向插入到预先设计的载体位点处。pVAX1-spap/P转染的细胞胞质呈褐色,pVAX1空载体质粒转染的细胞胞质中无着色。证实实验成功构建真核表达质粒pVAX1-spap/P,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白。; 白国辉刘建国柴巧学曲云鹏管晓燕韩琪杨德琴; 关键词：变异链球菌龋病表面蛋白 PVAX1 真核表达

变异链球菌葡聚糖结合蛋白A真核表达质粒的构建以及在真核细胞中的表达: 目的:构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白A葡聚糖结合区的真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD。通过脂质体转染法,...; 韩琪刘建国曲云鹏柴巧学管晓燕白国辉; 关键词：变异链球菌哺乳动物细胞真核表达 PVAX1; 文献传递

变异链球菌表面蛋白spap P区真核表达质粒的构建及表达: 目的:构建变异链球菌表面蛋白P区(spap/P)真核表达质粒pVAX1-spap/P,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:通过基因重组技术,构建真核表达质粒pVAX1-spap/P,并经酶切分析、测序分析鉴定...; 白国辉刘建国柴巧学曲云鹏管晓燕韩琪杨德琴; 关键词：变异链球菌龋病表面蛋白 PVAX1 真核表达; 文献传递

防龋基因疫苗pVAX1-SG免疫SD大鼠的实验研究: 目的:观察防龋基因疫苗pVAX1-SG经股四头肌肌肉注射、颌下腺区皮下注射及鼻腔粘膜滴注三种不同途径免疫SD大鼠后的免疫效果,并探索最佳免疫途径。方法:出生18天的雄性SD大鼠40只,建立龋齿模型。随机将模型大鼠分为5组...; 姜晶刘建国王伟耿发云王怡丹白朋元亓鹏

变异链球菌表面蛋白A区和葡糖基转移酶催化区嵌合真核质粒的构建及表达: 目的：将变异链球菌表面蛋白PAcA区编码基因spap/A和葡糖基转移酶催化区(CAT) 编码基因gtfB/CAT的序列克隆到真核载体pVAX1中,构建spap/A-gtfB/CAT嵌合质粒pVAX1-SG,并观察其在哺乳...; 曲云鹏刘建国柴巧学杨德琴管晓燕韩琪张剑白国辉; 关键词：变异链球菌表面蛋白葡糖基转移酶真核表达 PVAX1

基因工程嵌合体防龋疫苗的研究现状被引量：3: 2014年; 龋病是一种细菌感染性疾病，变异链球菌族细菌（mu—tans streptococcus，MS）是目前公认的主要病原菌。该菌的蛋白质抗原可诱导机体血清和唾液产生保护性抗体。; 孙天瞳吴志刚刘建国; 关键词：防龋疫苗基因工程细菌感染性疾病嵌合体变异链球菌保护性抗体

水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫兔的实验研究被引量：3: 2014年; 目的观察水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫兔的免疫效果及其目的蛋白在免疫部位的表达。方法 20只新西兰大白兔随机分为5组,每组4只。A组:pVAX1-gtfB/CAT口服组,B组:pVAX1-gtfB/CAT鼻腔黏膜滴注组,C组:空载体pVAX1质粒口服组,D组:空载体pVAX1+水凝胶口服组,E组:生理盐水鼻腔黏膜滴注组。每间隔1周免疫1次,共免疫3次。每次免疫剂量为200μg/只。于免疫前和免疫后第1、2、3、4、6、8、10、12、14、16周采集血液及唾液标本,ELISA法检测血清及唾液中特异性抗体水平。第3次免疫后每组处死1只动物,取免疫部位组织,免疫组织化学检测目的蛋白表达。结果 1水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT免疫兔后,诱导了特异性IgG和SIgA抗体产生,在第6和第8周口服免疫诱导的特异性IgG抗体水平高于鼻腔黏膜滴注,其余时间点两种黏膜途径诱导的SIgA和IgG抗体水平差异无统计学意义;2在小肠黏膜和鼻黏膜均检查到了目的蛋白的表达。结论水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫后,目的蛋白能够在免疫部位表达,均能有效诱导兔的系统免疫和黏膜免疫应答。; 管晓燕李敏刘建国李虎白国辉肖茜文张丁文董竞男; 关键词：基因疫苗龋病免疫

防龋基因疫苗pVAX1-GC免疫SD大鼠的实验研究: 目的:观察基因疫苗pVAX1-GC经不同途径免疫SD大鼠后特异性抗体水平和降低SD大鼠龋齿的程度及疫苗免疫后对动物的安全性影响。方法:①40只出生18天的SD大鼠,雄性,建立龋齿模型后随机分为5组,每组8只,分别为:A组...; 王伟刘建国亓鹏姜晶田源白朋元管晓燕; 关键词：变异链球菌龋病基因疫苗葡糖基转移酶; 文献传递

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贵州省优秀青年科技人才计划([2005]0509)