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国家自然科学基金(81360349)

作品数：18 被引量：40H指数：4
相关作者：刘杰麟潘卫东张荣红刘金河郑艺更多>>
相关机构：贵州医科大学中国科学院广东省中医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目贵州省国际科技合作计划更多>>
相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 18篇中文期刊文章

领域

  • 16篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 11篇细胞
  • 8篇肿瘤
  • 7篇乳腺
  • 7篇乳腺癌
  • 7篇腺癌
  • 6篇汉防己
  • 6篇防己
  • 5篇甲素
  • 5篇汉防己甲素
  • 4篇增殖
  • 4篇细胞增殖
  • 4篇BLM
  • 3篇单克隆
  • 3篇单克隆抗体
  • 3篇乳腺肿
  • 3篇乳腺肿瘤
  • 3篇腺肿瘤
  • 3篇解旋酶
  • 3篇抗体
  • 3篇克隆

机构

  • 16篇贵州医科大学
  • 3篇中国科学院
  • 1篇贵阳中医学院
  • 1篇贵阳医学院
  • 1篇贵州省人民医...
  • 1篇广东省中医院
  • 1篇甘肃农业大学
  • 1篇贵阳中医学院...
  • 1篇南充市中心医...
  • 1篇遵义市第一人...
  • 1篇西北民族大学
  • 1篇贵州中医药大...

作者

  • 15篇刘杰麟
  • 4篇潘卫东
  • 4篇张荣红
  • 4篇刘金河
  • 3篇何志旭
  • 3篇郑艺
  • 2篇周孟
  • 1篇郭晔红
  • 1篇马爱爱
  • 1篇李沫
  • 1篇廉芳
  • 1篇娄华勇
  • 1篇颜登国
  • 1篇鲁媛
  • 1篇张望明

传媒

  • 7篇贵州医科大学...
  • 2篇山东医药
  • 2篇中国药理学通...
  • 2篇肿瘤
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇生物学杂志
  • 1篇江苏农业科学
  • 1篇贵阳医学院学...
  • 1篇细胞与分子免...

年份

  • 1篇2023
  • 2篇2022
  • 4篇2019
  • 5篇2018
  • 2篇2017
  • 3篇2016
  • 1篇2014
共 18 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
戴氏虫草菌丝体抗肿瘤化学成分研究被引量：6
2017年
研究戴氏虫草菌丝体抑制肿瘤细胞增殖活性有效部位的化学成分及其抑制肿瘤细胞活性。采用液体深层发酵制备戴氏虫草菌丝体,MTT法筛选其抑制肿瘤细胞增殖活性的有效部位,反复正相柱层析,Sephadex LH-20等方法分离纯化其有效部位中的化学成分,利用EI、ESI及1D-NMR等技术对其结构进行鉴定;并研究他们对肿瘤细胞增殖的抑制活性。结果显示,戴氏虫草菌丝体石油醚、乙酸乙酯萃取部位为抑制肿瘤细胞增殖活性部位,并从中分离得到6个化合物,分别为反式-16-十八碳烯酸(化合物1)、壬二酸(化合物2)、5α,8α-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(化合物3)、亚油酸甲酯(化合物4)、亚油酸(化合物5)和十七-烷醇(化合物6)。活性检测表明,化合物2对舌癌Tca-8113细胞增殖具有较高的抑制活性,IC50值为31.90μmol/L,化合物3对乳腺癌MDA-MB-435细胞和BT474细胞具有较高的细胞增殖抑制活性,IC50值分别为25.57、26.31μmol/L。从戴氏虫草菌丝体抑制肿瘤细胞增殖的活性部位中分离到6个化合物,化合物1~2、4~6为首次从该菌丝体中分离得到。化合物2、3分别选择性地对Tca-8113细胞和MDA-MB-435细胞、BT474细胞有较强的细胞增殖抑制活性,可能为戴氏虫草菌丝体抑制肿瘤细胞增殖的有效成分。
刘柏岑潘卫东娄华勇晏文涛吴翱兰刘杰麟
关键词：菌丝体单体化合物MTT法抑制肿瘤细胞增殖
抗RecQ解旋酶单克隆抗体6H5在几种肿瘤细胞中的初步应用
2018年
目的:制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体(6H5抗体),鉴定其生物学特性并开展其对肿瘤细胞及肿瘤干细胞中RecQ解旋酶的检测。方法:在Balb/c小鼠腹腔接种杂交瘤细胞6H5后收集腹水,ELISA法鉴定腹水中6H5抗体,间接免疫荧光技术检测6H5抗体与乳腺癌细胞MDA-MB-435、人肾癌细胞GRC-1、人舌癌细胞Tca8113中BLM、RecQ4和RecQ5的结合;以6H5抗体作为一抗,免疫组织化学染色法分析Jurkat、MDA-MB-435肿瘤细胞及肿瘤干细胞中RecQ解旋酶的表达水平。结果:经鉴定,小鼠腹水中6H5抗体阳性,该抗体能识别不同肿瘤细胞株中的BLM、RecQ4和RecQ5解旋酶,还可敏锐检测Jurkat、MDA-MB-435肿瘤细胞与肿瘤干细胞中RecQ解旋酶的表达; RecQ解旋酶在Jurkat肿瘤干细胞中表达水平明显高于Jurkat肿瘤细胞,而在MDA-MB-435肿瘤干细胞表达水平则低于MDA-MB-435肿瘤细胞,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论:RecQ家族解旋酶可以作为多种肿瘤细胞及肿瘤干细胞表面标志物的备选指标。
张荣红廉芳周孟贾铁文何志旭刘杰麟
关键词：单克隆抗体免疫荧光免疫组织化学染色肿瘤
无血清培养富集乳腺癌干细胞的初步研究被引量：4
2014年
目的:探讨富集乳腺癌干细胞的方法,以获得稳定数量的肿瘤干细胞。方法:(1)采用无血清悬浮培养方法,从乳腺癌MDA-MB-435细胞中筛选和培养肿瘤干细胞。(2)采用相差显微镜观察含胰岛素和不含胰岛素的无血清培养基中干细胞球形成大小、数量及随时间生长变化情况。(3)采用荧光显微镜观察Hoechst33342染料对MDA-MB-435肿瘤干细胞染色情况。(4)将MDA-MB-435肿瘤干细胞转入有血清培养基培养诱导分化,观察是否能有分化现象。结果:(1)采用无血清悬浮培养方法筛选和培养MDA-MB-435肿瘤干细胞成功。(2)发现不含胰岛素的无血清培养基中,形成的肿瘤干细胞团数量多且体积大。(3)随着培养时间延长,肿瘤干细胞球数量逐渐增多,体积逐渐变大。(4)Hoechst33342染料对肿瘤干细胞染色鉴定,约有90%肿瘤干细胞蓝色荧光染料较弱,呈暗淡区。(5)MDA-MB-435肿瘤干细胞经含血清培养基再次培养,具有分化功能。结论:含生长因子的无血清培养基培养MDA-MB-435细胞,可生成肿瘤干细胞球;不含胰岛素的无血清培养基更适合作为筛选肿瘤干细胞的培养基。
廉芳葛章文李红陆核刘杰麟
关键词：肿瘤干细胞乳腺肿瘤细胞培养无血清培养基
敲除BLM基因的MDA-MB-231乳腺癌细胞株的构建
2018年
目的:应用规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR/Cas9)技术构建敲除BLM基因的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株。方法:根据CRISPR/Cas9技术靶点设计原则,在BLM基因的3号外显子设计2条靶向小向导RNA(sgRNA),利用PX459 V2质粒载体,构建PX459 V2-sgRNA重组质粒;将建构成功的重组质粒转染至MDA-MB-231细胞中,通过嘌呤霉素筛选获得阳性克隆,使用Cruiser^(TM)核酸内切酶检测打靶效率,将打靶效率较高的阳性克隆进行单克隆培养,再利用免疫印迹法检测筛选出敲除BLM基因的MDA-MB-231乳腺癌细胞株。结果:测序结果表明重组质粒构建成功,免疫印迹法显示敲除BLM基因后的MDA-MB-231细胞中BLM蛋白明显降低,与空白对照组相比,BLM-KO组BLM表达水平明显低于对照组。结论:应用CRISPR/Cas9技术成功构建了BLM基因敲除的MDA-MB-231细胞株。
黄晏军郑艺汤长宁刘金河刘杰麟
关键词：基因敲除MDA-MB-231细胞乳腺癌
汉防己甲素衍生物HL-27对BLM解旋酶生物学特性的影响
2018年
目的研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法利用荧光偏振技术研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性、解链活性的影响;利用孔雀绿-磷钼酸铵比色法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的影响;利用紫外吸收光谱法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶构象的影响。结果当HL-27浓度达到33.34μmol·L^(-1)时,其对dsDNA或ssDNA与BLM^(642-1290)解旋酶结合活性的抑制率分别为41.35%、59.54%;当HL-27浓度达到50 μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶解链活性的抑制率为78.68%;当HL-27的浓度为100μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的抑制率为43.8%。结论汉防己甲素衍生物HL-27可以抑制BLM^(642-1290)解旋酶的DNA结合活性、解链活性与ATPase活性。
张望明葛章文晏文涛潘卫东焦彦朝刘杰麟
关键词：荧光偏振结合活性ATPASE活性
结肠癌组织中BLM、RECQ4的表达水平及临床意义被引量：4
2018年
目的:检测结肠癌组织中BLM解旋酶和RECQ4解旋酶的表达水平,分析其与结肠癌临床病理特征的关系。方法:选取手术切除的结肠癌组织及其癌旁结肠组织标本54对,采用免疫组织化学染色的方法检测结肠癌组织及癌旁组织中BLM及RECQ4蛋白的表达,比较不同TNM临床分期和分化程度的结肠癌患者癌组织中BLM和RECQ4蛋白水平。结果:BLM和RECQ4蛋白在结肠癌及癌旁组织中均有表达,但在癌组织中BLM和RECQ4蛋白表达水平高于癌旁组织(P <0. 05); BLM和RECQ4蛋白在Ⅲ期结肠癌组织中的表达水平高于Ⅱ期和Ⅰ期结肠癌组织(P <0. 05),低分化结肠癌组织中BLM和RECQ4蛋白的表达水平高于中分化和高分化结肠癌组织(P <0. 05)。结论:BLM和RECQ4在结肠癌组织中高表达,且与TNM临床分期和组织病理学分型相关,可作为结肠癌诊断和预后判断的指标。
郑艺刘杰麟韩莹冯江龙
关键词：结肠肿瘤肿瘤分期免疫组织化学染色
乳腺癌干细胞BLM、RecQ4蛋白表达变化及意义被引量：2
2017年
目的探讨乳腺癌干细胞BLM、RecQ4蛋白表达变化及其临床意义。方法采用无血清培养法从乳腺癌MDA-MB-435细胞中分离乳腺癌干细胞(以下称干细胞),并鉴定。观察MDA-MB-435细胞裸鼠及干细胞成瘤能力,RT-PCR法检测二者ATP结合盒膜转运蛋白G2(ABCG2)mRNA相对表达量,Western blotting法和免疫组化法检测二者BLM、RecQ4蛋白表达。结果干细胞膜表面CD44+CD24-/low比例明显高于、CD44+CD24+比例明显低于MDA-MA-435细胞(P均<0.05);两种细胞膜表面CD44-CD24+、CD44-CD24-比例比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。裸鼠成瘤实验结果显示,与接种相同密度MDA-MB-435细胞比较,接种干细胞的裸鼠成瘤时间早、肿瘤体积大;干细胞ABCG2 mRNA相对表达量为0.753±0.025,MDA-MB-435细胞为0.563±0.112;两者比较P<0.05。干细胞BLM蛋白表达低、RecQ4蛋白表达高于MDA-MB-435细胞(P均<0.05)。结论乳腺癌干细胞成瘤能力强;细胞BLM蛋白表达降低、RecQ4蛋白表达升高可能为其机制。
鲁媛葛章文刘杰麟
关键词：乳腺癌无血清培养乳腺癌干细胞
抗RecQ解旋酶单克隆抗体的制备、鉴定及应用被引量：3
2018年
目的制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体(m Ab),鉴定其生物学特性并开展其对肿瘤细胞中RecQ解旋酶的检测。方法以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗RecQ解旋酶m Ab。用秋水仙素阻断法对杂交瘤细胞进行染色体核型分析,用间接ELISA检测m Ab的免疫球蛋白(Ig)亚型与效价,用Western blot法和荧光偏振技术鉴定m Ab的生物学特性,使用间接免疫荧光技术检测m Ab与MDA-MB-231乳腺癌细胞中BLM、RecQ4和RecQ5的作用。使用免疫组织化学染色法分析该m Ab与K562肿瘤细胞及其干细胞中RecQ解旋酶的结合。结果获得能稳定分泌抗RecQ解旋酶m Ab的杂交瘤细胞株6H5,染色体数目在94~104,抗体亚型为Ig G1型,腹水效价为1×10-7。该m Ab能特异性结合大肠杆菌RecQ解旋酶,抑制其与DNA的结合,并能识别BLM、RecQ4和RecQ5解旋酶,还可敏锐检测K562肿瘤细胞与肿瘤干细胞中RecQ解旋酶的表达。结论成功制备获得效价高、特异性强的抗RecQ解旋酶m Ab。
张荣红贾铁文廉芳刘杰麟周孟
关键词：单克隆抗体
汉防己甲素衍生物对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用及其机制被引量：5
2016年
目的 :探讨汉防己甲素衍生物HL-42和HL-49对三阴性乳腺癌MDAMB-231细胞增殖、克隆形成能力以及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :采用不同浓度的HL-42和HL-49分别作用MDA-MB-231细胞后,应用MTT法检测细胞的增殖情况;平板克隆形成实验检测对细胞克隆形成的影响;2和10μmol/L的HL-42和HL-49分别作用于MDA-MB-231细胞24 h后,应用FCM法检测对细胞凋亡的影响;分别采用半定量RTPCR法和蛋白印迹法检测细胞中Bloom综合征解旋酶(Bloom’s syndrome helicase,BLM)、人乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)和同源重组修复的关键酶Rad51 m RNA及蛋白的表达水平。结果:1.25~10μmol/L的HL-42和HL-49处理24、48和72 h后,MDAMB-231细胞的增殖受到抑制,呈时间和浓度依赖性(P值均<0.05),HL-42作用于MDA-MB-231细胞24、48和72 h的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值分别为(8.27±0.27)(、3.92±0.39)和(2.72±0.14)μmol/L;相应的HL-49的IC50值分别为(5.30±0.45)、(3.19±0.32)和(1.64±0.12)μmol/L;而阳性对照顺铂的IC50值则为(61.96±3.83)、(29.08±4.11)和(16.19±2.53)μmol/L。0.2、0.5、1和5μmol/L的HL-42和HL-49均可抑制MDA-MB-231细胞克隆的形成(P值均<0.001)。2和10μmol/L的HL-42和HL-49均可诱导MDA-MB-231细胞凋亡,且有浓度依赖性(P值均<0.05)。2μmol/L的HL-42处理24 h后,MDA-MB-231细胞中的Rad51 mR NA及蛋白的表达水平无明显变化(P值均>0.05);10μmol/L的HL-42处理24 h后,MDA-MB-231细胞中的Rad51 m RNA及蛋白的表达水平下调(P值均<0.05);2和10μmol/L的HL-42处理24 h后,MDA-MB-231细胞中BLM和BRCA1 m RNA及蛋白表达水平无明显变化(P值均>0.05)。2μmol/L的HL-49处理24 h后,MDA-MB-231细胞中的BRCA1 m RNA及蛋白表达水平无明显变化(P值均>0.05),10μmol/L的HL-49处理24h后,MDA-MB-231细胞中的BRCA1 m RNA及蛋白表达水平下调(P值均<0.01);2和10μmol/L的HL-49处理24 h后,MDA-MB-231细胞中的BLM、Rad51 m R
吴翱兰张荣红黄晏军郑艺潘卫东刘杰麟
关键词：乳腺肿瘤粉防己碱细胞增殖
汉防己甲素衍生物HL-49协同顺铂或多柔比星促进三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡被引量：4
2019年
目的:研究汉防己甲素衍生物HL-49协同顺铂(cisplatin,DDP)或多柔比星(adriamycin,ADM)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:用不同浓度的HL-49、DDP、ADM单药以及HL-49联合DDP或ADM处理MDA-MB-231细胞;采用MTT法检测细胞的增殖抑制率并计算Q值,平板克隆实验检测细胞的集落形成能力,FCM法检测细胞的凋亡率并计算Q值;蛋白质印迹法检测细胞中Bloom综合征解旋酶(Bloom’s symdrome helicase,BLM)、乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)和DNA修复关键酶Rad51以及凋亡相关蛋白caspase 3、caspase 8、 caspase 10、Bax、p53和Bcl-2蛋白的表达水平。结果:与HL-49、DDP和ADM单药组相比,HL-49(1或2μmol/L)联合DDP(5或10μmol/L)或ADM(2或5μmol/L)组MDA-MB-231细胞的增殖抑制率均明显提高(P值均<0.05),其中HL-49联合DDP(单药浓度两两组合)4个浓度组的Q值分别为2.04、1.88、1.87和1.83,HL-49联合ADM的Q值分别为1.37、1.21、1.36和1.23,两药联用均具有协同效应。在平板克隆形成实验中,联合用药组细胞的集落形成数均较单药组明显减少(P值均<0.05)。HL-49(1或2μmol/L)联合DDP(5或10μmol/L)或ADM(2或5μmol/L)组MDA-MB-231细胞的凋亡率均高于单药组(P值均<0.05),其中HL-49联合DDP的Q值分别为1.20、1.35、1.70和2.06,HL-49联合ADM的Q值分别为1.48、1.17、1.99和2.13,提示两药联用有协同作用。HL-49联合DDP或ADM用药组MDA-MB-231细胞中的caspase 3、caspase 8、caspase 10和Bax蛋白的表达水平均较单药组明显上调(P值均<0.05),Rad51、BRCA1、BLM、p53和Bcl-2蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.05)。结论:汉防己甲素衍生物HL-49与DDP或ADM联合用药均具有协同作用,且其联用抗肿瘤活性可能与诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡相关。
汤长宁吴翱兰刘金河刘金河杨爽何志旭何志旭
关键词：粉防己碱抗肿瘤联合化疗方案
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